安宁河流域鸭瘟、鸭霍乱综合防制研究──免疫鸭体内巴氏杆菌抗体消长规律

以巴氏杆菌Ａ群菌苗免疫建昌鸭后,测定其抗体消长规律,对攻毒前后抗体进行比较,并用血凝抑制试验鉴别其抗体类型。结果表明：（１）注苗后５～６ｄ抗体就可达４个ｌｏｇ２及其以上,２９日龄鸭免疫后４０ｄ内,抗体在４个ｌｏｇ２及其以上,５０ｄ时不足４个ｌｏｇ２;３月龄鸭免疫后１１３ｄ内,抗体在４个ｌｏｇ２及其以上,１４６ｄ时为３．８１个ｌｏｇ２,１６５ｄ为２．４１个ｌｏｇ２;（２）攻毒后１５ｄ,抗体普遍比攻毒前下降约１个滴度,但攻毒后３０ｄ抗体比攻毒前高１～２个滴度。当抗体达４个ｌｏｇ２时,具有完全保护性,能抵抗人工感染和自然感染;（３）巴氏杆菌抗体以ＩｇＭ为主（ＩｇＧ甚微）,注苗后的回忆反应很不明显,这可能是巴氏杆菌苗免疫期较短的重要原因。     

转基因植物生长亚单位疫苗的研究进展（下）

植物生产高附加值的医药制品是分子农业的重要研究领域，植物生产疫苗技术，开辟了疫苗生产的新纪元。与传统的动物反应器相比，植物反应器生产可食疫苗具有生产简便、成本低廉、易贮存和运输、使用方便、无需训练有素的医务人员等诸多优势，目前已经用于乙型和丙型肝炎、麻疹、霍乱等二十多种人和动物疫苗的开发研究，至少已有4种疫苗进入了临床实验阶段。本文就转基因植物生产亚单位疫苗的现状、作用机理、优越性、存在的问题和对策进行综述。     

牛凸隆病毒HE基因分子特征分析

本研究旨在分析我国牛凸隆病毒（bovine torovirus,BToV）的HE基因分子特征。采用RT-PCR方法检测辽宁、河南、四川的牛腹泻样本中BToV,阳性样本扩增完整HE基因。结果显示：从94份腹泻粪便中检出10份BToV阳性,平均阳性率约为10.64%。从10份阳性样本中扩增得到15条HE基因,其中,9条为基因Ⅱ型,6条为基因Ⅲ型;10份阳性样本中有5份存在Ⅲ型和Ⅱ型毒株的混合感染,1份单独感染Ⅲ型毒株,4份单独感染Ⅱ型毒株。与GenBank中其他Ⅲ型HE基因相比,本研究获得的6条Ⅲ型HE基因具有4个相同的氨基酸突变,其中2个位于凝集素结构域,可能会影响受体结合功能。重组分析表明,BToV Ⅲ型毒株可能是Ⅱ型毒株与Ⅰ型毒株重组而来。本研究首次证实了基因Ⅲ型BToV在我国牛群中存在,报道了Ⅲ型与Ⅱ型毒株混合感染的情况,为国内牛腹泻病的防控和BToV的遗传进化研究提供了参考。     

Erwinia chrysanthemi分离株CSCL006 hrpN基因的克隆与高效表达

通过构建Erwiniachrysanthemi分离株CSCL006的DNA文库,克隆出hrpNCSCL006基因,测序结果显示该基因编码区长1020bp;推导的harpinCSCL006与ErwiniachrysanthemiEC16和3937编码的harpin蛋白同源性高,但与其它软腐菌的harpin蛋白同源性较低;在大肠杆菌中(Escherichiacoli)高效表达了hrpNCSCL006基因,重组harpinCSCL006蛋白分子量为34kD。以抗harpinEcc的抗体为探针,Westernblot证实该蛋白确为harpin;纯化的harpinCSCL006,能引起烟叶的过敏反应。     

山羊源绵羊肺炎支原体的耐药谱型分析

采用微量稀释法对从四川自贡、简阳、乐至等地分离的33株山羊源性绵羊肺炎支原体进行19种抗菌药物MIC值测定,试验数据利用WHONET5.4软件处理并分析其耐药谱型。试验结果表明,33株绵羊肺炎支原体对19种抗菌药物表现出多重耐药性,其耐药谱型以耐氯霉素、链霉素、红霉素、头孢噻呋、阿米卡星、利福平为主,约占78.79%。     

鸭嗜水气单胞菌病的诊断及防治

2004年8月,成都郊区多个鸭场中暴发临床症状和病理变化与鸭病毒性肝炎(D H)相似的传染病,用抗D H高免蛋黄液治疗无效,经病原分离鉴定诊断为鸭嗜水气单胞菌病。1发病情况发病鸭群多为8～20日龄的樱桃谷或奥白星雏鸭,突然发病,先是有个别突然死亡,第2天开始出现大量死亡,日死亡数     

四川部分鸡场禽网状内皮组织增生症病毒感染情况调查

对四川部分鸡场禽网状内皮组织增生症病毒(REV)感染情况进行调查,为鸡群REV净化和防控提供依据。采用文献报道的PCR方法,分别对来自四川新津、温江、眉山、大邑、崇州和德阳等地6个肉种鸡群共160只外表健康鸡或生长发育不良、具有腺胃炎症状的鸡只样本进行PCR检测,同时将扩增片段克隆测序以确定其正确性。结果表明,6个鸡群REV群体阳性率均为100%(6/6),其中外表健康鸡REV检出率为65.8%(79/120),患腺胃炎病鸡REV检出率为82.5%(33/40);同一只鸡不同组织器官样本的检测结果显示,REV在骨髓和法氏囊中的检出率最高,分别为30%(36/120)和28.3%(34/120),提示骨髓和法氏囊是REV检测的主要靶器官;患腺胃炎鸡的腺胃中REV检出率达25%(10/40),而外表健康鸡腺胃样本REV阳性率仅0.8%(1/120),表明REV是导致鸡腺胃炎的重要病原之一。     

川西北牦牛肉中产志贺毒素大肠杆菌的分离鉴定及stx2基因的序列分析

为了解中国川西北牦牛肉中产志贺毒素大肠杆菌(STEC)的携带情况及stx2的亚型和特征,试验将采集的204份川西北牦牛肉样品(各25g)增菌培养后,每份挑取5个可疑菌落,采用stx1、stx2双重PCR方法检测STEC,对分离株中的stx2分型并克隆测定stx2编码区序列。结果显示,在204份样品中分离出8株STEC,平均分离率为3.9%(8/204);存在4个不同的O血清型,分别为O38(4)、O50(1)、O74(2)、O150(1);在6株含有stx2的菌株中,其中有2株为stx2a型、4株为stx2c型。结果表明牦牛源分离株氨基酸序列与人源和牛源菌株同源性较高;由stx2A、B亚基的氨基酸序列系统进化树可知,牦牛源分离株与人源、牛源菌株聚为一支,表明它们之间遗传距离相对较近,牦牛源stx2各自分布在自己的小分支中,表明牦牛源STEC stx2与人源和牛源stx2相比,尽管亲缘关系较近,但仍存在一定程度的差异。     

基因C型鸭甲型肝炎病毒分子生物学研究进展

鸭甲型病毒性肝炎是雏鸭的一种具有高度传染性的疾病,以急性发病、高病死率为特征。近年来,由基因C型鸭甲型肝炎病毒(DHAV-C)引起的鸭甲型病毒性肝炎广泛流行于中国和韩国,严重影响养鸭业的发展。论文对DHAV-C的发现、分类地位、基因组结构及遗传进化等方面进行综述。     

脂多糖染毒小鼠稳定内参基因的筛选

本研究旨在筛选脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)染毒小鼠的理想内参基因。试验以健康小鼠肝脏和LPS染毒后3、6、12、18 h的小鼠肝脏为研究对象,荧光定量RT-PCR评价YWHAZ、HPRT1、PPIA、ACTB和18S rRNA 5个内参基因的表达情况,并用geNorm软件分析其表达的稳定性。结果表明,除18S rRNA在LPS染毒时不能稳定表达外,其余4个内参基因在健康小鼠肝脏和LPS染毒小鼠肝脏中均能稳定表达,其中PPIA和YWHAZ的表达最稳定。本试验结果为荧光定量RT-PCR研究LPS与小鼠相互作用时mRNA表达水平提供了依据。