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【目的】研究不同浓度的氨基酸对仔猪原代肝细胞尿素循环的影响及其机理。【方法】5日龄仔猪门静脉灌流后从中分离纯化出肝细胞并进行培养,在培养基中添加不同浓度的氨基酸(分别为猪血液中氨基酸生理浓度的1、2和4倍),24 h后收集上清和细胞。用比色法检测上清中尿素、底物氨和细胞中氨的浓度以及谷氨酰胺酶(Glutaminase,GLS)和谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)的活性,实时荧光定量PCR法检测细胞中氨甲酰磷酸合成酶1(Carbamyl phosphate synthetase 1,CPS1)、精氨基琥珀酸合成酶(Argininosuccinate synthetase,ASS)、精氨琥珀酸裂解酶(Argininosuccinate lyase,ASL)、鸟氨酸氨甲酰转移酶(Omithine transcarbamylase,OTC)和精氨酸酶(Arginase,ARG)等尿素循环相关酶基因m RNA的表达。【结果】4倍氨基酸组显著提高了仔猪原代肝细胞培养上清中氨和尿素的浓度,增强了细胞中GLS的活性。荧光定量PCR结果表明,4倍氨基酸组显著提高了细胞中CPS1、ASS和ASL等基因m RNA的表达。1.0和2.0 mmol·L~(-1)的NH4Cl显著促进细胞尿素的合成。【结论】在仔猪原代肝细胞中,高浓度氨基酸可以通过提高GLS的活性等途径加速氨的积累,促进CPS1、ASS、ASL等尿素循环相关酶基因m RNA的表达,从而促进尿素的生成。 相似文献
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为探究小肽复合制剂对断奶仔猪生产性能、腹泻率及血液相关指标的影响,选用120头31日龄断奶仔猪随机分为4组,每组3个重复,每个重复10头猪(公母各半).A组为对照组,饲喂基础日粮,B、C和D组为试验组,在基础日粮中用5%的玉米替代等量的豆粕后分别添加500、1 000、2 000 g·t-1的小肽复合制剂,同时调整日粮赖氨酸水平.试验期为28 d.试验结果:与A组相比,C和D组的平均日增质量、平均日采食量、耗料增质量比、白蛋白质量浓度和单位增质量成本无显著差异(P>0.05),但有效降低了仔猪的腹泻率,且在59日龄时C组和D组血清尿素氮水平显著低于对照组;B组在45、59日龄时生产性能、白蛋白浓度均低于对照组,且在45日龄时差异显著.结果表明添加500 g·t-1小肽复合制剂不能完全弥补用5%玉米替代豆粕所造成的日粮蛋白质降低;添加1 000、2 000 g·t-1小肽复合制剂在一定程度上能改善仔猪对蛋白质利用率,弥补用5%玉米替代等量豆粕而降低的日粮蛋白质水平,并能降低腹泻率. 相似文献
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新生仔猪小肠上皮细胞体外培养的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用灌肠消化、组织块消化、机械刮取+胰蛋白酶消化和机械刮取+胶原酶消化等4种方法对仔猪小肠黏膜上皮细胞(Intestinal epithelial cell, IEC)的体外分离培养进行了比较.结果表明,使用机械刮取+胶原酶消化法分离IEC,可简便快速地获得数量大、活性高的小肠上皮细胞,其中原代培养细胞24 h出现贴壁,7~8 d明显增殖,10~12 d贴壁细胞汇合成片,18~21 d细胞呈"铺路石"状;传代培养细胞3 h出现贴壁,3~4 d快速增殖.采用碱性磷酸酶显色反应检测,90%以上的贴壁细胞呈阳性反应. 相似文献
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为深入探究不同运动方式和运动强度对正常雄性动物生殖机能的影响,本研究以C57BL/6J小鼠为研究模型,将32只11周龄雄性小鼠随机分为对照组、(EE)组、短期有氧运动(AAE)和长期有氧运动(CAE)组,运动结束后采集血液、睾丸、附睾样品,检测血清睾酮水平,分析睾酮曲细精管管腔面积和生精标志基因表达、精子形态等差异。结果表明:与对照组小鼠相比,EE组小鼠血清睾酮水平显著降低,睾丸类固醇转运蛋白STAR的mRNA表达显著降低,且睾丸曲细精管和附睾管管壁形态不完整,精子总数降低,精子畸形率显著增加;AAE组小鼠睾丸发育及精子品质与对照组接近,但CAE组小鼠血清睾酮水平较对照组显著升高,睾丸类固醇转运蛋白STAR的mRNA表达水平显著增加,睾丸曲细精管空腔面积显著降低,精子畸形率显著降低。上述结果说明,长期有氧运动是提高小鼠生殖机能的有效方式,短期有氧运动无此效应,急性力竭运动有损小鼠的生殖能力。 相似文献
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本试验旨在探讨日粮添加牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)对热暴露小鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)表达和分泌的影响。选用36只3周龄雌性C57BL/6J小鼠,按体重将小鼠分为3组(每组12只),即对照组(25℃,饲喂基础日粮),热暴露组(10:00-18:00,35℃;18:00-10:00,30℃;饲喂基础日粮),TUDCA组(10:00-18:00,35℃;18:00-10:00,30℃;饲喂添加0.25%TUDCA的基础日粮),试验周期为5周。每周记录小鼠的体重、采食量、饮水量。试验结束后分离血清,用ELISA方法检测血清GnRH的水平,采集下丘脑,利用qPCR和Western blot方法分别检测下丘脑中GnRH的mRNA和蛋白表达。结果显示:热暴露能显著降低小鼠的采食量,提高饮水量,TUDCA能一定程度恢复热暴露对小鼠采食量和饮水量的影响;热暴露显著降低小鼠下丘脑GnRH表达和血清中GnRH的水平,TUDCA能逆转热暴露对小鼠下丘脑GnRH表达和分泌的影响。综上,日粮添加TUDCA可缓解热暴露导致的小鼠下丘脑GnRH的表达和分泌的降低,研究结果为动物热暴露的营养调控提供了理论基础和试验依据。 相似文献
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