中药生物碱成分的毛细管电泳分析

介绍了毛细管电泳的发展、分离模式及特点,综述了近10年来毛细管电泳在中药生物碱成分分析中的应用.     

水稻矮缩病毒对3种内源激素含量及代谢相关基因转录水平的影响

本文以抗病品种宜香2292(Oryzas ativa L. ssp. indica cv. Yixiang 2292)为材料,采用高效液相色谱技术(HPLC)和Real-time PCR技术研究了水稻矮缩病毒(Rice dwarfvirus,RDV)胁迫下水稻内源赤霉素(GA3)、生长素(IAA)和脱落酸(ABA)的动态变化。结果表明,受RDV侵染后,病株体内GA3含量显著低于健株,在显症后的第1d和第10d最为明显,分别较健株低6.28和5.92倍;IAA含量呈现波动变化,但病株体内的IAA含量始终较健株低,在显症后的10d最为明显,比健株低3.58倍;与GA3和IAA相反,病株体内ABA的含量始终高于健株,显症后的第1d和第13d最为明显,分别较健株高2.29和2.84倍。Real-time PCR定量检测了植物内源激素相关基因mRNA的表达,结果显示,GA3代谢相关的氧化还原酶基因表现为下调,而IAA和ABA代谢相关的Cullin-1和P-glycoprotein1基因表现出不同程度的上调。以上结果表明:水稻矮缩病的症状表现可能与病株体内的植物内源激素失调有关。     

甘蔗白叶病的发生及其病原体的电子显微镜观察

 本文首次报道甘蔗白叶病在我国福建、广东、广西和云南等蔗区的发生及其病原体的电子显微镜观察结果。研究表明:上述蔗区中有与国外和我国台湾报道相同的白叶病发生,福建蔗区尤为严重;调查过的200多个甘蔗品种或品系中,发病品种有闽糖70/611、闽选703、F134、桂糖-11、云蔗71/388、PR77/3120、Q88、Co740/Co281/PR64/610、H54/775和H54/432等近20个品种;症状上主要有白化和草苗化两类;电子显微镜下,可见病叶韧皮部筛管细胞中有类菌原体存在,球形或椭圆形等,直径约80-800毫微米,健株中则否。     

丁香假单胞菌基因组内简单重复序列的比较分析

【目的】分析丁香假单胞菌3个致病变种基因组内简单重复序列(simple sequence repeats,SSR),为病菌SSR标记开发和遗传多样性研究提供有用信息。【方法】基于公共的基因组数据库资源,对3个菌株的完全重复SSR和不完全重复SSR的丰度和组成类型等进行分析。【结果】3个菌株完全重复SSR的分布规律较为相似,其中单碱基的短重复SSR均占绝对优势,多碱基和长重复SSR则较少;菌株B728a、1448A和DC3000的不完全重复SSR总数也较相近,分别为562、529和567,其中数量最多的均为六碱基重复。但3个菌株以四、五和六碱基为基序的SSR在基序组成和数量上则表现出较高的变异性,完全重复SSR中,除AGCC、ACCTGC等基序在两个菌株中同时出现,绝大多数基序仅在单个菌株基因组内出现;不完全重复SSR中,部分基序如CCCTG、ACGCA等的出现频率在不同菌株间存在明显差异。【结论】3个菌株的不完全重复SSR在数量和结构类型上均具有较大的相似性,而菌株间的完全重复SSR在数量和组成上则存在一定差异。     

水稻条纹病毒中国分离物和日本分离物RNA1片段序列比较

 首次测定了我国水稻条纹叶枯病常年流行区的云南楚雄(CX)及病害暴发区的江苏洪泽(HZ)的RSV 2个分离物RNA1片段的全长序列,这2个分离物RNA1片段的全长序列均为8970 nts。同源性分析结果表明,HZ与日本T分离物的亲缘关系较CX与T分离物的亲缘关系更为接近。通过对纤细病毒属病毒RNA1编码的依赖于RNA的RNA聚合酶(RdRp)氨基酸序列分析的结果表明,该蛋白除了具有RNA聚合酶特征的基元序列结构外,还存在mRNA的转录过程中所采取的加帽起始机制的保守性结构域位点,这表明,纤细病毒属病毒和布尼安病毒科病毒及甲型流感病毒一样,都是采取加帽起始机制进行转录的。     

水稻条纹病毒病害特异性蛋白基因克隆及其与纤细病毒属成员的亲缘关系分析

由水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)引起的水稻条纹叶枯病于20世纪初始发于日本关中一带,1963年在我国苏、浙、沪一带首次爆发成灾,现已扩展蔓延到全国18个省、市、自治区的水稻种植区。从2000年该病害在江苏、河南等地再次爆发成灾,发病面积达50％以上,严重制约了当地的稻米生产,已成为该地区水稻主要病害之一。 RSV是纤细病毒属(Tenuivirus)的代表种,其 RNA4编码的病害特异性蛋白(disease specific pro- tein,SP)在病叶的积累量与病害症状的严重度存在密切的关系。本文对发生于云南和江苏不同稻区的RSV的SP基因进行了分子克隆和序列比较分析,并对纤细病毒属6种病毒之间的亲缘关系进行了分析。     

烟草赤星病拮抗菌株B75产生抗菌物质的条件

从烟草根际分离筛选到一株可产生抗烟草赤星病菌物质的枯草芽孢杆菌菌株B75。在以NB培养液进行试验时发现，B75在对数生长的中期开始产生抗菌物质，在生长的衰退期前存在一个产生抗菌物质的高峰期；在25～50℃、pH4．0～8．5范围内均可产生抗菌物质，其中30℃和pH6．0的培养条件下最适。不同的装液量试验结果表明，在三角瓶装液量为100ml／500ml时，是B75菌株菌体生长及产生抗菌物质的最适宜量。不同的碳、氮源试验结果表明，甘露醇、酵母膏最有利于B75菌株菌体生长，且产生的抗菌物质抑菌活性较强。     

我国水稻条纹病毒种群遗传结构初步分析

 由水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)引起的水稻条纹叶枯病近年来在我国的发生呈上升趋势,2001年又在江苏、河南、山东、北京等省市的一些地区大范围暴发,而在云南省则持续流行。     

R-藻红蛋白免疫荧光探针标记方法的探索

利用双功能试剂SPDP在蛋白质分子中引入巯基,结合2-巯醇吡啶分析方法,定量测定引入活性基团的比例,通过两步标记法,将珊瑚藻R-藻红蛋白标记到羊抗兔抗体上,简化了传统标记过程.参照Dot-ELISA方法,以硝酸纤维素膜为固相载体,将该方法应用于烟草花叶病毒(Tobaccomosaicvirus,TMV)的检测.结果表明,R-PE标记的荧光检测的灵敏度为2-10,与酶免疫的Dot-ELISA相比,尽管检测灵敏度较低,但快捷、经济.并对如何进一步提高藻红蛋白介导的免疫荧光分析方法的灵敏度作了讨论.     

水稻条纹病毒北京双桥(RSV-SQ)分离物RNA4片段序列分析

对我国水稻条纹病毒（Ｒｉｃｅ ｓｔｒｉｐｅ ｖｉｒｕｓ,ＲＳＶ）北京双桥（ＲＳＶ－ＳＱ）分离物ＲＮＡ４片段进行克隆及测序,结果表明ＲＮＡ４全长为２１５７ｂｐ。序列同源性比较发现,在核苷酸水平上,ＳＱ分离物与Ｔ、Ｍ及ＣＸ分离物的ｖＲＮＡ４ＯＲＦ同源性分别为９８．３％、９８．３％和９６．１％,ｖｃＲＮＡ４ＯＲＦ的同源性分别为９８．１％、９７．８％和９４．０％,ＲＮＡ４ＩＲ的同源性分别为９４．８％、８９