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为建立快速检测鸭坦布苏病毒病抗体的血清学方法,本研究利用鹅坦布苏病毒JS804株非结构蛋白NS1基因序列将其克隆至原核表达载体pET32a上,建立重组表达pET32a-NS1,转化至BL21(DE3)中。经IPTG诱导得到NS1融合蛋白,融合蛋白均以包涵体形式存在,包涵体经过变性和复性,纯化的坦布苏病毒NS1蛋白作为包被抗原,在最佳检测条件基础上,建立了检测坦布苏病毒病(Tembusu virus disease,简称TVD)抗体的间接ELISA方法。结果在条件优化后抗原最适包被量为1.925μg·孔-1,抗原最佳包被条件为37℃放置1 h后4℃过夜,血清的最佳稀释度为1∶200,最佳封闭时间为1 h,酶标二抗最适稀释度为1∶1 000,显色时间10 min。阴阳性临界值判定标准为0.346。用建立的间接ELISA方法检测禽流感、新城疫、传染性支气管炎、TVD阳性血清样品均无交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。板内和板间重复试验的最大变异系数分别为6.7%和8.2%,显示该方法具有很好的稳定性。用间接NS1-ELISA方法对81份疑似鸭坦布苏病毒病血清样品进行检测,有43份样品呈现阳性,E-ELISA有48份呈阳性结果,证明该方法具有较高的敏感性。NS1-ELISA方法的建立为TVB的诊断和流行病学调查提供了一种新的方法。 相似文献
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马甲子是从深山老林中发掘并培育成功的一种特有刺树种,由于它全身是刺,连鸟都不敢接近,所以又叫“鸟不站刺,铁离笆”。其果实呈环状或碗状,外有棕色或黄褐色茸毛,种子紫色,扁圆形。每年8-12月分批成熟, 相似文献
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津春三号黄瓜系天津市黄瓜研究所选配的杂一代新组合。其抗病、丰产、耐低温和弱光的能力较津杂系列其他品种表现突出,适宜我区早春或秋延后曝光温室栽培。该品种植生长势强,茎粗壮,叶片肥大,分枝性中等,较适宜密植。以主蔓结瓜为主,单性结实能力强, 相似文献
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为了解华东地区H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的遗传特点和流行规律,利用RT-PCR方法扩增华东地区2008~2013年分离的17株H9N2亚型AIV血凝素(HA)基因片段,进行序列测定和遗传进化分析,并对HA蛋白质的裂解位点、受体结合位点和潜在的糖基化位点进行分析。结果显示,17株H9N2亚型AIV HA基因核苷酸和推导的氨基酸同源性分别为84.6%~99.3%和86.0%~99.5%,均属于欧亚分支。其中15株鸡源病毒属于Y280-like亚系,2株鸭源病毒属于G1-like亚系。HA裂解位点都是非连续碱性氨基酸,属于低致病力毒株。HA受体结合位点149、150、191、198和234位氨基酸存在变异,尤其是234位氨基酸有14株毒株变为L,表现出人流感病毒受体结合特性。有2株毒株在145位氨基酸出现新的糖基化位点,5个毒株在218位氨基酸缺失1个糖基化位点,13个毒株在313位氨基酸增加了一个新的糖基化位点。研究结果表明华东地区近年来H9N2亚型AIV存在一定的变异,应加强对该类病毒的分子流行病学监测。 相似文献
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蓟县地处燕山余脉,年平均气温在11.5℃,无霜期198d,年均降水量652.5mm,其中7—9月份降水432.3mm,占年降水量的66.3%。位于北部山区、半山区的下营、罗庄子、许家台、五百户等14个乡镇有丰富的野生酸枣资源,总株数达3000万株以上,坡度20°左右,土层厚30~60cm,具有很大的开发潜力。1997年春罗庄子乡三间房村在酸枣上嫁接蓟州脆枣、冬枣、梨枣共3.2hm2,平均666.7m2接110株。第二年666.7m2产量79kg,第三年及其后依次为308kg、770kg、1155kg。五年平均每6… 相似文献
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以湘油11号为材料,采用三因素五水平正交旋转组合设计,微机模拟,发现施肥量、苗龄、氮素追肥比例对油菜秧苗素质、产最构成、产量及净产值都在不同程度上存在着显著影响,而且施肥量与氮素追肥比例之间存在互作,产量在2250kg/ha以上的最佳农艺措施组合是每公顷施纯氮249~255kg(N:P_2O_5:K_2O=1:0.5:0.5),苗龄31~32d,氮素追肥占施用氮肥赠量的45.5%~49.7%;净产值3000/ha以上的综合农艺措施是施纯氮70.5 kg/ha(三要素比例同上),苗龄27.8d,氮素追肥比42%。 相似文献