真核表达载体pIRES2-ZsGreen1-opLA的构建及其在猪成纤维细胞的表达

α-乳清蛋白(α-lactalbumin,α-LA)是哺乳动物乳汁中一种重要的蛋白质,富含机体必需氨基酸和支链氨基酸,其极佳的氨基酸比例、易吸收性以及功能特异性,使得α-LA在婴幼儿个体正常生长中具有重要的意义。本实验旨在构建人α-乳清蛋白真核表达载体pIRES2-ZsGreen1-opLA,将其转染至猪(Susscrofa)的成纤维细胞,获得稳定表达人α-LA的细胞。根据猪基因密码子偏爱性优化并合成人α-乳清蛋白基因mRNA序列opLA,并将其定向克隆入pIRES2-Zs Green1真核表达载体,双酶切及测序方法鉴定重组载体;脂质体介导的方法将载体转染入培养的猪成纤维细胞,荧光显微镜下观察转染效果,G418抗性筛选重组细胞;RT-PCR方法检测目的基因的表达。结果表明,通过酶切以及测序鉴定得到的重组载体pIRES2-Zs Green1-opLA构建成功;荧光显微镜下观察,转染了pIRES2-Zs Green1-opLA和pIRES2-Zs Green1空载体的细胞均发出绿色荧光,且荧光多集中于细胞核;筛选重组细胞的最小G418浓度为400ng/μL;RT-PCR法检测到与目的基因大小一致的片段,而未转染组和转染空载体组均未检测到。本实验成功构建真核表达载体pIRES2-ZsGreen1-opLA,并获得稳定表达目的基因的猪成纤维细胞,该细胞可作为进一步研究转基因克隆猪的供体细胞。     

水电合理上网电价研究

上网电价是电力行业的热点问题。首先在全面调研国内不同地区水电上网电价政策的基础上,深入分析了我国现行电价政策在新时期存在的主要问题,并以四川为例,研究不同单位千瓦投资的水电站在现行标杆电价下的盈利能力水平,测算了不同单位千瓦投资电站达到预定盈利能力的上网电价,分析了电价调整的合理性和必要性。研究成果可为合理调整水电上网电价提供参考。     

冬季肉雏鸡一氧化碳中毒的诊治

冬春季节东北地区天气寒冷,育雏时保温工作非常重要,一般以煤或木炭为燃料保持育雏室的温度。如果育雏室通风不良,煤或木炭在氧气不足的情况下,燃烧不充分就会产生大量的一氧化碳,若一氧化碳不能及时排出而大量蓄积在室内,被雏鸡吸入后极易造成一氧化碳中毒,往往出现大批死亡。     

发酵床养猪技术在生产中的应用

就发酵床养猪技术的不足之处进行阐述,并对此项技术的推广可行性进行讨论.     

生物质焦油催化裂解催化剂的研究进展

生物质能源的高效利用可以有效缓解能源危机,改善生态环境。在生物质热解过程中会产生焦油堵塞设备,造成能量损失,从而影响生物质在工业中大规模使用。在常见生物质能源利用技术中,催化裂解技术可以有效去除焦油并提高可燃气体产量。综述了国内外生物质焦油催化裂解的研究,并对天然矿石类催化剂、碱金属催化剂、非镍金属催化剂、镍基催化剂的催化活性、反应稳定性以及经济效益等进行了讨论。针对镍基催化剂易失活的问题,介绍了通过选择更优的载体,添加不同的助剂对镍基催化剂进行改性,以提高催化剂的催化活性和反应稳定性的相关研究,旨在为制备出更经济高效的催化剂提供研究思路。     

维生素对种兔繁殖力作用影响的研究与分析

为了研究维生素对种兔繁殖力作用的影响。试验采用新设计的配方饲料同兔场原来采用的常规配方饲料在相同的条件下进行饲喂试验,分析维生素对种兔发情时间、受胎率、产仔胎数、产仔数、断奶仔兔成活率的影响。选用健康繁殖年龄基本相同的种兔100只,分A、B2组,每组50只,公母比例1∶4,A组饲喂常规饲料,B组饲喂试验饲料。试验结果表明,维生素对种兔的繁殖力作用是显著提高的(P<0.01),在试验的4个月时间里,B组母兔发情只数是A组母兔发情只数的2.46倍;B组母兔平均受胎率是A组母兔平均受胎率的1.72倍;B组母兔产仔数是A组母兔产仔数的11.58倍;B组仔兔成活率是A组仔兔成活率的2倍,达到了理想的配种繁殖效果。     

简析雏鸭病毒性肝炎的诊断与防治措施

<正>雏鸭病毒性肝炎病是一种由鸭肝炎病毒引起的传染性疾病,具有急性、高致死率以及高接触性的特点,死亡率甚至达到了90%以上,对于养鸭业也会造成严重的危害。在进行鸭子的养殖过程中,环境卫生差、湿度过大以及饲养管理不当等因素均有可能导致雏鸭病毒性肝炎的发生,该疾病的发病率和病死率比较高,并且有肝脏肿大,出血斑点和神经症状等临床症状,一旦爆发还会对养鸭人员的养殖效益造成非常严重的损害。1临床症状雏鸭病毒性肝炎疾病潜伏期比较短,一般为     

母猪非典型猪瘟和附红细胞体病混合感染的诊治

2012年夏季,河南省确山县大部分养殖场（养殖户）的母猪发生非典型猪瘟与附红细胞体病混合感染,死亡率达到30%～40%,给该地区养殖业造成极大的危害。主要对母猪非典型猪瘟与附红细胞体病混合感染的临床症状、病理变化、实验室检验和防治技术作一介绍,以期为养殖场有效防治该病提供依据。     

蒸汽加热处理对大豆皮抗营养因子活性和家兔盲肠微生物活体外消化的影响

试验对大豆皮在常压下进行不同时间(0、12.5、25、37.5 min)的蒸汽加热处理,研究其化学成分含量、脲酶活性(UA)、胰蛋白酶抑制因子活性(TIA)以及蛋白质溶解度(PS)的变化。结果表明:经过不同时间的热处理,大豆皮化学成分含量没有显著变化(P>0.05)。随加热时间延长,大豆皮UA、TIA和PS显著下降(P<0.05),在蒸汽加热处理25 min时,可以明显降低其抗营养因子含量,但对蛋白质溶解度的影响不大。利用活体外产气量法对蒸汽加热处理的大豆皮进行家兔盲肠微生物活体外消化试验,结果表明,随着湿热处理时间的延长,大豆皮产气速度直线上升(L;P<0.05),而CP消化率降低,但对大豆皮的干物质消化率和24 h最大产气量没有显著影响(P>0.1),说明经一定时间蒸汽加热处理大豆皮对家兔盲肠微生物活体外消化无显著影响。综合以上2个试验的结果,推荐对大豆皮蒸汽加热25 min可以作为生产应用的适宜处理时间。