龙眼14-3-3基因及其启动子的克隆以及在体胚发生过程中的表达分析

分离克隆龙眼(Dimocarpus longan Lour.)胚性愈伤组织14-3-3基因,并分析该基因在龙眼体胚发生过程中的表达情况。采用RT-PCR结合RACE法,获得龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因的cDNA全长序列和DNA序列,采用TAIL-PCR法,获得龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因的启动子DNA序列,运用生物信息学方法对序列进行分析,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)研究该基因在龙眼体胚发生过程中的表达。结果表明:经克隆得到龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因786 bp的cDNA全长序列(GenBank检索号为GU573765),该cDNA开放阅读框推定的氨基酸序列(含261个氨基酸)与其它植物14-3-3具有较高同源性;该基因的DNA序列(GenBank检索号为GU573766)长为1 859 bp,包含3个内含子,内含子的剪切位点均符合真核生物"GT-AG"规则;该基因的启动子DNA序列(GenBank检索号为GU573766)长为910 bp;该基因在龙眼体胚各阶段均有表达,其中在松散型胚性愈伤组织阶段和心形胚及鱼雷形胚阶段呈现高表达,整个变化趋势呈"倒S"状。     

原蚕稚蚕片叶立体育试养总结

“稚蚕片叶立体育”是中国农业科学院蚕业研究所李奕仁副研究员等根据小蚕的生理特点创造的新的小蚕饲养技术,具有省工、省叶、省面积等优点,在农村丝茧育试养中取得了良好的经济效益和社会效益。成为农牧渔业部的重点技术推广项目。为探索此饲育方法在蚕种生产中的效果,我们自1989年4月起,进行了“原蚕稚蚕片叶立体     

小蚕经营专业化试验

2002年5月广东省丝绸集团公司承担广东省委组织部扶贫专题项目,在湛江市遂溪县界炮镇西湾村建立154hm2蚕桑基地,以带动1035户农户脱贫致富,同时改变乡俗、乡貌.集团公司属下的广东丝源蚕业有限公司和遂溪县金岛蚕业有限责任公司具体实施建设该项目,并于2003年5月正式投产.基地力求按现代化农业产业化生产管理要求,以创新桑蚕技术组织生产,达到高产、优量、高效的目的.小蚕经营专业化是该项目实施建设中的一项重大技术改革,改变传统向养蚕农户供应蚕种为统一向农户提供健壮4龄起蚕.为此,2003年开始作了如下试验研究.     

蚕种所桑园实行联产承包责任制的一些做法与体会

我所原蚕桑园管理是采取联产承包责任制的管理办法,这种管理办法从85年开始至今,已实行了七年,当中经过不断的修改完善,现已基本上形成了适应蚕种生产用桑的需要。实行《联产承包责任制》提高了桑园工人的劳动效率,减少了桑园工人,降低桑园管理费用的6～7%,平均亩产由85年的2124.7 kg 提高到91年的2338.3 kg,增幅为10.1%,制原种由85年的22503.5张,增加到91年的31479.5张,增幅为39.9%,克蚁制种由85年15.33张,近年来(89～91年)增加到19.6张,增幅为28.1%。取得以上的效果,除了技术工作外,经营管理也十分重要。因为所有技术措     

搞好桑蚕品比鉴定,促进品种的更新

为了推广应用新蚕品种,加强对新蚕品种的管理,促进优良蚕品种的培育与推广,提高我省蚕茧质量和茧丝质量,提高蚕桑生产的经济效益,我省于1990年在省蚕种繁殖试验所开展了桑蚕室内品比鉴定,1991—1993年同时开展了室内和农村品比鉴定。三年来,在省丝绸公司的直接领导下,在有关单位的协作下,蚕品比鉴定工作不断的完善和巩固。现将三年来的工作报告如下: 一、蚕品比鉴定工作情况 1.建立了广东省新蚕品种室内品比和农村品比鉴定点。 1990年在省蚕种所开展了室内品比鉴定。1991年在农村建立了五个品比鉴定点。     

壳聚糖对番木瓜种子萌发及相关酶活性的影响

在实验室条件下,研究0～12.5 mg/mL壳聚糖溶液浸种处理对番木瓜种子萌发及相关酶活性的影响。结果显示,5.0～10.0 mg/mL壳聚糖溶液浸种能有效地提高番木瓜种子发芽势、发芽率、淀粉酶活性、过氧化氢酶(CAT)活性、过氧化物酶(POD)活性,其相关酶的活性显著高于对照;12.5 mg/mL壳聚糖溶液浸种对番木瓜种子萌发及相关酶活性的影响则相反,与对照之间差异不显著。表明10.0 mg/mL壳聚糖溶液为番木瓜种子萌发的最适浓度。     

龙眼体胚发生过程中两个乙烯受体基因的定量表达分析

以龙眼体细胞胚胎发生8个不同发育阶段同步化胚性培养物为材料,采用荧光定量PCR方法,分析两个乙烯受体基因(DL-ETR1和DL-ERS1)的mRNA动态变化水平。试验结果表明:DL-ETR1表达量整体的变化趋势呈近似"W"状,松散型的胚性愈伤组织(Stage 1)的表达量最高,心形胚(Stage 6)阶段的表达量最低;龙眼体胚发生过程的8个阶段均有DL-ERS1基因的表达,子叶形胚(Stage 8)的表达量最高,其它7个阶段的表达量都很低,鱼雷形胚(Stage 7)的表达量极低,几乎不表达。DL-ETR1与DL-ERS1有着不同时期的表达模式,并且可能起到结合乙烯,调节龙眼体胚对乙烯敏感性的综合作用。     

枇杷胚性培养物ACC氧化酶基因的克隆及序列分析

以枇杷胚性培养物（Eriobotrya japonica embryonic cultures）为材料,采用同源克隆方法,从其mRNA中分离得到ACC氧化酶（ACO）基因EjACO-1,在GenBank中登录号为GQ377219。结果表明：EjACO-1大小为 1 160 bp,编码322个氨基酸。枇杷EjACO-1与苹果、桃和梨等蔷薇科植物同源性较高,而与水稻、石斛兰等单子叶植物距离较远。此外,从枇杷基因组DNA中分离了转录为EjACO-1 mRNA的基因gACO,大小为1 517 bp,在GenBank中的登录号为GU233743。生物信息学分析显示,gACO基因中含有3个内含子,大小分别为114、240、194 bp,均符合真核生物内含子通用的GT-AG法则。EjACO基因的克隆为以后研究乙烯在枇杷中的功能奠定基础。     

2种提取工艺对橄榄果实多酚含量及抗氧化活性的影响

以橄榄果实为原料,利用正交实验探讨有机溶剂和超声波提取对多酚提取量和总还原力FRAP的影响,并分析比较2种提取方法,以确定最佳提取条件和参数。结果表明:有机溶剂提取的最佳工艺参数料液比为1∶60、提取时间60 min、提取温度60℃、乙醇浓度50%,其多酚提取量和总还原力FRAP分别为79.07 mg/g和740.45μmol/g。超声波提取的最佳工艺参数料液比1∶40、提取时间20 min、超声功率180 W及乙醇浓度60%,该条件下多酚提取量和总还原力FRAP分别为85.26 mg/g和952.27μmol/g。超声波提取具有多酚提取量高、抗氧化活性强、提取时间短、溶剂耗量少的特点,优于有机溶剂提取。     

家蚕新品种粤枫三号(五·选×28·32)的育成

通过系统分离选育,对现行生产主要家蚕品种和引进育种素材进行改良提高,并经杂交组配筛选,育成了家蚕四元一代杂交种粤枫三号(五.选×28.32)。实验室鉴定及农村饲养和种场繁育的结果表明,该品种综合经济性状优良:抗逆性和耐氟污染能力强,孵化、眠起、老熟齐一;茧形大,茧层厚,产茧量较对照两广二号提高9.47%,茧丝质优良,一粒茧丝长1028 m,解舒丝长761 m,洁净92.25分;原蚕容易饲养,蚕种繁殖系数高。该品种已通过广东省农作物品种审定,适合在珠江流域等华南蚕区全年推广饲养。