Bacillus subtilis Z-27制剂对仔猪肠道酶活及消化性能的影响

试验目的在于研究枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Z-27制剂对断奶仔猪肠道消化酶活力、常规营养成分、生长性能的影响,为该菌剂的益生机理的研究提供参考。将供试仔猪分为试验组和对照组,试验组饲喂添加0.1%Z-27菌剂的T2饲料,对照组饲喂T2饲料。采用GB/T 23527—2009、GB/T8275—2009等方法测定仔猪粪便中蛋白酶、α-淀粉酶等消化酶活力;利用GB/T 6435—2006、GB/T6432—94等方法测定粪便中水分、粗蛋白质等常规养分的含量;记录采食量并称取始重和末重。试验表明,与对照组相比,试验组仔猪的粪便中蛋白酶、α-淀粉酶、纤维素酶的平均活力和脂肪酶水解液酸价分别提高了62.99%、34.56%、133.10%和66.57%;粪便中残留的粗蛋白质、淀粉、粗脂肪和粗纤维等有机成分含量分别下降了30.51%、52.13%、18.44%和26.73%,而无机成分的含量基本无变化;平均日增重提高了9.38%,料重比降低了4.94%。研究表明,枯草芽孢杆菌Z-27制剂具有提高仔猪肠道消化酶活力、提高饲料转化率、改善仔猪生长性能的作用。     

高效脂肪酶产生真菌的筛选、鉴定及产酶条件优化

研究旨在筛选高产脂肪酶活性的菌株,并鉴定其菌属及确定其最佳产酶条件。采集富含油脂的土壤,通过溴甲酚紫平板法进行菌株分离筛选,并采用橄榄油乳化法测定脂肪酶活力。利用真菌ITS序列通用引物进行PCR扩增,将测序结果Blast比对,并建系统发育树。采用正交试验设计优化产酶条件。通过筛选得到1株产脂肪酶的真菌菌株GW-1,经鉴定为黑曲霉Aspergillus niger。经单因素试验和正交试验得到该菌的最佳产酶条件为:葡萄糖0.5%、黄豆粉2.0%、橄榄油1.0%、MgSO4.7H2O 0.1%、pH值9.0、接种量8%、装液量50 ml/250 ml、发酵4 d。在此发酵条件下,其产酶活力可达39.82 U/(ml.min)。试验结果显示,访菌株在产脂肪酶能力上具有显著优越性,且菌株GW-1产酶活力较优化前高出19.96 U/(ml.min),提高了100.50%。     

Z-27菌剂对猪舍空气NH3、H2S浓度及排泄物含氮量的影响

为验证微生态制剂Z-27(以下简称Z-27菌剂)对猪舍空气中有害气体减排的效果,选取400头50 kg左右健康杜长白三元杂交育肥猪,随机平均分为对照组和试验组,每组1栋猪舍,每栋20栏,每栏10头猪。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中添加0.1%Z-27菌剂。试验共15 d,期间检测猪舍空气中NH_3、H_2S浓度及细菌、大肠杆菌数量,测定猪粪和尿中总氮含量、氨态氮含量和pH值,检测粪尿混合物NH_3、H_2S的48 h排放量;观察每组腹泻情况,计算腹泻率;每组分出3栏(30头)分别于试验开始和结束时空腹12 h称体质量并结算剩余料,计算均增质量和料质量比。试验结果表明,试验前期试验组各参数有一个渐变过程,7 d后方能达到稳定,故以第8天(含)后的数据将试验组和对照组进行比较。试验组猪舍空气中NH_3、H_2S含量比对照组分别下降63.27%、54.61%,细菌、大肠杆菌总数比对照组分别下降46.68%、59.89%;试验组猪粪总氮含量和氨氮含量比对照组分别下降46.32%、65.83%,猪粪的pH值比对照组降低0.54;试验组猪尿总氮含量和氨氮含量分别降低26.47%、27.59%,尿液pH值比对照组降低0.86;试验组新鲜猪粪尿混合物的NH_3、H_2S的48 h释放量比对照组分别下降32.76%、35.69%;同时试验组均增质量比对照组提高10.38%,料质量比降低9.05%,腹泻率降低60.06%。表明该菌剂具有降低育肥猪氮素排泄的作用,可从源头降低猪排泄物NH_3、H_2S等有害气体排放,还能够显著提高育肥猪的生长性能,防治腹泻。     

枯草芽孢杆菌8-32产抗真菌物质发酵条件优化

为提高枯草芽孢杆菌菌株8-32抗真菌物质的产量,在单因素试验基础上,采用Plackett-Burman设计法找出影响菌株Bacillus subtilis 8-32产抗真菌物质的主要因素为培养时间、装液量和可溶性淀粉含量。采用最陡爬坡试验逼近最大响应区域,运用Box-Behnken试验设计及响应面分析法对3个显著影响因子的最佳配比进行优化,得到最佳发酵工艺参数为培养时间72.28h,装液量59.80mL/250mL三角瓶,可溶性淀粉含量1.51%。优化后抑菌圈直径从试验设计初期的14.21mm提高至24.51mm。     

知母悬浮培养下的体细胞胚胎发生(简报)

体细胞胚大量产生及高质量体细胞胚诱导是人工种子研制的关键.目前国内外对体细胞胚在液体悬浮培养体系中的诱导与分化已进行了大量的研究,其中在芹菜、防风等植物的悬浮培养中已获得了体细胞胚.     

施氮对大豆结瘤、固氮及产量影响的研究进展

氮是大豆[Glycine max(L.)Merrill]生长的必需元素,大豆生长所需氮量的50％～60％来自于共生固氮,少量施氮对大豆结瘤、固氮效率及产量有促进作用,施氮量过高则表现为抑制作用.本文着重从施氮的氮素形态、氮素施用量和施氮时期3个方面阐述了氮素对大豆根瘤数量、固氮酶活性和产量的影响.探讨了高氮抑制结瘤和固...     

鸡源益生菌JM-11菌株的胃肠道耐受及其抗腹泻的研究

本试验从健康的鸡盲肠内容物中筛选出具有较高抑菌活性的病源拮抗菌JM-11菌株,经形态、生理生化及16S rDNA序列鉴定此菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis subsp. subtilis）。经耐受胃肠道环境及胆盐试验,结果表明,JM-11菌株能耐受0.3%的胆盐环境,在pH为3.0的人工胃液中能够很好的存活。利用抗生素打乱雏鸡肠道菌群后,饲喂致病性大肠杆菌来制作腹泻模型。经益生菌JM-11对腹泻雏鸡的治疗试验结果显示,JM-11能显著降低腹泻雏鸡粪便中的大肠杆菌的数量（P<0.01）,增加乳酸菌的数量(P<0.01),提高雏鸡免疫器官指数(P<0.05),对雏鸡具有安全无毒的作用。     

芽孢杆菌发酵棉粕粉脱酚及其饲喂肉鸡的效果

对前期工作中筛选得到的枯草芽孢杆菌M-9菌株发酵棉粕粉进行脱酚处理,将其作为蛋白源添加于饲料中用于肉鸡养殖并对应用效果进行初探。棉粕粉脱酚采用固体发酵法,棉粕粉中棉酚含量测定采用国标法,粗蛋白含量测定采用凯氏定氮法。结果表明,经枯草芽孢杆菌M-9菌株发酵后棉粕粉的棉酚残存量为9.82 mg/kg;蛋白质未因发酵而流失,其含量较原始棉粕约增加1百分点。发酵棉粕粉质地松软,无霉变、无硬块、无异臭,符合我国国家安全标准。以之代替全价饲料中的豆粕对肉鸡进行饲喂,经相关指标测定发现,试验组肉鸡的血液生化指标正常,生长发育指标、屠宰性能指标、脏器发育指标及营养物质利用率与对照组均无显著差异,即试验组肉鸡未发现棉酚中毒症状,说明制备的发酵棉粕粉脱酚效果较好,具备代替豆粕作为饲料蛋白源应用于肉鸡养殖的可能。     

产芽孢木质素降解菌MN-8的筛选及其对木质素的降解

【目的】分离、筛选产芽孢的高效木质素降解细菌,并进一步研究其对木质素的降解作用,为木质素微生物降解规模化应用提供理论依据。【方法】采用苯胺蓝（Azure-B）变色圈法,结合木质素降解酶活力测定从牛粪中分离筛选出产芽孢的木质素降解菌。通过形态特征观察、生理生化试验、16S rDNA以及gyrB序列分析对其中活性最强的菌株进行种属鉴定。利用菌株进行玉米秸秆堆积发酵,监测发酵过程中木质素过氧化物酶（LiP）酶活力、锰过氧化酶（MnP）酶活力以及玉米秸秆中木质素含量的变化,考察菌株对玉米秸秆木质素的降解作用。利用气相色谱-质谱联用（GC/MS）方法对菌株发酵后玉米秸秆中的木质素降解产物进行分析,推测菌株对木质素的降解机制。【结果】分离筛选到一株活性较高的产芽孢的木质素降解细菌MN-8,经形态特征观察、生理生化试验以及16S rDNA序列分析,鉴定菌株MN-8属于芽孢杆菌属（Bacillus）。利用16S rDNA序列分析发现MN-8菌株与地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）和解淀粉芽孢杆菌（B. amyloliquefaciens）同源性均高于99%。而基于gyrB序列构建的系统发育树显示,该菌株与解淀粉芽孢杆菌同源性最高,为99%。因此确定MN-8菌株为解淀粉芽孢杆菌。在玉米秸秆堆积发酵16 d后木质素降解率可达24%;发酵的6-8 d及10-12 d 两个阶段内,分别出现MnP酶活力及LiP的产酶高峰期,相对应两个阶段内秸秆木质素的降解最为显著;GC/MS分析显示菌株MN-8可将玉米秸秆中木质素降解成4-羟基-3,5二甲氧基苯乙酮等芳香族类化合物及短链脂肪酸类等小分子物质。【结论】高效木质素降解菌解淀粉芽孢杆菌MN-8可以通过断裂木质素单体之间的连接键β-O-4,高效降解秸秆木质素成为小分子芳香族化合物等物质,且其对秸秆木质素的降解依赖于LiP及MnP的产生。