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用Marc-145细胞从广东省3个发病猪群分离到3株病毒,经RT-PCR方法鉴定为PRRSV变异株(NSP21594~1680bp缺失)。3株分离株第1代均对Marc-145细胞适应性不强,第2代可致典型病变,第3代TCID50分别为103.67、104.20、104.75mL-1;在透射电镜下观察主要为40~70nm大小的圆形、椭圆形具有囊膜的病毒粒子;均对氯仿、酸、碱和热敏感。3株分离株NSP2基因与CH-1a、VR-2332等经典PRRSV相比均存在2个位点30个氨基酸缺失,与JXA1、HUN4、HPDEBV等变异株具有相同缺失特性且高度相似,相似性为98.1%~98.3%。ORF5基因均由200个氨基酸组成,与JX-A1、HUN4、HPDEBV等变异株高度相似,相似性为98.5%~99.0%,且第13、151位均为具有强毒特性的精氨酸(R)。本研究进一步证实在广东省内出现以NSP2缺失30个氨基酸为特征PRRSV变异株的流行,也为科学监测和综合防控该毒株感染引起的PRRS奠定了基础。 相似文献
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猪传染性胃肠炎病毒实验室诊断研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
猪传染性胃肠炎(TGE)是一种以严重腹泻、呕吐和脱水为临床特征的高度接触性传染病,属于国际兽疫局(OIE)法典中B类疫病中必检的猪传染病。该病的病原TGEV是有囊膜的正链RNA冠状病毒,与SARS病毒同属一个病毒属。检测TGEV的方法主要有病毒分离、中和试验、免疫荧光抗体试验、酶联免疫吸附试验和电镜技术等,这些方法对于检 相似文献
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鸡β-防御素-3的克隆与诱导表达 总被引:7,自引:1,他引:7
利用反转录PCR(RT—PCR)与套式PCR技术检测Gal-3基因在鸡体不同组织的分布表达。实验结果表明Gal-3基因在法氏囊、皮肤、舌头、肺脏、骨髓、气管等组织中广泛分布,在肾脏、脾脏、肝脏、胰脏等组织中没有检测到。对从鸡骨髓中扩增出来的β-防御素(Gal-3)cDNA进行克隆测序表明扩增出的cDNA碱基数为297bp,与GenBank中的Gal-3cDNA序列完全相同。核苷酸序列比较表明在同源性上,Gal-3与Gal-1、Gal-2基因核苷酸相似性分别为75%、50%,同火鸡GPV-1基因同源性最高,达9l%。体外诱导表达实验表明在气管上皮细胞中LPS与灭活卡介苗可以诱导Gal-3的表达;Gal-3在法氏囊细胞、肺上皮细胞的表达为持续性表达。 相似文献
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鸭源H9亚型禽流感病毒的分离与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
从广东各地鸭群的392份泄殖腔样本中分离到3株病毒。用琼脂扩散试验(AGP)及血凝抑制试验(HI)证实3个分离株均为H9亚型禽流感病毒(AIV)。3个AIV分离株都能凝集人、鸡、山羊、豚鼠、兔的红细胞,但不能凝集猪红细胞;所有分离株血凝素(HA)对热不稳定;60℃加热处理10 m in后,病毒失去对鸡胚的感染性;3个AIV分离株的半数鸡胚感染剂量(E ID50)分别为107.2/0.2 mL、105.8/0.2 mL和106.1/0.2 mL。 相似文献
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采用分光光度法测呈了25℃和10℃驯养的草鱼、鲮鱼、二代混精鲮鱼及对照组混精鲮鱼的肌肉和肝脏组织中乳酸脱氨酶(LDH)、6-磷酸葡糖脱氨酶(G6PDH)和异柠檬酸脱氢酶(IDH)活性的变化;采用电泳法对LDH、酯酶(EST)和超氧化物歧化酶(SOD)的同工酶酶谱进行了比较研究。实验结果表明,草鱼肝脏组织在低温下发生了代谢途径的转换和重组,而鲮鱼的肌肉组织和肝脏组织都只采取了增加酶浓度的方式。鲮鱼代谢转换机制的不完善,可能是鲮鱼不耐低温的重要原因之一。三组鲮鱼肝脏组织的酯酶(EST)同工酶谱在不同适应温度下的变化表明,鲮鱼肝脏组织的酯代谢在低温下发生了变化。最后,作者对混精授精法提高鲮鱼耐寒能力的作用进行了评价。 相似文献
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根据鸡缩胆囊素(choleystokinin,cck)-33基因的碱基序列及大肠杆菌高频密码子,设计了大肠杆菌表达系统偏爱的cck基因序列.将cck-33基因克隆至pRSETA质粒上,利用载体上的同尾酶构建cck基因四串联体并在大肠杆菌EcoliBL21中成功表达.将所表达的融合蛋白进行纯化后,以纯化的蛋白为免疫原制备油佐剂疫苗主动免疫胡须肉鸡.结果表明,CCK蛋白主动免疫肉鸡后,抗血清水平显著升高,P/N值远远大于2. 相似文献