马立克氏病的诊断技术

马立克氏病（MD）是由马立克氏病病毒（MDV）引起的一种高度接触传染性肿瘤病,以淋巴组织增生和肿瘤形成为特征。马立克氏病是危害世界养禽业最严重的传染病之一,世界动物卫生组织（OIE）将其归为动物B类传染性疾病,广泛存在于世界上所有养禽国家和地区。     

超强传染性法氏囊病病毒株宿主保护抗原的分子特征

为了探索超强传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）株毒力增强的原因,采用反转录－聚合酶链反应技术,从中国广东、福建分离到的３株超强ＩＢＤＶ毒株中扩增到编码ＶＰ２蛋白的ｃＤＮＡ基因片段,并对ＶＰ２基因的高可变区进行了序列测定。序列分析和聚类分析表明,３株超强毒株与欧洲超强毒株非常相似,而与经典强毒株、弱毒株和变异株相差较大。将超强毒株ＶＰ２高可变区的氨基酸序列与其他血清Ⅰ型毒株进行比较,发现除了具有一般ＩＢＤＶ强毒株的分子特征之外,所有超强毒株在２２２、２５６、２９４和２９９位上的氨基酸均相同,分别为Ａ、Ⅰ、Ⅰ和Ｓ,与其他毒株均不相同。而２２２、２９４和２９９位上的特征性氨基酸使超强毒株ＶＰ２中诱导中和抗体的抗原决定簇的构象发生细微变化,从而导致毒力增强。     

逆转录环介导等温扩增技术检测H3亚型猪流感病毒

基于环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立了一种用于快速检测H3亚型猪流感病毒的方法。根据GenBank中收录的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)HA基因保守区的序列,设计一组对应HA序列6个区域的4条特异性引物,建立RT-LAMP反应体系;经优化,确定了最佳的LAMP反应条件。扩增后产物形成的焦磷酸离子和溶液中的镁离子结合而形成焦磷酸镁沉淀,结果可视。同时用特异性内切酶HhaⅠ对所获得的产物进行酶切鉴定,所得的酶切产物大小与理论值完全符合。用已建立的RT-LAMP技术检测临床样品,检测结果与RT-PCR方法符合率均达到100%。结果表明,本研究建立的RT-LAMP检测猪流感病毒方法,操作简单,灵敏度高,特异性强,是一种适用于现场诊断的检测技术。     

维生素E对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响

维生素Ｅ对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响曹永长毕英佐（华南农业大学动物科学系，广州５１０６４２）鸡新城疫（ＮＤ）是威胁养鸡业的主要传染病之一，提高新城疫疫苗免疫效果在生产上有着重要意义。我们用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测了用添加维生素Ｅ的ＮＤ油乳化...     

用酶联免疫吸附试验检测禽脑脊髓炎病毒抗体

用酶联免疫吸附试验检测禽脑脊髓炎病毒抗体曹永长毕英佐何洁（华南农业大学动物科学系，广州５１０６４２）禽脑脊髓炎（ＡｖｉａｎＥｎｃｅｐｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ，简称ＡＥ）是由禽脑脊髓炎病毒（ＡＥＶ）引起的一种危害严重的传染病，主要侵害幼年鸡群，其特征是...     

H5、H9亚型禽流感病毒和新城疫病毒的多重RT-PCR检测

根据Genbank注册发表的H5、H9亚型禽流感病毒(AIV)的HA基因和新城疫病毒(NDV)的HA基因序列,设计多对引物,每种病毒各筛选出一对特异性好、灵敏度高的引物,其中FP1/FP2扩增H5亚型AIVHA基因片断长为545bp;P3/P4扩增H9亚型AIVHA基因片断长为321bp;P11/P22扩增NDVHA基因片断长为672bp。用RT-PCR方法,通过特异性试验、灵敏度试验,H5、H9亚型AIV和NDV引物的灵敏度分别达到了1:104、1:108、1:104稀释度,与传染性支气管炎(IB)、传染性法氏囊病(IBD)、传染性喉气管炎(ILTV)、传染性鼻炎(IC)、霉形体(MS)、H1N1猪流感等抗原无交叉反应。实验结果表明,本研究建立了检测H5、H9亚型AIV和NDV的多重RT-PCR方法,混合引物的最佳退火温度为50℃,鉴定检测仅需4小时。     

6株乳酸菌体外抑菌实验

实验室或临床实践研究表明 ,乳酸菌对肠道细菌如大肠杆菌、沙门氏菌等引起的肠道感染、腹泻等疾病有保护预防性作用 [1,2 ,3 ,4 ] 。乳酸菌代谢后产物对致病菌的拮抗作用及竞争排斥作用被认为是产生上述功能的主要因素。乳酸菌拮抗作用产生的原因是多方面的 :( 1 )乳酸菌产生过氧化氢 ,对病原菌有抑菌作用[5] 。( 2 )乳酸菌产酸 ,如乙酸、丙酸、乳酸等 ,酸对有害菌起生长抑制作用 [6,7]。 ( 3)乳酸菌产抗生素或细菌素类物质 ,对有害菌有杀菌作用 [7,8,9] 。 ( 4 )乳酸菌与小肠粘膜上皮细胞结合 ,占据有害菌小肠粘膜上皮细胞结合位点 ,对有害…     

乐托健肠宝抑制或杀灭动物肠道致病菌的作用机理及特点

为了预防畜禽腹泻,一般通过改善饲养环境和饲料营养水平,向饲料中添加一些能改善动物特别是幼畜的消化机能的添加剂,如酶和酸化剂等;以一些比较容易消化吸收的原料作为营养物质,避免因为消化不良而引起的营养性腹泻;应用疫苗进行预防;通过向饲料中添加抗生素和抗球虫药等,抑制致病微生物和寄生虫的生长,从而达到预防腹泻的目的。在治疗畜禽腹泻方面,以抗生素和抗球虫药为主。抗生素的作用效果明显、彻底、稳定,还能促进动物生长,提高畜禽产品产量,因此抗生素在动物养殖及疾病治疗方面得到了广泛的应用。然而人们发现,将抗生素作为饲料添加剂…     

鸡β-防御素CDNA的克隆与序列分析

使用总RNA提取试剂盒,从1月龄粤黄鸡骨髓细胞中分离提取总RNA,经过反转录PCR(RT-PCR)扩增出鸡β-防御素(Gal-2)cDNA片段.PCR产物经凝胶回收纯化,加A尾后与载体pGEM-T Easy相连,然后转化感受态细胞DH-5α在含X-gal、IPTG的LA平板上筛选阳性克隆,经菌落PCR与提取质粒作限制性酶切鉴定后,对目的片段进行测序.结果表明RT-PCR扩增出的cDNA片段碱基数为195bp,用Blast程序进行检索比较表明此扩增序列与Genbank中发表的鸡Gal-2 cDNA编码区序列100%相同.该cDNA编码64个氨基酸,包括信号肽、前片段和成熟肽,成熟肽由36个氨基酸残基组成.     

H9N2亚型禽流感病毒糖基化位点突变株的构建与生物学特性研究

为了解H9N2亚型禽流感病毒(AIV)HA蛋白第200位N-糖基化位点的功能,利用流感病毒8质粒反向遗传系统拯救出重组病毒r-WZP株(缺失HA基因第200位N-糖基化位点)和r-WZP200株(含有HA基因第200位N-糖基化位点)。两株病毒的内部基因来自病毒株A/Puerto Rico/8/34(H1N1),HA基因与NA基因均来自H9N2AIV流行毒株。结果表明,两株病毒均能够在SPF鸡胚中稳定增殖,这一位点的缺失致使病毒与鸡红细胞的结合能力下降,HA效价热稳定性提高,对SPF鸡胚的致死能力增强,对进一步研究H9N2亚型AIV HA蛋白N-糖基化位点的功能具有重要的参考价值。