益生菌作为基因工程受体菌的研究

1.前言20世纪90年代后期,国内外学者开始应用基因工程技术有目的、有选择地研制新一代微生态制剂。换句话说,就是正常菌群作为外源基因表达受体,尤为双歧杆菌、乳酸杆菌、芽孢杆菌、酵母菌作为工程菌的受体,通过分子克隆、基因重组技术,将外源基因(某种     

传染性囊病病毒CJ801VP2基因cDNA的序列分析

用ＲＴ－ＰＣＲ从传染性囊病病毒ＣＪ８０１的第１４代囊毒中扩增编码ＶＰ２蛋白的ｃＤＮＡ基因片断，长度为１５００ｂｐ，，并对该片断进行了ＤＮＡ序列分析。结果表明，ＣＪ８０１与ＩＢＤＶ标准Ⅰ型毒株５２／７０，ＳＴＣ和Ｃｕｌ的同源性最高，分别为９７．４％，９７．６％和９６．９％，与变异株，Ａ，Ｅ，ＧＬＳ的同源性稍低，分别为９６．５％，９６．３和９６．７％。     

新城疫病毒HN基因克隆及其在大肠杆菌中的表达

用RT-PCR方法扩增新城疫病毒HN基因并将其克隆至T载体,测定其核苷酸序列.尔后用PCR扩增球状头部编码区,并将其克隆至pSOC质粒soc基因3端EcoR Ⅰ位点,重组质粒pSOC-HN转化E.coli BL-21(DE 3)感受态细胞,以终浓度1 mmol/L的IPTG诱导表达,在SDS-PAGE凝胶上可检测到分子量约67 KD的融合蛋白特异条带,west-blot证实表达产物与NDV抗血清具有良好的反应性.     

传染性囊病病毒CJ801 VP2基因cDNA的序列分析

用ＲＴ－ＰＣＲ从传染性囊病病毒ＣＪ８０１的第１４代囊毒中扩增编码ＶＰ２蛋白的ｃＤＮＡ基因片断，长度为１５００ｂｐ，并对该片断进行了ＤＮＡ序列分析。结果表明，ＣＪ８０１与ＩＢＤＶ标准Ⅰ型毒株５２／７０、ＳＴＣ和Ｃｕｌ的同源性最高，分别为９７４％、９７６％和９６９％，与变异株Ａ、Ｅ、ＧＬＳ的同源性稍低，分别为９６５％、９６３％和９６７％。而与Ⅱ型毒株的同源性只有８１％左右。从遗传进化树上看，ＣＪ８０１处于标准Ⅰ型毒株和变异株之间。根据ｃＤＮＡ序列推导出蛋白质序列，比较蛋白质序列发现，ＣＪ８０１与Ⅰ型ＩＢＤＶ毒株的同源性均在９６％以上，其中与５２／７０的同源性最高，为９８２％。ＣＪ８０１ＶＰ２高可变区的七肽区（Ｓ－Ｗ－Ｓ－Ａ－Ｓ－Ｇ－Ｓ）未发生变化。以上结果说明ＣＪ８０１为ＩＢＤＶⅠ型强毒株。另外，ＣＪ８０１和所有ＩＢＤＶ强毒株在ＶＰ２的２５３、２７９和２８４位上的氨基酸均相同，分别为Ｑ、Ｄ和Ａ；而ＣＪ８０１的细胞适应株ＣＪ８０１ＢＫＦ和所有弱毒株一样，其相应位置的氨基酸分别为Ｈ、Ｎ和Ｔ。这３个氨基酸可能和ＩＢＤＶ的毒力有关。     

通过非疫苗途径提高家禽免疫力

<正> 家禽免疫力是指家禽抵抗疾病感染的能力。在家禽生产过程中,除了通过接种疫苗外,还可以通过以下途径来提高家禽免疫力。一、改善饲养条件1.改善光照条件肉鸡若接受连续光照,则其免疫能力会受到损害。实行受控明一暗光照可以预防低血糖一峰形死亡综合征,以及与其相关的发育迟滞综合征;肉鸡在受控明一暗光照条件下的性能表现良好,至少在一定程度上是由于其体内的松果体对明一暗光照发生反应而释放出褪黑激素,从而改善了细胞免疫应答,提高肉鸡免疫力的结果。2.减少应激因素采取积极预防措施,创造良好的条件,把应激减少到最小程度。提供适宜的饲养密度,如笼养鸡3～4只/笼,垫料平养4～6只/平方米,网上平养6～8只/平方米;料槽、水槽、产蛋箱要提供足够数量,保证饮水充足,防止缺水事故的发生;采取适当的措施来降低温度、湿度。热应激时会诱发产     

热灭活乳酸杆菌制剂对竹丝肉鸡生长性能的影响

益生素一般都认为是指由活体微生物制成的生物活性制剂，对动物具有促生长作用。但由于活菌制剂受到贮存环境条件、加工条件及进入消化道酸、胆盐等不利因素的影响容易失活，从而阻碍了益生素的广泛使用。法国乐托尔公司产品乳酸杆菌LB制剂，为LB菌体细胞及其培养过程所分泌的代谢产物组成的经特殊工艺（热灭活）处理形成的微生态制剂，     

植物性饲料添加剂的研究进展

欧盟关于禁止在饲料中使用抗生素的规定公布后,对饲料生产商产生了重要的影响,他们开始考虑使用植物或植物提取物作为动物生长促进剂。经过几年的发展,植物性饲料添加剂产品所表现出来的抗菌活性已经被提升到较高的含量水平,这使其处于潜在的替代药用抗生素饲料添加剂的位置。体外试验证明,植物提取物尤其是     

鸡胚成纤维细胞感染IBDV后SOD活性的变化

鸡胚成纤维细胞用传染性囊病病毒感染后,采用邻苯三酚自氧化法测定细胞超氧化物歧化酶的活性。ＣＥＦｓ感染ＩＢＤＶ后８ｈ,细胞ＳＯＤ活性有所上升。之后,随着时间的延长,细胞ＳＯＤ活性逐渐下降。试验结果表明,ＳＯＤ活性降低是ＣＥＦｓ感染ＩＢＤＶ之后发生的重要生化变化,在ＩＢＤＶ诱导细胞凋亡的过程中可能起关键作用。     

PCV2衣壳蛋白羧基端基因在T4噬菌体表面的展示

用PCR扩增猪圆环病毒II型广东分离株的衣壳蛋白羧基端基因,将PCR产物连接到重组型质粒pR上,转化DH5α细胞并筛选阳性克隆;重组质粒经PCR鉴定并测序后,转化E2菌,将重组E2菌与缺陷型噬菌体T4-Z1同源重组后,得到重组噬菌体,SDS-PAGE和Westernbloting分析,表明衣壳蛋白基因在噬菌体表面正确展示,表达的融合蛋白的分子量约为25Ku。