梨黑斑病菌遗传操作体系的建立与RFP标记转化子的致病性分析

由链格孢(Alternaria alternata)引起的梨黑斑病是我国梨生产上的主要病害之一,导致梨叶与果实产生黑斑症状及早期落叶,对我国梨产业的健康发展构成严重威胁。本实验在前期获得强致病性梨黑斑病菌菌株HN-5基础上,建立该病菌的遗传转化体系。通过优化原生质体制备过程以及转化体系发现梨黑斑病菌HN-5原生质体制备的最优条件为:菌丝在M R液体培养基中培养36 h;以0.7 M NaCl+0.8 M Mannitol为稳渗剂,配置复合细胞壁裂解酶(1%崩溃酶+1%裂解酶+1%纤维素酶+1%蜗牛酶),酶解菌丝3 h,原生质体的产量可达0.5×10~7个·mL~(-1)。通过PEG介导的原生质体遗传转化体系,将含有RFP基因的质粒p KD7转入链格孢菌HN-5中,转化效率为6个·μg~(-1)DNA。PCR检测和转化子荧光观察均表明RFP基因整合到了HN-5基因组中并成功表达。致病性分析发现RFP (Red Fluorescent Protein)标记转化子致病性未发生变化。本研究成功建立了PEG (Polyethylene glycol)介导的梨黑斑病菌遗传转化体系,构建了RFP标记菌株,为研究该病菌的致病机理奠定基础。     

氯氟吡氧乙酸在小麦及土壤中残留的分析方法

采用氢氧化钠-甲醇溶液提取,二氯甲烷萃取,定量甲醇、浓H2SO4条件下酯化,气相色谱法测定小麦及土壤中的氯氟吡氧乙酸。氯氟吡氧乙酸质量浓度在0.01~1.0 mg.L-1之间线性关系良好。在添加浓度0.01~0.8 mg.kg-1下,植株、土壤和籽粒中氯氟吡氧乙酸的平均回收率分别为72.3%~86.7%、83.6%~95.8%和77.7%~87.3%,变异系数分别为3.02%~8.59%、2.87%~8.46%和2.75%~7.61%。氯氟吡氧乙酸的最小检测量为1.0×10-11g,在植株、土壤和籽粒中最低检出浓度均为0.01 mg.kg-1。该方法的准确性、精确性和灵敏度均满足农药残留分析的要求。     

高等农业院校农药学课程创新改革与实践

农药学是植物保护专业本科生的核心课程,对高等农业院校农药学课程的设置体系、教学方法、教学内容进行了创新性的改革探讨与实践,内容包括课程设置改革与创新、教学多媒体课件(CAI)和教案的优化完善、教学方法多元化、创新型设计性实验、适时更新教学内容,取得了良好的教学实践效果。     

气相色谱法测定平菇中拟除虫菊醋类农药残留

建立了同时测定平菇中联苯菊酯、甲氰菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯等6种拟除虫菊酯类农药的多残留快速分析方法。样品以乙腈为提取溶剂,弗罗里硅土柱层析净化,GC-μECD分析测定。结果表明,供试农药在0.005~1.0 mg.kg-1的添加浓度范围内,线性关系良好,相关系数大于0.998;方法的添加回收率为83.80%~113.98%,变异系数为1.32%~13.26%,最低检出浓度为5~10μg.L-1。该方法的准确性、精确性和灵敏度均达到农药残留分析的要求。     

氟虫腈在番茄和土壤中残留分析方法的研究

建立氟虫腈(fipronil)在番茄和土壤中的残留分析方法.样品以乙腈提取,中性氧化铝(含活性炭)柱层析净化,气相色谱测定.氟虫腈的最小检测量为2×10-14g,最低检测浓度为2.5 ng·kg-1.番茄中氟虫腈的添加回收率(0.005～0.5 mg·kg-1)为82.36%～90.38%,变异系数分别为5.76%～9.62%;土壤中的添加回收率(0.005～0.5mg·kg-1)为80.20%～86.20%,变异系数分别为4.15%～8.15%.该方法的准确性、灵敏度均达到农药残留分析的要求.     

食用菌多糖对植物病毒抑制作用的初步研究

利用食用菌平菇(Pleurotus ostreatus)、金针菇(Flammulina velutipes)和香菇(Lentinus edodes)中提取的多糖,在寄主苋色藜上分别对烟草花叶病毒(TMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)进行抑制作用试验.结果表明,在不同浓度多糖的寄主上,3种食用菌多糖对TMV和CMV都有明显的抑制作用.在不同浓度多糖的寄主之间的作用效果没有显著的差异性;在抑制和钝化作用方面,不同的食用菌多糖之间存在显著的差异性,而在治疗作用方面差异性不显著.其中平菇多糖对TMV和CMV的抑制作用显著优于金针菇和香菇多糖.     

苯磺隆农药标准品的制备研究

介绍了苯磺隆标准物质的提纯方法 ,以及纯化产品的定值以及定性鉴定方法。结果表明 :用该方法纯化的苯磺隆标样与国外进口标样纯度相近 ,能够作为商检以及残留分析用的标准物质     

阴离子对氯苯嘧啶醇光化学降解的影响

为了探讨几种阴离子对杀菌剂氯苯嘧啶醇(FEN)在水体中的光化学降解的影响,以自然光为光源考察了水体类型、卤素离子、硝酸根离子和亚硝酸根离子对其光化学降解的影响,并对其光解机理进行了讨论.结果表明,氯苯嘧啶醇在水体中的光化学降解符合一级动力学方程,其在不同水体中的光解速率顺序为:蒸馏水巢湖水池塘水(黑池坝水)董埔水库水;3种卤素离子对氯苯嘧啶醇光解有极强的影响,均表现出光猝灭作用,3种离子的猝灭能力由大到小的顺序为I-Br-Cl-1;硝酸盐、亚硝酸盐也对氯苯嘧啶醇的光解表现出猝灭作用,且随着盐浓度的增大作用增强;三线态光猝灭剂山梨酸对氯苯嘧啶醇水中光解没有影响,而三线态光敏剂丙酮对其太阳光下的光解表现出较强的猝灭作用,表明氯苯嘧啶醇在水中的光解以直接光解为主,光解过程不经历三线态.     

合肥市售中药材中重金属残留状况研究

为了解合肥市药店出售的中药材中重金属的残留污染情况,测定了合肥市售的21种中药材中重金属镉(Cd)、铜(Cu)、铅(Pb)的含量.结果表明:不同类别中药材中重金属的含量有着显著的差异.Cd的含量从高到低依次为动物类＞植物类＞矿物类,动物类Cd的含量均值是植物类的3倍多,植物类Cd的含量均值是矿物类的4倍多;Cu的含量从高到低依次为动物类＞矿物类＞植物类,动物类Cu的含量均值是矿物类的4倍,矿物类与植物类中药材中Cu的含量比较接近;Pb的含量从高到低依次为矿物类＞植物类＞动物类,矿物类Pb的含量是植物类的近3倍,而植物类Pb的含量又是动物类的2倍多;同一类别不同种中药材中重金属含量差异也很大.污染评价表明,在所检测的中药材中Cd的超标率最高,达到25.4%,Pb的超标率最低,为7.9%.