运用“碳足迹”的方法评估小麦秸秆及其生物质炭添加对农田生态系统净碳汇的影响

为分析添加秸秆、生物质炭后小麦生产过程中碳足迹的动态、分布以及构成,研究了不同处理在小麦生长期的CO2、N_2O、CH4排放情况,以及不同处理的单位面积碳足迹构成与碳足迹总量,试验设置5个处理:对照(CK)、常规施肥(N)、施肥并添加4 t·hm-2秸秆(NS)、施肥并添加4 t·hm-2生物质炭(NBClow)、施肥并添加8 t·hm-2生物质炭(NBChigh)。结果表明,小麦生产中碳足迹的构成主要为农田生态系统净初级生产力(NPP)和氮肥生产过程中的能源消耗,与常规施肥相比:添加4 t·hm-2秸秆、4 t·hm-2生物质炭与8 t·hm-2生物质炭处理,小麦产量分别增加了30.9%、66.3%和36.6%;添加4 t·hm-2秸秆使土壤CO2的季节排放总量增加了68.7%,生态系统N_2O的季节排放总量降低了33.9%,添加4 t·hm-2和8 t·hm-2生物质炭生态系统N_2O的季节排放总量降低了23.8%和58.6%,但是土壤CO2的季节排放总量没有显著性的差异;添加4 t·hm-2秸秆使小麦生产过程中的碳足迹升高了26.0%,添加4 t·hm-2和8 t·hm-2生物质炭碳足迹分别降低了198.0%和112.9%。生物质炭的添加降低了小麦生产过程中的碳足迹。     

第1只转基因灵长类动物产生

美国科学家已成功得到第 1只转基因灵长类动物罗猴 ( rhesus)。这只猴被命名为 ANDi(即 inserted DNA的倒拼 ) ,是用反转录病毒载体介导的转基因方法产生的 ,所转的外源基因是作为标记基因的绿色荧光蛋白基因。在过去 ,转基因小鼠为人类的许多疾病提供了研究模型 ,但由于小鼠与人的亲缘关系较远 ,因此转基因猴的建立可望弥补转基因小鼠动物模型的一些不足 ,加快某些人类顽疾的研究进程第1只转基因灵长类动物产生@郭志儒     

人溶菌酶密码子优化及其在牛乳腺细胞中高效表达

【目的】分析牛乳腺中7种主要乳蛋白基因密码子使用偏好性,筛选高频密码子和低频密码子,依据其对人溶菌酶基因进行密码子局部优化和全局优化,通过牛乳腺上皮细胞等多种细胞对优化效果进行分析评价,为提高重组人溶菌酶表达量,开发新型、高效、安全的重组人溶菌酶提供理论依据。【方法】利用CodonW和EMBOSS等软件对7种主要牛乳蛋白和人溶菌酶基因密码子偏好进行生物信息学分析,筛选牛乳蛋白基因高频、低频密码子并根据牛乳蛋白基因密码子使用偏好对人溶菌酶基因翻译起始区前22位密码子（LYZop22）和全局密码子(LYZop)分别进行优化。构建人溶菌酶-荧光素酶融合表达载体（pGL3-LYZcw/op22/op）和人溶菌酶过表达载体（pcDNA-LYZcw/op22/op）,将上述载体分别转染牛乳腺上皮细胞(BMEC)、牛成纤维细胞（BFFC）和C127小鼠乳腺上皮细胞等3种细胞,通过荧光素酶、实时荧光定量PCR及Western-blot等方法检测密码子优化对溶菌酶表达的影响。【结果】牛乳蛋白基因密码子偏好以GC结尾,GC3s平均含量为0.537±0.062,而人溶菌酶GC3s含量为0.407,偏好以AT结尾;聚类结果表明,牛乳中酪蛋白与乳清蛋白类基因在密码子使用偏好性上也存在一定差异。依据筛选获得的牛主要乳蛋白基因5个高频密码子（RSCU>1.5）和7个低频密码子（RSCU<0.5）对人溶菌酶基因密码子进行优化并转染多种细胞进行表达效果分析。荧光素酶分析发现,相比野生型溶菌酶密码子（LYZcw）,翻译起始区密码子优化类型LYZop22分别在BMEC、BFFC细胞中提高1.48倍（P<0.01）和1.30倍（P>0.05）;而全局密码子优化类型LYZop分别在BMEC、BFFC中提高2.2倍（P<0.01）和2.44倍（P<0.01）,说明密码子优化能明显提高人溶菌酶在多种细胞中表达量。实时荧光定量PCR结果表明,LYZop22相比LYZcw在BMEC和BFFC细胞中分别提高了2.08倍（P<0.05）和1.5倍（P>0.05）,而LYZop则分别提高了22倍（P<0.01）和17.8倍（P<0.01）,mRNA表达水平与密码子优化后的mRNA二级结构稳定性呈正相关。Western-blot结果也进一步表明,密码子优化后的LYZop22和LYZop能明显提高重组人溶菌酶在牛乳腺上皮细胞中的表达量。上述结果表明,根据牛乳腺中主要乳蛋白基因密码子使用偏好进行密码子优化,能显著提高人溶菌酶在牛乳腺上皮细胞及成纤维细胞中的表达量,且溶菌酶基因全局密码子优化效果优于翻译起始区密码子优化效果。【结论】通过生物信息学分析获得了牛乳蛋白基因使密码子使用偏好及高低频密码子;依据牛乳蛋白密码子使用偏好性对人溶菌酶密码子优化能显著提高重组人溶菌酶mRNA水平和蛋白水平的表达量,为今后利用生物反应器高效生产重组人溶菌酶奠定基础。     

高于人工3倍的自动行走式萝卜收获机

为了缓解日本农村因劳动力紧张所产生的日趋严重的社会问题,改善中、老年农民从事农业生产的客观条件,由日本专门制造大型农用机械的KUBOTA公司自行研制、开发的GRH-250型自动行走式萝卜收获机已获成功,并于近期投放市场.     

打破坚冰——深圳殡葬业民营化调查

每个人都逃不过轮回．有生就有死。不管对人的生死看得再淡然的人，后人都会想尽办法寄托自己对他的哀思。于是，便形成了今天的殡葬服务业：随着市场经济的深入发展，殡葬业从国有垄断到民营经营．似乎只剩下了一层薄薄的纸。     

秦川牛ADIG基因重组腺病毒过表达载体的构建与病毒包装

【目的】构建秦川牛ADIG基因的重组腺病毒载体,包装并扩繁病毒,为下一步研究该基因在脂肪细胞分化过程中的分子作用机制和相关信号通路奠定基础。【方法】根据NCBI收录的家牛ADIG基因(NM_001113720.1)mRNA序列设计引物,以秦川牛组织样提取的总RNA反转录而成的cDNA为模板,通过RT-PCR和PCR扩增获得目的基因,将其连接到pMD19-T Simple载体并测序。质粒提取纯化后通过BglⅡ与SalⅠ双酶切,然后胶回收酶切产物,将其连接到穿梭载体pAdTrack/CMV上,构建重组穿梭质粒pAdTrack/CMV-ADIG。将pAdTrack/CMV-ADIG质粒用PmeⅠ酶切线性化,转化含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞中进行同源重组,构建重组腺病毒质粒pAD-ADIG,并用PacⅠ酶切鉴定,提取质粒后转化大肠杆菌Top10进行扩繁。用PacⅠ酶切线性化pAD-ADIG载体并回收质粒大片段,转染293A细胞进行病毒包装,然后完成病毒扩繁和病毒滴度的测定。【结果】PCR扩增获得了399bp ADIG基因CDS区;成功构建了重组穿梭质粒pAdTrack/CMVADIG和重组腺病毒质粒pAD-ADIG。经检测,ADIG重组腺病毒包装成功,扩繁后得到了高滴度的腺病毒(1×108PFU/mL)。【结论】成功构建了秦川牛ADIG基因的重组腺病毒表达载体pAD-ADIG,完成了病毒包装和扩繁。     

微生物植酸酶在体外条件下活性的测定

由于添加无机磷导致粪便中磷的排出量增多 ,污染水源和土壤 ,同时磷酸氢钙还易导致氟中毒和其他重金属中毒 ,因此在饲料中添加植酸酶代替直接添加无机磷日益受到重视。植酸酶的应用效果 ,关键在于其在消化道中的活性。自然界有许多不同的植酸酶来源 ,通过遗传工程技术 ,利用微生物 (黑曲霉—Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ)发酵工程技术生产饲用植酸酶 ,已成功地应用于猪和家禽中。本试验是应用这种微生物植酸酶 ,以玉米、豆饼、麦麸为植酸磷载体 ,模拟畜禽胃肠消化道环境 ,在体外条件下测定微生物植酸酶的活性。1　材料与方法1 1　试验…     

甜油桃保护地栽培技术推广的对策

在甜油桃保护地栽培技术的推广过程中,该技术被采用的程度受技术创新特点、农民信息来源、技术采用风险、产品的营销环境以及农民自身特征等因素的影响,其中既有促进技术推广的有利因素,也有阻碍技术推广的不利因素。针对这些影响因素,提出了促进甜油桃保护地栽培技术推广的对策和建议。     

高产芝麻“勇珍一号”

品种来源:勇珍一号是湖北省农民育种家培育出的优良自芝麻新品种。1985年经中央和湖北省有关部门通过鉴定,胜过其它新品种,定为全国推广试种的优良品种(见1985年4月13日《农民日报》)。特征特性:勇珍一号芝麻属单杆三花型品种,以六棱蒴果为主,同株蒴果有四、八、十棱混生,蒴果