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据NCBI上已发表的序列设计引物,通过RT—PCR从北京鸭脾脏的总RNA中扩增得到MHCⅡβ基因,将其克隆至pMD18-T载体上,经酶切分析及测序鉴定后,进一步亚克隆至原核表达载体pGEX-KG中,转化大肠杆菌BL21中诱导表达。蛋白纯化后,免疫昆明小鼠制备多克隆抗体,经1:100倍稀释后用于Westernblot分析。结果表明:克隆得到了鸭MHCⅡβ链基因,大小为798bp,经核苷酸测序与已登录的基因序列同源性为92%;成功构建了原核表达载体,融合蛋白得到了高效表达且纯化后纯度达95%。制备的鼠抗鸭MHCⅡβ多克隆抗体,经酶联免疫吸附实验(ELISA)与免疫印迹法(Westernblot)证实抗体的效价高、特异性强,为深入研究鸭MHCⅡ奠定了基础。 相似文献
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以广东温氏集团培育的黄羽肉鸡种蛋胚胎为研究对象,并以与人和小鼠胚胎发育相关的胰岛素样生长因子2受体(insulin-like growth factor type II receptor,IGF2R)基因为候选基因,进行了SNP位点的筛选和多态性的检测,探讨了IGF2R的变异对胚胎死亡的影响。在IGF2R第34外显子中发现2个SNP位点,对具有AlwNⅠ酶切位点的SNP位点进行了PCR-RFLP检测,分析了胚胎IGF2R的SNP位点PCR-RFLPs基因型在死亡和正常发育胚胎中分布特征。经2χ检验,鸡基因IGF2R第34外显子AlwNⅠ-RFLP基因型在死亡和正常发育胚胎中存在显著差异,在死亡的胚胎中基因型AT的频率(0.326)显著地高于正常发育胚胎的频率(0.077)。 相似文献
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鸡卵细胞卵黄生成受体基因(ovr)SNPs检测及其与蛋用性状的关联分析 总被引:1,自引:0,他引:1
以6个鸡(Gallus gallus)品种混交群体390个个体为研究材料,采用PCR-SSCP、PCR-RF-SSCP及测序的方法进行鸡卵细胞卵黄生成受体(occyte vitellogenesis receptor,ovr)基因内含子单核苷酸多态性(SNPs)位点筛选,并与鸡群蛋用性状进行关联分析.结果表明,在鸡ovr基因中发现内含子2T3967G,内含子7C8099T和A8296G,内含子9A8839T和G9084A共5个突变位点;其中内含子2HinfⅠ突变位点与开产日龄和蛋壳厚度相关极显著(P<0.01),与产蛋量、蛋重和蛋黄比例相关显著(P<0.05);3种基因型中订个体在开产日龄、平均产蛋量、蛋重、蛋黄比例等方面都优于其它基因型个体.研究结果证实了ovr基因对鸡的产蛋性能和蛋品质性状有重要的影响. 相似文献
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根据合子阻滞因子1(zygotearrest 1,ZAR1)基因GenBank的DNA序列(DQ231443,gi:83727928)设计2对引物,用直接测序和PCR-SSCP相结合的方法,进行单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)检测,分析该基因在5个品种猪(小梅山、清平、杜洛克、长白和大白)中变异特征及其与产仔数的相关性。测序后在内含子2、3和外显子3中存在6个SNP及在内含子3中存在1处5bp的插入/缺失变异。在5个品种猪群中,对外显子3中的第54碱基处C→T突变(Exon3-BstUⅠ)和内含子3中的5个碱基插入/缺失的变异(Intron3-TspRⅠ)进行了PCR-RFLP检测,并与产仔数进行了关联分析,结果表明,Exon3-BstUⅠ多态对杜洛克母猪第1胎和2胎总产仔数产生显著(P<0.05)影响,对经产母猪总产仔数产生极显著(P<0.01)影响,对经产母猪的产活仔数影响极显著(P<0.01),携带CC基因型母猪的产仔数均高于TT基因型的;Intron3-TspRⅠ多态对杜洛克母猪第1胎和经产胎次总产仔数和产活仔数有显著(P<0.05)影响,NN基因型高于MN和MM基因型的产仔数。 相似文献
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养好雏鸡是养鸡成败的关键。它与成鸡的质量、生产性能和种用价值密切相关,所以鸡场要取得高的经济效益,就必须培育出质优的雏鸡。雏鸡由于各种生理机能不健全,体温调节能力差,抗逆性差,敏感性强,对外界环境的适应性差,对各种疾病的抵抗力弱。为此,我们选用了既有多种生理功能又有抗菌作用的维生素C银翘片作为雏鸡的饲料添加剂,对蛋鸡的育雏效果进行了试验研究。一、材料和方法1试验药物选择湖北宜昌康民药业有限公司生产的维生素C银翘片,规格:每片025克。功能:辛凉解表,清热解毒。主要成分:金银花、连翘、桔梗、甘草、… 相似文献
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利用pGEX融合蛋白表达系统,将鸡毒霉形体黏附蛋白(pMGA)与GST的编码序列在大肠杆菌BL21中进行融合表达,经GST·BindResin纯化,GST—pMGA的纯度达96%。用蛋白酶Thrombin切掉GST标签,获得纯度为96%的pMGA,经Western—blot鉴定具有良好的免疫学活性。通过差速离心法提取SPF鸡胚的气管、心脏、肝脏、肺脏、肾脏、腺胃、十二指肠、法氏囊、胸腺和脾脏等组织膜蛋白,采用斑点酶联免疫吸附试验(Dot—ELISA)检测各组织膜蛋白与pMGA的结合。结果表明:除脾脏外,其余组织的膜蛋白与pMGA之间存在特异性结合,说明这些组织膜蛋白中存在pMGA的受体蛋白。经SDS-PAGE分析发现,除脾脏外,其余9种组织的膜蛋白中均含有一条相对分子质量约为30ku的主带,受体的相对分子质量可能为30ku,可为深入研究pMGA的受体蛋白提供资料。 相似文献
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彭秀丽 《江西畜牧兽医杂志》2016,(4):4-7
《家禽生产学》是动物科学专业的主要专业课程,对培养学生分析问题、解决问题的能力和综合素质起着重要作用。针对该课程教学过程中存在的教学内容涵盖面广、实践性强、学生学习兴趣不高以及动手能力较差等问题,本文主要从教学内容、教学方法、考核制度及师资队伍的培养等方面入手,对《家禽生产学》课程进行了改革与探索。通过教学改革措施的实施,提高了家禽生产学课程的教学效果和质量,为培养适应现代化家禽生产的高素质专业技术人才服务。 相似文献
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肉用仔鸡以青霉素G钾(PC)800u/ml饮服5天。5天内PC在回肠中的浓度为2.2102±2.3718u/g,仅为饮水浓度的0.2763%;直肠中浓度为3.1576±2.9968u/g,仅为饮水浓度的0.3947%。PC在回肠和直肠内浓度差异不显著(P>0.05),但其在直肠内浓度明显高于在回肠内的浓度。PC在肉鸡盲肠中的检出率很低。 相似文献