甘蓝型油菜角果长度性状的全基因组关联分析

角果长度是油菜重要的农艺性状,适度增加角果长度有利于扩大角果库容量,增加光合面积,提高油菜的籽粒产量。本研究利用Illumina60KSNP芯片对496份具有代表性的油菜资源进行基因型分析,考察群体在4个环境中的角果长度表型,利用MLM和GLM模型进行全基因组关联分析。结果表明, MLM模型检测到7个位点,联合解释25.01%的表型变异; GLM模型检测到25个位点,联合解释41.77%的表型变异。合并共同位点后得到27个位点,其中7个与前人报道的QTL重叠,其余20个是新鉴定的位点。效应最大的位点Bn-A09-p29991443位于A09染色体,在MLM和GLM模型中分别解释13.89%和12.86%的表型变异,携带其优异等位基因的材料平均角果长度增加0.89cm。同时,在该位点附近找到已克隆的油菜角果长度基因ARF18和BnaA9.CYP78A9。此外,在5个位点附近发现拟南芥已知角果长度基因GID1b、FUL、EOD3、DOF4.4和GA20ox1的同源拷贝。本研究结果有助于解析角果长度的遗传基础,为研究角果长度的调控机理,指导角果长度的遗传改良打下基础。     

景观油菜花期调控技术的效果

为满足休闲观光需求,延长油菜花观赏期,通过田间试验研究了摘薹、增施氮肥、烯效唑处理、苯磺隆处理和分期播种对油菜花期的影响。结果表明,摘薹处理可推迟初花期3.0～10.0 d,终花期2.0～12.0 d,与不摘薹组合应用可将整个观花期增加7.5～10.5 d;摘薹与品种组合应用,观花期可增加17.7～19.3 d。薹期增施氮肥对花期调节效果好于越冬期增施氮肥,与不增施氮肥组合应用,可将观花期增加8.5～9.0 d;增施氮肥与品种组合应用,观花期可增加15.0～17.7 d。喷施烯效唑可延长花期0～5.0 d,与不喷施烯效唑组合应用,观花期可增加9.5～10.0 d;喷烯效唑与品种组合应用,观花期平均增加17.5 d。平头期喷施苯磺隆可使花期增加1.5～13.5 d,与不喷施苯磺隆搭配,观花期增加16.0～18.5 d;喷施苯磺隆与品种组合应用,观花期增加约25.0 d。分期播种可显著延长油菜观花期,3个品种分期播种的平均总观花期为46.5 d, 40.5 d和38.5 d,分期播种与品种组合应用,观花期可达66.0～72.0 d,增加39.8～42.5 d,观花期延长1倍以上。综上,分期...     

苏云金芽胞杆菌cry8Ea启动子区orf1片段缺失增强启动子活性

本文分别构建了cry8E基因上游的启动子(Porf18E)和其上游缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)融合lacZ基因的表达载体,通过β-半乳糖苷酶活性的分析,发现PΔorf18E的转录活性高于Porf18E。分别用PΔorf18E和Porf18E指导cry1Ac基因的表达,通过光学显微镜观察,发现两个启动子指导表达的Cry1Ac蛋白均可形成双锥形晶体;通过总蛋白定量分析发现,缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)指导的Cry1Ac蛋白表达量高于Porf18E启动子指导的Cry1Ac蛋白表达量;生物活性测定表明:PΔorf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾Plutella xylostella具有杀虫活性,高于Porf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾的杀虫活性。本文获得的强活性的启动子PΔorf18E是目前已报道的转录活性最高的cry基因启动子,该启动子为Cry蛋白的表达和遗传工程菌株构建提供了重要元件。     

辐射育种获得油菜(Brassica napus)高油酸材料

本研究用8-10万伦琴^60Co γ射线辐射双低油菜（B．napus）湘油15干种子，并对辐射后代进行高油酸连续选择，结果M2、M3、M4油酸含量有不同程度提高，至M3油酸含量迅速提高，多数植株油酸含量在70％以上，最高油酸含量达93．5％。对高油酸突变体M6 04—855（种子油酸含量为91．5％）的fad2基因与网上公布的fad2基因DNA序列进行比对，发现突变体fad2基因270位的碱基G转换为碱基A，导致密码子由TGG转换为TGA（终止密码子）。这一区域是fad2蛋白的beta折叠区和保守区。另外，在1044与1062的碱基突变也导致终止密码子的产生。这些结构上的变化导致fad，基因功能的丧失，使油酸不能转化成亚油酸，从而提高油酸含量。根据基因突变的分子机制，无论是碱基的转换或颠换，都需经过几次的复制，即经过几个世代才能完或，这也是在后期世代才出现高油酸变异的原因。     

小麦Germin蛋白的研究现状

小麦Germin蛋白是一种具有草酸氧化酶活性的糖蛋白.已经被广泛的研究应用.综述了Germin蛋白的发现及其结构特点与功能的关系.详细介绍了Germin蛋白及其蛋白家族的结构特点的异同,以及它在植物发育、抗逆和防御过程中的作用.     

iMyAP基因过表达载体转化甘蓝型油菜

本研究以甘蓝型油菜湘油15号叶片cDNA为模版,克隆油菜黑芥子酶协助蛋白iMyAP基因全长CDS,目的片段序列和GenBank上报道的甘蓝型油菜序列iMyAP12-Y10156同源性达到100%。将得到的iMyAP基因片段与pMD19-T载体连接,命名为T-1152。用BamHⅠ和XbaⅠ双酶切T-1152和pHB载体,回收片段经T4DNA连接酶连接得到iMyAP基因过表达载体pHB-1152。通过农杆菌介导将pHB-1152转化至甘蓝型油菜湘油15号,PCR鉴定显示成功获得2株转基因植株。本实验为进一步研究iMyAP基因的功能奠定了良好的基础。     

油菜抗咪唑啉酮类除草剂基因BnALS1R等位基因特异PCR标记的开发与应用

油菜抗咪唑啉酮类除草剂基因BnALS1R是从抗性突变体M9中克隆获得,抗性基因BnALS1R与野生型基因BnALS1存在1处SNP,即乙酰乳酸合酶第638位丝氨酸残基被天冬酰胺酸替代。为获得油菜抗除草剂基因BnALS1R的分子标记,根据该处点突变,结合获得的BnALS3与BnALS1序列,开发30条等位基因特异PCR (allele-specific PCR,AS-PCR)引物,采用筛选出的3条AS-PCR引物在F₂、BC₁和BC₂群体中进行PCR扩增。结果表明,该标记有效检测出群体中存在的3种基因型,其分离比分别为1∶2∶1、1∶1、1∶1,均遵循单基因遗传规律。应用该标记对获得的抗性恢复系进行PCR扩增,结果发现所有抗性恢复系均能扩增出抗性基因BnALS1R目的条带,表明3条标记引物可应用于抗性基因的检测。AS-PCR标记的获得将促进以抗性基因进行油菜抗除草剂分子标记辅助选择育种。     

甘蓝型油菜-核盘菌酵母双杂交cDNA文库构建及BnJar1互作蛋白筛选

油菜与核盘菌相互作用的过程中，JA（茉莉酸）合成相关基因表达量升高，但是JA信号传递却受到了抑制，推测核盘菌分泌的效应蛋白可能直接或间接作用于JAR1蛋白，使其活性降低，从而抑制依赖JA途径的油菜防御系统。前期通过转录组测序获得了差异表达基因BnJar1全长序列，为进一步揭示BnJar1基因参与油菜-核盘菌相互作用过程的机理，本研究对BnJAR1蛋白进行生物信息学分析和预测，构建了核盘菌-油菜互作表达基因酵母文库，并以BnJar1作为诱饵蛋白对文库进行酵母双杂交筛选，获得了5个来自油菜的互作蛋白：丙二烯氧化物环化酶2(BnAOC2)、COP9信号复合物（BnCOP9）、4a-羟基四氢生物蝶呤脱水酶（BnDcoH）、腈水解酶2(BnNIT2)和茎特异性蛋白（BnTSJT1）;2个来自核盘菌的互作蛋白：MFS结构域蛋白（SsMFS）和Rho3 GTP酶（SsRho3）。相关结果为研究油菜-核盘菌的相互作用，挖掘致病或抗病相关基因，进一步解析其机理奠定了基础。     

超高产油量油菜品种宁杂182的选育和栽培要点

宁杂182属甘蓝型油菜中早熟类型，选自16’8006×16’8036组合。国家油菜试验结果为，株高平均169.76 cm，有效分枝平均9.01个，单株总角数平均395.90个，角果中长，每角粒数平均23.35粒，千粒质量平均4.31 g，芥酸含量平均0.14%，硫苷含量平均22.60μmol/g，含油量平均50.09%，生育期平均217.3 d。2 a平均产量3 180.30 kg/hm²，比对照增产11.80%，平均产油量1 578.38 kg/hm²，比对照增产21.25%。2 a平均菌核病发病率17.47%，平均病情指数8.99;2 a平均病毒病发病率0.67%，平均病情指数0.38。宁杂182适合机收。     

油菜抗除草剂新种质PN19的交互抗性鉴定及其抗性基因的表达研究

鉴定抗除草剂油菜种质对不同种类除草剂的交互抗性，获得可安全交替使用的其他类型除草剂，可延长抗性品种使用时间。本研究以油菜抗SU类除草剂新种质PN19及转抗性基因的拟南芥和烟草为材料，在3-5叶期喷施不同浓度梯度的五大类ALS抑制类除草剂（SU、IMI、TP、PB和SCT类），通过抗性鉴定以确定PN19对各类除草剂的交互抗性。结果表明：SU和SCT类交互抗性最强，IMI和TP类其次，PB类最低。转基因植株除草剂抗性评价及烟草ALS酶体外活性分析表明，五类除草剂交互抗性功能源于靶标ALS酶对各除草剂敏感性下降。且五类除草剂处理后PN19抗性基因较野生型表达上调。本研究为田间ALS类除草剂混合使用进行杂草防控提供了可能性。