牛卵泡发育及其调控

扼要介绍了牛卵泡发育的一般规律,总结了近年来牛卵泡发育及其调控方面的研究成果,为进一步的研究工作提供了参考资料。     

山羊FST慢病毒载体构建及其对卵巢卵泡颗粒细胞增殖的影响

研究卵泡抑素(FST)对山羊卵巢卵泡颗粒细胞增殖的影响。采集山羊卵巢组织、分离培养原代卵巢卵泡颗粒细胞,RT-PCR克隆山羊FST,设计shRNA片段,构建慢病毒过表达载体和干扰载体,感染原代卵巢卵泡颗粒细胞,qPCR技术检测过表达与干扰的效果, CCK-8检测细胞的增殖效果。结果显示:分离培养的山羊卵巢卵泡颗粒细胞经促卵泡素受体(FSHR)免疫荧光鉴定,阳性率为95%;慢病毒感染颗粒细胞时荧光蛋白的表达占比80%;qPCR验证FST过表达和干扰慢病毒载体的效果均显著(P0.05);过表达FST显著(P0.05)抑制卵巢卵泡颗粒细胞的增殖,干扰FST显著(P0.05)促进卵巢卵泡颗粒细胞增殖。笔者分离出山羊卵巢卵泡颗粒细胞,成功构建FST过表达和干扰两种慢病毒载体,感染结果表明FST能够抑制山羊卵巢卵泡颗粒细胞的增殖,为进一步研究FST在哺乳动物卵泡发育调控中的作用及其机制提供了基础资料。     

猪β防御素-1基因乳腺特异性表达载体的构建

为构建标记基因可去除的β防御素-1(pBD-1)基因乳腺特异性表达载体,利用RT-PCR方法从猪脾脏中克隆获得pBD-1基因,再插入乳腺特异性表达骨架载体pBC1-neo中;经PCR、酶切电泳以及测序鉴定,确认成功构建出乳腺特异性表达pBD-1的载体。进一步将上述功能片段亚克隆至能将标记基因全部去除的骨架载体MCS-3s-loxP-GFP中,成功构建了一种筛选标记可全部去除的乳腺特异性3s-loxP-GFP-pBC1-pBD1转基因载体。该载体为研究pBD-1蛋白的抗菌活性、抗菌机制,以及创制乳腺高效表达pBD-1的转基因猪育种新材料和通过哺乳以提高新生仔猪抗病力奠定了基础。     

提高绵羊繁殖率的技术措施

肉羊生产能否成为现代畜牧业的一部分，其根本原因在于绵羊的生物学特性：即繁殖率和生产性能低，且季节性发情明显，不能全年配种繁殖；严重限制了绵羊的生产力和利润空间，极大地影响了广大农牧民的养羊积极性。提高繁殖率是发展养羊生产、提高经济效益的关键，本文总结多年来养羊生产实践中的经验，从管理措施、饲养技术和繁殖育种等方面提出提高肉羊繁殖率的技术措施。     

羊胎盘复方制剂对小鼠的毒性研究

为了检测羊胎盘提取物(GPE)及其复方制剂(GPP)的安全性,试验对200只小鼠进行急性毒性试验和30 d饲喂试验。结果表明:在急性毒性试验中,各试验组小鼠采食、排便无异常,器官无病变。在30 d饲喂试验中,各试验组小鼠饲料利用率、血常规及血液生化指标均差异不显著(P>0.05);各试验组小鼠内脏器官检查无病变,病理组织学检查无异常;但GPPⅡ单倍剂量组小鼠脾脏重显著高于对照组与高倍剂量组(P<0.05),并且GPPⅡ单倍剂量组小鼠脾脏重与体重比值与对照组、GPE组之间差异显著(P<0.05)。说明羊胎盘提取物及其复方制剂对动物无毒副作用,复方制剂对动物免疫器官有改善作用。     

羊胎盘复方制剂对小鼠睾丸染色体与骨髓细胞微核的致畸变作用

研究了不同羊胎盘制剂对小鼠睾丸染色体与骨髓细胞微核的致畸作用,实验显示,羊胎盘提取物（GPE）及其制剂（GPP）的各剂量组小鼠睾丸染色体的断片数、易位数、染色体（包括常染色体和性染色体）单价数、畸变细胞数及其畸变率与阴性对照组相比差异不显著（P〉0．05）,但与环磷酰胺（CTX）处理的阳性对照组相比差异则极显著（P〈0．01）;GPE、GPPI及GPPII3个剂量组小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率与阴性对照组相比,无统计学意义（P〉0．05）。而阳性对照组的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率则显著高于其他实验组（P〈0．01）。综上所述,羊胎盘提取物及其复方制剂对小鼠无致畸作用。     

季节对体外成熟卵母细胞的发育能力的影响

猪的卵母细胞对外界环境非常敏感,造成猪的胚胎学相关研究是家畜繁殖学研究领域中最困难的方面之一。猪卵脆弱的主要原因是其胞质中含有大量的脂肪滴,但目前其具体生物学功能还不清楚。众所周知,猪的繁殖表现和环境密切相关,例如,温度、湿度、光照等。本研究目的是描述季节的变化对体外成熟卵母细胞发育能力的影响。连续两年从当地屠宰场获取初情期前猪卵巢,抽取猪卵丘卵母细胞复合体,并在不含BSA的NCSU-23(添加10 ng/mL EGF,10 ng/mL leptin,0.57 mm o l/L cysteine,10 IU/mL PM SG和10 IU/mL hCG)中培养44 h,然后用透明质酸酶脱去卵丘。部分卵母细胞经过电击进行孤雌激活,部分卵母细胞用来进行体细胞核移植。对于猪体细胞核移植,使用长白猪胎儿成纤维细胞做为核供体,上述脱去卵丘的卵母细胞作为胞质供体。克隆胚和孤雌胚在添加4 m g/mL的BSA液滴中培养,第2天和第6天分别计算卵裂和囊胚率(D 0:融合或激活的当天)。其中每个实验至少重复3次,所有实验都经过SPSS(13.0)统计分析。比较了不同季节每对卵巢获得A级卵(外包3层以上致密的卵丘细胞并且卵胞质均匀的卵母细胞为A级卵)和B级卵(外包2~3层卵丘细胞并且胞质均匀的卵母细胞为B级卵)的数量以及卵母细胞核成熟的比例(实验1),统计分析了不同季节孤雌(实验2)和核移植(实验3)胚胎发育能力的差异。实验1中发现春季(3~5月)COC s/ovary pairs的比例最高[7.6±3.5(春)vs 6.4±3.3(夏),6.7±2.9(秋),6.7±3.4(冬),P<0.05]。然而,没有发现卵母细胞的MⅡ百分比有显著性差异[75.3%±3.3%(春),73.5%±2.3%(夏),73.0%±4.2%(秋),76.5%±6.7%(冬),P<0.05]。实验2中观察到夏季孤雌胚胎的囊胚率显著性降低[10.2%±2.7%(春)vs 27.2%±3.5%(夏),24.2%±3.2%(秋),22.3%±3.4%(冬),P<0.05]。实验3,猪体细胞克隆胚胎在春季囊胚率获得提高[12.2%±1.3%(春)vs 10.3±1.1%(秋),8.1±1.4%(冬),P<0.05]。以上结果表明,季节变化影响体外成熟卵母细胞的发育能力。     

《动物细胞生物学》课程教学改革探索

以《动物细胞生物学》课程教学改革为主要研究对象,重点分析目前高校在细胞生物学教学过程中存在的各种弊端,并提出了相应的解决方案,以期得到更好的教学效果。     

肠道微生物与家畜生殖功能研究进展

肠道微生物群作为动物体内一个复杂而庞大的微生态系统,有着以细菌为主的数千种不同的种属。它们与宿主多个组织、器官存在密切的相互作用,能够调控宿主的能量代谢,影响机体免疫、内分泌和生殖功能。本文概述了家畜肠道微生物群随着宿主生长发育和不同生殖生理期而变化的规律,对性腺激素、精子发生、发情周期、妊娠泌乳和生殖疾病的影响,并指出肠道微生物群研究存在的问题,为肠道微生物在家畜生殖的功能研究提供参考。