饲料蛋白质含量对家蚕生长发育和繁殖的影响

本试验用脱脂大豆粉和纤维素粉含量不同的8种人工饲料处理5龄雌蚕。结果用含蛋白质5.62%的饲料,蚕仅存活6.12天;含9.12％的,结茧少且不能化蛹,高于12.63%时能正常结茧化蛹。随着饲料蛋白质含量从9.12％增至37.18％,五龄经过从10.5缩短至7天,熟蚕体重从2.35克增至3.93克,干物消化量从0.40克升至0.86克,消化率从14.49％升至33.08％。但全龄干物食下量和排粪量则以取食蛋白质含量为12.63％的最高,而以取食37.18%的最低。蛹重和卵量也随五龄饲料蛋白含量升高而增加。     

茶尺蠖核型多角体病毒荧光定量PCR检测方法的建立

根据茶尺蠖核型多角体病毒（Ectropis oblique nucleopolyhedrovirus, EoNPV）基因序列设计一对引物,并从感染该病毒的虫体中提取EoNPV基因组DNA,进行PCR扩增,将该基因片段与载体pMD18-T连接,转化入大肠杆菌TG1中,经单克隆菌落筛选及测序鉴定后得到重组质粒,以该质粒为荧光定量PCR标准品模板稀释后建立标准曲线。构建的标准曲线线性关系良好,相关系数为0.989,检测范围为10³~10⁸拷贝/µL,特异性和重复性较好。该方法可以准确地判断出病毒拷贝数,为茶尺蠖核型多角体病毒在虫体内增殖动态的研究和病毒制剂的质量检测提供了方法依据。     

人工饲料含糖量对蚕生长发育的影响

试验用糖和纤维素含量比不同的5种人工饲料饲育1～3龄蚕和5龄蚕.结果指明:用含糖量0%、4%、8%、12%和16%的饲料饲育1～3龄蚕,疏毛率、收蚁第11日的存活率、发育速度、体重等指标,均以4%为最好,其次为8%处理.用含糖量0%、5%、10%、15%、20%5种饲料饲育5龄蚕,结果雌雄平均体重、茧重、茧层重均以5%处理最好.     

BmNPV几丁质酶基因的表达及其产物对Bt杀虫剂的增效作用

用PCR方法分别扩增出BmNPV几丁质酶基因编码区全片段和去信号肽片段。将全片段克隆入原核表达载体pET28a，在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)进行融合表达。将去信号肽片段克隆入pFastBacb转移载体，重组到杆状病毒Bac-to-Bac表达系统，在粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)细胞系(Tn-5B1-4)中进行融合表达。SDS-PAGE分析和薄层扫描显示，2片段均得到高效表达，表达产物分别占细胞总蛋白的22％和12％。将以上2种表达产物加入Bt菌液中喂食2龄家蚕(Bombyx mori)，观察并记录不同处理下家蚕的死亡时间及体重。结果表明，2种表达产物对Bt杀虫剂均有明显的增效作用。取食添加以上2种表达产物的家蚕与对照处理相比，LT50分别提前24．5和24．6h，体重增量约是对照组的1／4。     

西方蜜蜂6个亚种正反交苹果酸脱氢酶Ⅱ基因的遗传差异

研究了西方蜜蜂(Apis mellifera L.)的浙农大1号意蜂、东北黑蜂、卡尼鄂拉蜂、喀尔巴阡蜂、高加索蜂和乌克兰蜂6个亚种及浙农大1号意蜂与其它5个亚种正反交杂交组合苹果酸脱氢酶Ⅱ的基因型频率、基因频率和杂合纯合度，并分析了杂交后代与亲本的关系。浙农大1号意蜂、喀尔巴阡蜂、高加索蜂的纯合度较高，而东北黑蜂、卡尼鄂拉蜂和乌克兰蜂是高度杂合的亚种。杂交子代与母本的差异小于与父本的差异。正反交杂交组合基因型频率、基因频率的差异程度与亲本的杂合度有关。     

中华蜜蜂前溶血肽原基因在Tn-5B1-4细胞中的表达

构建中华蜜蜂前溶血肽原基因的重组供体质粒pBacHT—GFPTAccPPM，将其转化进入穿梭栽体Bacmid的受体茵DH10Bac中，得重组穿梭栽体Bacmid-GFPTAccPPM，再用Lipofectin介导其DNA转染粉纹夜蛾细胞系Tn-581-4，最后观察细胞表达时相动态。经ELISA法和荧光显微镜观察证实，胞内表达产物既能发射易于检测的绿色荧光，又具有良好的抗原性，证明重组病毒Bacmid-GFPTAccPPM已在昆虫细胞中得到了表达。     

人工饲料中脱脂大豆粉的精制度对小蚕的影响

用精制程度不同，色泽自淡褐至白色，蛋白质含量分别为４２．４％（Ａ）、４８．９％（Ｂ）、５４．２％（Ｃ）和６５．８％（Ｄ）的４种脱脂大豆料，配制成人工饲料饲养小蚕。收蚁后２４小时疏毛率分别为５２．１％、８８．０％、１００％和９８．５％；收蚁后第１０日体重分别为０．２０４、０．２４５、０．２７４和０．２０９克，第１０日的存活率、三眠与四龄起蚕占蚕百分率均以含Ｃ饲料为最高，分别为９６．１％和６８．８％，而以含Ａ饲料为最低，仅为５４．４％和３８．９％。结果说明小蚕饲料用大豆粉以精制程度适中的淡黄白色Ｃ为最好。Ａ经甲醇、乙醇或水抽提后，蚕的疏毛率、存活率和生长发育速度均得到显著改善，其３种抽提物均对小蚕的取食和生长发育有阻碍作用。     

角倍蚜Schlechtendalia chinensis(Bell)性蚜生物学的研究 Ⅱ、胚后发育和生殖方式

角倍蚜Schlechtendalia chnensis(Bell)在胚后发育过程中雄性蚜脱皮3次,雌性蚜脱皮4次。随虫龄增加,虫体缩短,呈负生长。雄性蚜胚后发商历期较雌性蚜短1～2天。雌性蚜仅具1个卵巢管,管内仅具1个卵。此卵于性母4龄时已形成,并在雌性蚜胚后发育中迅速生长。卵特大,几乎占性成熟雌性蚜胸腹部体腔的大部分,卵壳膜质化。卵受精后在雌性蚜体内进行胚胎发育,最后干母以若蚜形式被产出,为一种卵胎生。本文最后还讨论了雌性蚜生殖方式,并与性母的生殖方式进行了比较。     

EoSNPV egt基因的克隆和部分核苷酸序列的分析

以ＡｃＭＮＰＶ ｅｇｔ基因为探针,通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交和原位杂交,克隆了含ＥｏＳＮＰＶ ｅｇｔ基因的４．９５ｋｂ ＥｃｏＲ Ｉ－Ｋ片段,并进一步亚克隆了含完整ｅｇｔ基因编码区的１．８ｋｂ ＨｉｎｄⅢ－ＥｃｏＲＶ片段。应用双脱氧链终止法,测定了基因编码区中的Ｘｈｏ Ｉ－ＨｉｎｃⅡ片段４７１ｂｐ的核苷酸全序列,计算机分析表明,该片段编码的１５７个氨基酸序列与其它杆状病毒ｅｇｔ基因保守区的Ⅳ（部分）     

杆状病毒包涵体蛋白基因的进化

在分析了ＨａＳＮＰＶ和ＥｏＳＮＰＶ多角体蛋白基因核苷酸序列的基础上,通过ＭＡＬＩＧＮ程序,比较了目前已发表的２６种杆状病毒包涵体蛋白的序列,ＨａＳＮＰＶ与ＨｚＳＮＰＶ亲缘关系十分接近,两者ａａ序列同源性达９７．６％,ｎｔ序列同源性达９７．４％;ＥｏＳＮＰＶ与黄杉毒蛾核型多角体病毒（Ｏｐ－ＳＮＰＶ）的同源性为最高,ｎｔ序列的同源性为８３．０％,ａａ序列达９４．７％,与其它２０种鳞翅目ＮＰＶ的同源性也很高,ｎｔ序列同源性为７２．６％～８１．９％,ａａ序列为８３．７％～９３．９％;与ＧＶ的同源性较低,为４８．４％～５４．９％;而与锯叶蜂核型多角体病毒（ＮｓＳＮＰＶ）的同源性为最低,仅４４．９％。应用Ｃｌｕｓｔａｌ程序建立了一个包括了２６种包涵体蛋白的系统树,确定了新测定的ＥｏＳＮＰＶ和ＨａＳＮＰＶＰｈ在包涵体蛋白基因系统树中都属于ＮＰＶ中的ＧｒｏｕｐⅡ分枝。