应用间接免疫荧光法检测狂犬病病毒

取０．５ｍｌ兔ＢＨＫ－２１新鲜健康细胞液和０．１ｍｌ狂犬病病毒细胞液在含小飞片青瓶中混合，培养２４小时后制片，加抗狂犬病病毒兔抗体感作，用抗逸荧光抗体染色，通过荧光显微镜观察细胞浆内黄绿芭一病毒是否在细胞内增殖，从而建立了检测狂犬病病毒的间接免疫荧光法。     

狂犬病毒的分离鉴定及其抗体测定

据WHO于1981年通报,全世界有87个国家流行狂犬病,严重危害着人畜的健康.狂犬病毒能感染多种动物;犬、牛、羊、马、猪、蝙蝠等都易感.发展中国家的传染源主要是病犬,其次为猫和狼.在发达国家由于狗的狂犬病已被控制,本病主要由野生动物(如狐狸、食血蝙蝠、臭鼬和浣熊等)传播.此病原主要是由于咬伤及破损的皮肤而引起感染.但Helmick等认为,从理论上说,感染的病毒存在于患者的多种体液和组织中,这种人到人接触的非咬伤传播方式已在动物到人的传播中得到证实.狂犬病毒呈弹状形态,单股RNA、核衣壳螺旋对称,病毒蛋白主要由5种主要蛋白和两种微小蛋白构成,即包含:L蛋白,有凝集血球能力;糖蛋白,突起于病毒的表面,与病毒的致病性和防御感染能力有密切的关系;核蛋白(N蛋白)缠绕着核酸;膜蛋白(M_1,M_2)对狂犬病毒属显示特异性抗原反应 ;P_(40)、P_(43)这两种微小蛋白还未弄清其功能.     

基因表达水平与沙门氏菌感染关系的研究

 为了研究鸡TLR4（toll like receptor 4）基因表达在调控鸡沙门氏菌感染中的作用,80只3日龄SPF鸡按随机分为2组,处理组经口注射鸡白痢沙门氏菌悬液10⁸ CFU/mL 0.50 mL,对照组注射同剂量生理盐水。每个处理组分别在感染后1、3、7和14 d随机取8只鸡处死,迅速取脾脏样品用于RNA提取。采用SYBR GreenⅠ染料实时荧光定量PCR（QPCR）,比较处理组和对照组TLR4基因mRNA相对表达量的变化。结果显示,在4个时间点,与对照组相比,处理组TLR4基因高表达,差异显著(P<0.05);尤其在感染后3和7 d,差异达到极显著水平(P<0.01)。结果表明,鸡沙门氏菌感染后,TLR4基因mRNA表达上调,TLR4基因在沙门氏菌感染中发挥重要作用。