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本研究旨在获得高纯度巴泰病毒(Batai virus,BATV) G1蛋白强抗原性肽段,并建立一种用于检测BATV羊血清抗体的间接ELISA方法。首先对G1蛋白51个氨基酸编码的189-239位氨基酸强抗原肽段进行密码子优化,基因合成后构建重组表达质粒pET-32a-G1189aa-239aa,转化大肠杆菌BL21感受态细胞进行诱导表达。优化表达条件获得大量rHis-G1189aa-239aa肽段,利用镍柱亲和层析方法进行纯化,并用BCA试剂盒进行蛋白浓度的测定。通过Western blotting对rHis-G1189aa-239aa肽段进行抗原特异性分析,以rHis-G1189aa-239aa肽段为抗原,羊BATV阳性血清作为抗体,通过方阵滴定优化反应条件,建立BATV间接ELISA检测方法。SDS-PAGE结果显示,rHis-G1189aa-239aa肽段在大肠杆菌中主要以包涵体形式存在,分子质量为24.5 ku,在0.1 mmol/L的IPTG诱导5 h后rHis-G1189aa-239aa肽段表达量达到峰值。通过镍柱亲和层析纯化后,测得蛋白浓度为0.296 mg/mL。Western blotting结果显示,rHis-G1189aa-239aa肽段特异性较好。以rHis-G1189aa-239aa肽段为抗原建立的间接ELISA方法,通过条件优化确定最佳抗原包被浓度为2.5 μg/mL,血清和二抗稀释度为1∶60和1∶10 000。样品D450 nm值≥0.367为阳性,D450 nm值≤0.319为阴性。该方法与山羊痘病毒和布鲁氏杆菌的阳性血清均无交叉反应,批内和批间的变异系数均<10%,阳性血清最高可稀释至1 600倍,该方法具有特异性强、灵敏性高和重复性好的特点。利用本方法对云南地区的120份羊血清样本进行检测,血清阳性率为21.67%。本研究获得了特异性强和纯度较高的rHis-G1189aa-239aa肽段,建立了间接ELISA方法,可应用于羊BATV血清流行病学调查,为疫病防控及致病机制研究奠定基础。 相似文献
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近年来,在政策和市场的共同推动下,我国休闲农业蓬勃发展,吸引了许多返乡创业者的目光。本次访谈的主人公朱增淋就是其中之一。在有着山水秘境、世外桃源之称的万载县绍江村,锦江穿村而过,一民种养专业合作社就坐落在这里。该合作社理事长朱增淋为了实现自己儿时的梦想,毅然决然地将自己在浙江义乌经营多年的一家铜饰品配件厂迁回万载,游子归乡,农业创业就此开始。本期,让我们一起倾听朱增淋的创业故事吧! 相似文献
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介绍森林截留降雨模型中较常见的Gash模型、Rutter模型和经验模型,并对几种模型的优缺点进行评述。由于地表森林类型的变异性以及截留对比性研究的缺乏,为空间上的大尺度研究带来困难。森林结构特征、降雨特征和气象因素的时空变异性以及对截留机理认识的不够深入,引起模型参数不确定性问题。因此,针对截留区域多样化研究和模型参数不确定性因素研究是目前森林截留研究的重点。此外,研究区域由点向面的拓展和建立能全面反映截留过程机理的物理性模型是森林截留降雨研究发展的重要方向。 相似文献
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【目的】通过研究四川盆地丘陵区红棕紫泥土壤细菌群落结构,从而了解区域土壤健康状况、发挥土壤潜在肥力和提升区域农林产品质量。【方法】本文以四川资阳土壤保护站坡耕地的红棕紫泥土为研究对象,利用16S扩增子高通量测序技术获取其土壤细菌群落结构特征。【结果】检测到的土壤细菌种类占所有分类物种的11.39%,Chao指数和Simpson多样性指数分别为2738.54种和0.99。所有样品中都检测到序列分属于25个细菌的大类,且以变形菌门细菌为第一优势菌群,其下β-变形菌纲、γ-变形菌纲、α-变形菌纲和δ-变形菌纲细菌的相对丰度分别为17.29%、13.16%、11.92%和6.86%。其次,酸杆菌门和拟杆菌门细菌为第二优势菌群,其相对丰度分别为11.55%和10.87%。【结论】红棕紫泥土土壤细菌种类复杂、多样,且优势类群明显。 相似文献
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正江西省修水县,一座被绿水捧在手心、被青山揽入怀抱的小城。这里不仅有着12万株珍贵的南方红豆杉,还有着被称为"修水一枝花"的分宁皇菊。2018年8月,本刊记者一行驱车来到这座"开门见绿、满眼入画"的小城,对种植、培育"修水一枝花"的九江市尚农农业开发有限公司总经理黄金进行了采访。黄金告诉记者,修水古称"分 相似文献
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多孔介质物料热风干燥广泛应用于工业干燥各个领域。孔道网络模型干燥理论是一种完全离散化的方法,能建立多孔介质微观结构特征与宏观传递现象之间的联系。常用的孔道网络模型包括二维规则孔道网络模型、二维分形孔道网络模型和非固结双尺度孔道网络模型等。但是对于孔道网络模型的研究,目前还存在人工构造多孔介质网络的困难,模型参数还不能准确描述实际多孔介质物料以及研究结果不能完全反映自然多孔介质干燥过程等问题。今后应进一步探索网络构建新方法,在模型构建中考虑更多的多孔介质物料特性,以期更准确地描述自然多孔介质实际的干燥过程。 相似文献
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