牛乳腺炎无乳链球菌Pgk基因抗原优势区原核表达产物的抗原性分析

为了探索牛乳腺炎无乳链球菌磷酸甘油酸激酶（Phosphoglycerate kinase,Pgk）基因编码蛋白的抗原性,根据GenBank公布的牛源无乳链球菌Pgk基因序列,设计并合成一对引物,通过PCR扩增出Pgk蛋白抗原优势区的编码序列,并对其进行克隆、测序、转化、诱导表达及抗原性鉴定。结果显示克隆的Pgk基因序列含有984 bp,编码328个氨基酸残基。临床分离株与GenBank上公布的B群无乳链球菌菌株Pgk基因（AE009948）核苷酸序列同源性为99.09%,氨基酸序列同源性为99.69%。将扩增的Pgk基因片段克隆至原核表达载体pET30a（＋）中,构建重组表达载体Pgk-pET30a（＋）,再将筛选的阳性重组质粒转化至BL21工程菌,经IPTG诱导获得部分可溶性表达Pgk重组蛋白。经Ni2＋亲和层析柱纯化得到纯度在90%以上的蛋白,经Western blot分析结果表明,重组蛋白具有良好的抗原性,为进一步探索其对奶牛的免疫原性研究奠定了良好的实验基础。     

水稻施用植物生长促进菌效果初探

通过田间试验,对一种植物生长促进菌在水稻上的应用效果作了初步探讨。试验结果表明,PGPR制剂与化肥配合施用对水稻生长发育产生了显著的影响。与单施氮、磷、钾化肥相比,PGPR与化肥处理显著提高了水稻的株高、穗数、穗粒数、千粒重,比单施化肥和不施肥对照分别增产26.0%和53.9%。同时,PGPR处理提高了水稻的根系活力,并对灌浆速率产生了积极的影响。     

水稻施用植物生长促进菌效果初探

通过田间试验，对一种植物生长促进菌在水稻上的应用效果作了初步探讨。试验结果表明，PGPR制剂与化肥配合施用对水稻生长发育产生了显著的影响。与单施氮、磷、钾化肥相比，PGPR与化肥处理显著提高了水稻的株高、穗数、穗粒数、千粒重，比单施化肥和不施肥对照分别增产26.0%和53.9%。同时，PGPR处理提高了水稻的根系活力，并对灌浆速率产生了积极的影响。     

基层农业技术推广存在的问题及应对建议

从基层农技工作者的视角,分析在农业技术推广过程中存在的问题,提出加大科技投入、加快土地流转、科研与生产紧密联结和培养专业人才等促进农业技术推广的对策建议。     

牛乳中无乳链球菌PCR快速检测方法的建立

目前,国内外对无乳链球菌的检测方法已有一定的研究基础,但多数是基于无乳链球菌rRNA操纵元件16S～23S rDNA间隔区序列而建立的方法.以表面免疫相关蛋白(surface immunogenic protein,SIP)基因为检测序列的PCR方法尚未见报道.     

哲里木地区三年定点屠宰检验的分析及对策

笔者分析、总结了内蒙古哲盟地区近三年的定点屠宰检疫情况,找出了本地区屠宰检疫所检出疫病的基本特点和规律,为本地区屠畜检疫工作,乃至畜禽产地的疫病防治工作提供了可靠的方向和依据,并提出了科学的对策措施。1检疫情况1．1检疫方法主要采用宰前检疫、宰后检疫（感官检验、病理解剖学检验、病理组织学检验、病原学检验）1．2屠宰猪检疫情况近三年共屠宰83312头,检验合格的有73099头（占87.7％）,猪囊虫病的检出有9896头（占11．88％）,根据其感染强度分别进行了冷冻、高温、炼制食用油、炼制工业油处理。其次为猪丹毒13头（占0．…     

内蒙古东部部分地区鸡大肠杆菌病的检验

鸡大肠杆菌病对鸡胚及不同年龄的鸡均有不同程度的危害,但以雏鸡感染的多,并且往往造成大批死亡,一周内雏鸡多发生脐炎,是急性经过;四周龄以上的鸡多呈慢性经过。由于耐药菌株的增加,近年来该病表现出明显的回升势头,因此,通过系统检验,了解该病在不同年龄及不同品种鸡群内发生的规律,对于有效地控制该病具有重要的实际意义。历经4年多的诊断、检验,初步了解到内蒙古东部部分盟、币。旗鸡群内大肠杆菌病的特点及病原的主要血清型．现报告如下：l材料与方法1．l病鸡来自发病鸡场。共计IOgO只,其中依莎褐290只、迪卡贝42O只。黄…     

牛源无乳链球菌sip蛋白抗原优势区的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立

为测定牛源无乳链球菌表面免疫相关蛋白(sip)的抗原性,本实验通过建立间接ELISA方法,对该蛋白的抗原性进行分析及鉴定.根据无乳链球菌sip基因序列,设计一对引物,以临床分离菌株基因组DNA为模板,PCR扩增sip抗原表位优势区编码的基因序列,并将其与原核表达载体pET-30a(+)连接,构建重组质粒pET-sip,转化宿主茵BL21中,经IPTG诱导,获得重组蛋白,western blot分析表明,重组蛋白具有良好的抗原性.以纯化的表达产物作为包被抗原,建立检测无乳链球菌抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为3.125μg/mL,血清最佳稀释度为1:160,酶标二抗最适稀释度为1:4000.应用该方法对无乳链球菌、化脓性链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌兔阳性血清进行检测,结果表明,该方法具有良好的特异性和灵敏度.     

六合区马鞍街道发展都市生态农业的对策思考

六合区马鞍街道地处南京市六合区北部,生态环境较好,适宜发展生态农业。文中阐述马鞍街道都市生态农业发展现状,分析存在着认知度不高、机制不全和劳动力素质低等制约因素,提出下一步发展都市生态农业对策和建议。     

GPV野毒株鉴定及其致病力试验

在送检的小鹅瘟病料中分离到1株病毒,经NS1基因特异性引物扩增后确定是GPV。用该对引物对从鹅细小病毒野毒感染的病鹅分离的GPV野毒株进行PCR检测,结果该结引物能特异性地扩增出与预期片段大小相符的1.9kb片段。回归试验结果表明,该GPV野毒株的感染潜伏期为8天,病程为1-3天,致死率达100%;对雏鹅半数致死量LD50为3.4。