种子耐脱水性的生理及分子机制研究进展

耐脱水性是指生物体或组织在丧失所有或几乎所有细胞水分的状态下而不产生不可逆损伤的存活能力.种子的耐脱水性是植物在长期进化过程中保证物种生存和繁衍的适应性机制,在植物种子(质)资源保存中起关键作用.种子的耐脱水性是一个复杂的性状,其分子机理至今尚不清楚.为此,本文综述了种子耐脱水性的生理及分子机制的研究进展.研究发现,正...     

猪传染性胃肠炎病毒非结构蛋白3a和3b融合表达及对细胞周期的影响

【目的】克隆及真核表达猪传染性胃肠炎病毒（transmissible gastroenteritis virus ,TGEV）陕西分离株的3a和3b基因,研究表达蛋白在细胞中的分布及其对细胞周期的影响。【方法】利用软件Primer 5.0参照Genbank公布的序列设计两对分别针对TGEV非结构蛋白基因3a和3b的特异性引物。采用RT-PCR方法从TGEV 陕西分离株克隆3a和3b基因,再将其与真核表达载体pEGFP-N1连接,构建真核表达质粒p3a-EGFP-N1和p3b-EGFP-N1。利用脂质体转染法将重组质粒转染猪小肠黏膜上皮细胞（intestinal epithelial cells,IEC）,采用激光共聚焦显微镜检测转染细胞内融合蛋白的表达分布情况。通过RT-PCR检测细胞中目的基因的转录情况,Western blotting检测细胞中融合蛋白的表达情况。利用流式细胞仪检测表达蛋白对细胞周期的影响,采用实时荧光定量PCR检测融合蛋白的表达对内质网应激蛋白标志性分子GRP78和细胞周期蛋白Cyclin A的表达的影响,通过Western blotting试验检测细胞中蛋白表达后GRP78、Cyclin A和Cyclin B1表达量的变化情况。【结果】成功克隆出完整的TGEV陕西分离株的3a及3b基因,经过测序鉴定,3a基因的大小为213bp,3b基因的大小为732bp;经过与不同来源的TGEV毒株进行对比分析,3a基因的核苷酸序列与其他毒株同源性为97.4%-100%,氨基酸同源性为98.6%-100%;3b基因的核苷酸序列与其他毒株同源性为98.3%-99.9%,氨基酸同源性为100%。重组表达载体转染IEC细胞后,经Western blotting分析IEC分别表达出分子质量约为35kD的3a-GFP和54kD的3b-GFP的融合蛋白,与预期结果相一致。激光共聚焦显微镜观察到融合蛋白3a-GFP和3b-GFP在IEC细胞的细胞核和细胞质中均有表达,流式细胞仪分析TGEV非结构蛋白3b的表达能够使G2/M期的细胞增多,实时荧光定量PCR分析显示细胞周期蛋白Cyclin A的mRNA水平高于对照组细胞（IEC和IEC-GFP）,同时Western blotting分析结果显示表达3b蛋白的细胞中Cyclin A 蛋白水平表达量高于对照组,并且Cyclin B1的表达量低于对照组细胞,差异显著;TGEV非结构蛋白3a对细胞周期没有影响。实时荧光定量PCR分析结果显示,表达TGEV非结构蛋白3a的细胞中GRP78的mRNA水平高于对照组, Western blotting分析GRP78的蛋白水平高于对照组,差异显著,说明非结构蛋白3a可以使GRP78表达水平的上调;TGEV非结构蛋白3b对GRP78的表达没有影响。【结论】TGEV陕西株的非结构蛋白3a和3b在IEC细胞中成功表达,3a蛋白可以引起细胞内质网应激反应,3b蛋白通过使细胞周期蛋白Cyclin A表达上调并且使Cyclin B1表达下调引起细胞周期阻滞于G2/M期。     

气吸式精量播种机常见故障及排除

一、排种量不稳定1.排种量不稳定的原因吸气管路有破损,如漏洞、接头连接松动、裂纹等使气压下降,气吸力减小,种子没吸住致使一部分或全部漏播。主要表现为个别垄行播量减少,或漏播。     

大豆新品种商豆1201的高产稳产性及适应性研究

[目的]选育出高产、稳产、优质、多抗、适应性强的大豆新品种。[方法]依据2012年河南省大豆区域预备试验结果,采用通用高产稳产性参数估算、高稳系数法和回归系数法对商豆1201的高产稳产性及适应性进行了分析,同时对商豆1201的特征特性、品质及抗性鉴定进行了阐述。[结果]商豆1201具有较好的高产性和稳产性,是一个比较理想的高产稳产大豆新品种,且属于优良环境特殊适应性品种。[结论]该研究为商豆1201在生产上大面积推广提供理论依据。     

奉贤非洲菊设施栽培土壤盐分累积变化规律研究

通过对奉贤非洲菊栽培现状的野外调查和取样分析,研究了设施栽培条件下土壤盐分的累积及离子组成变化特点。结果表明：设施栽培条件下,土壤出现酸化和次生盐渍化趋势,土壤的酸化主要和NO3-的累积有关;除HCO3^-、k^＋外,Cl^-、SO4^2-、NO3-,Na^＋、Mg^2＋、Ca^2＋均有不同程度的累积,且这六种离子间的相关性较好;土壤中盐分阴离子以NO3^-为主,阳离子以Ca^2＋为主,对全盐量与各种离子做逐步回归．得到模型：y（全盐量）=0．291＋5．295Ca^2＋2．177NO3^-,且差异极显著。     

滇牡丹种群与生态环境现状的调查研究

为了更好地了解滇牡丹的种群与生态环境现状,选择了6个滇牡丹天然分布区,对滇牡丹的生态环境、生长情况及群落结构进行调查.结果表明:滇牡丹生态环境复杂,6个样地内有关滇牡丹的分布格局、人为干扰程度、滇牡丹的数量与年龄结构及覆盖程度均有较大差异;18个样方内共发现69种植物,分属于31科45属,科属的组成比较分散;适度的人为干扰有利于滇牡丹的生长与繁殖,但严重的人为干扰会使滇牡丹的一些天然种群消失.     

石刁柏离体发根技术的研究

<正> 石刁柏(Asparagus officinalis L.)又名芦笋,为百合科天门冬属多年生宿根草本植物,其嫩茎含有天门冬酰胺、甾体皂甙、组蛋白等多种营养成份。因其对控制癌细胞的扩散,治疗高血压、结石等病症有良好效果,而引起人们的高度重视。世界上种植芦笋较多的有西班牙、法国、美国、日本等国,在欧美市场上,芦笋的消费量仅次于番茄、马铃薯和甘蓝,常处于供不应求的状态。天津市种植面积在2万亩以上,采下的     

大母猪子宫角全切除去势

大母猪子宫角全切除去势纪根华于天元张琪陈丽萍（黑龙江省克东县畜牧局·１６４８００）笔者在多年临床实践中，应用子宫角全切除的方法，去势大母猪１００余例，认为此方法简便，安全可靠，准确无误，无后遗症及死亡，取得满意效果。１术前准备保定：采取左或右侧卧保定...     

犬巨幼红细胞性贫血的诊疗

随着人们生活水平的提高，宠物热的出现，犬作为一种宠物，已进入了部分市民的家中。但由于一些人对犬的饲养知识了解较少，饲喉的饲料比较单一，多以肉、肠等高蛋白熟食为主，缺少青绿饲料，常导致微生素特别是B族微生素（如VB12）、叶酸等的缺乏，而引起巨幼性贫血。本文就一例京巴犬的巨幼性贫血诊断治疗的体会介绍如下：1临床症状病犬品种为京巴犬，8月龄，体重3kg。临床症状表现为营养不良，体质瘦弱，腹部卷缩，被毛粗乱，精神不振，食欲减退，后期拒食。可视粘膜苍白，心跳加快（130—150次／分），呼吸短促（50次／分）。2血液学…