莱芜市畜牧业可持续发展的调研报告

2005～2010年莱芜市畜牧兽医局联合当地科技部门组织科技人员深入龙头企业、畜牧养殖专业合作社、标准化养殖场、散养户及基层畜牧兽医部门,对莱芜市畜牧业发展现状进行充分调研,在调研的基础上提出了莱芜市畜牧业可持续发展的思路,并对发展目标、区域布局优化及行业布局调整、重点任务、关键技术、重点工程、保障措施等给予系统的阐述,为莱芜市构架了切实可行的畜牧业的可持续发展之路,也为我国其他地方畜牧业的可持续发展提供参考.     

新牛蛙活性肽Catesbeianin-1a的抗菌抗肿瘤作用

通过筛选牛蛙皮肤cDNA文库得到具有较强抗菌抗肿瘤活性肽Catesbeianin-1a,合成其成熟肽氨基酸序列,MIC法测定抑菌活性结果表明,Catesbeianin-1a对临床常见的致病菌具有较强的抑菌活性,其中对猪链球菌2型的MIC为2.5mg/L,且对兔红细胞几乎无溶血性。MTT法测定多肽抗肿瘤细胞活性,结果 Catesbeianin-1a对胃癌细胞和肝癌细胞的抑杀活性很强,对肝癌细胞SGC7901的IC50为0.845mg/L。制作透射电镜超薄切片,利用透射电镜观察活性肽对细菌和肿瘤细胞超微结构的影响,旨在初步探讨牛蛙皮肤活性肽Catesbeianin-1a抗菌、抗肿瘤的作用机制,并以Catesbeianin-1a为基础进行分子改造来提高其抗肿瘤的靶向性并降低其毒性。     

瓜类褪绿黄化病毒p22 基因在大肠杆菌中的表达及抗血清的制备

 以被瓜类褪绿黄化病毒（Cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV）侵染的甜瓜叶片为供试材 料,采用RT-PCR 方法克隆其P22 蛋白基因,并将其连接到原核表达载体pGex-4T-3 上,PCR 验证及克隆 测序确定开放阅读框的正确性。将重组载体pGexp22 转化大肠杆菌BL21 菌株,诱导表达,SDS-PAGE 分 析表明,经IPTG 诱导,p22 基因在大肠杆菌BL21 中得到了高效表达。以表达的蛋白作为抗原,免疫家 兔,制备了CCYV P22 的特异性抗血清。ACP-ELISA 检测结果表明,血清效价高达1.28 × 10⁵。Western blot 检测甜瓜叶片,结果表明抗血清能够特异性地检测CCYV 侵染的甜瓜叶片中的CCYV P22 蛋白。     

牛产气荚膜梭菌分离株毒素基因的检测与分析

为了解黑龙江省牛源产气荚膜梭菌分离株的基因型,检测β2和CPE两种次要毒素因子在牛源产气荚膜梭菌分离株中的携带情况。通过PCR方法检测了产气荚膜梭菌13个野毒株的cpa、cpb、etx、itx四种分型毒素、cpb2、cpb2的两个等位基因突变体(atypical cpb2和consensus cpb2)及肠毒素(cpe)基因。结果表明:92.3%(12/13)的产气荚膜梭菌分离株为A型,检测到1株D型;A型菌中β2毒素基因检出率为66.7%(8/12);β2毒素基因阳性菌株中75%(6/8)携带非典型cpb2基因,50%(4/8)携带典型cpb2基因,非典型突变体占优势。动物致病性试验发现β2毒素阳性菌株(8株)与β2毒素基因阴性菌株(4株)各有2株分离株具有致病性。所有菌株CPE毒素基因PCR检测均为阴性。研究为产气荚膜梭菌病的发病机理和疫苗开发提供了理论依据。     

牦牛小脑不同区域神经营养素-4及其受体的表达特征与定位研究

神经营养素-4(NT-4)及其神经营养性酪氨酸激酶受体2(NTRK2)在小脑神经元存活、生长以及功能方面发挥着重要作用。为探讨NT-4和NTRK2在牦牛高原低氧适应中的作用,本研究以高原牦牛（Bos grunniens）和平原黄牛（Bos taurus）小脑为研究对象,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹技术（WB）、苏木精-伊红染色（HE）和免疫组织化学（IHC）对NT-4和NTRK2在牦牛与黄牛小脑不同区域中的表达分布进行分析。qRT-PCR和WB结果表明,NT-4基因和蛋白在牦牛小脑半球皮质中表达量最高,显著高于其他组织（P<0.05）;NTRK2基因和蛋白在牦牛小脑蚓部皮质中表达量最高,显著高于其他组织（P<0.05）。与黄牛相比,牦牛NT-4蛋白在小脑各区域中的表达均显著高于黄牛（P<0.05）;牦牛NTRK2蛋白在蚓部髓质和小脑半球髓质中的表达量低于黄牛或无差异,其余区域均显著高于黄牛（P<0.05）。IHC结果显示,NT-4和NTRK2蛋白阳性表达特征基本一致,皮质区主要分布于分子层的篮状细胞、浦肯野细胞层以及颗粒细胞层,而髓质区...     

适于双向电泳分析的大豆花瓣采样方法

大豆花器小,花瓣中蛋白含量低,花瓣采集是大豆花型发育蛋白质组学研究首先要解决的难题.大豆开花期一般持续大约为30d,花瓣采集不仅需要选择恰当的时期、掌握正确的方法,还需要一定的实践经验和技巧.本研究确定了不同发育阶段的大豆花瓣采集标准;明确了采集用于蛋白质组双向电泳分析的不同发育阶段大豆花瓣所需的工作量;建立了1mm花苞大豆花瓣的采集方法.为大豆花型发育蛋白质组双向电泳分析提供了有效的样品采集方法.     

松材线虫病的疫木除治及综合防治方法

<正>1松材线虫病基本情况松材线虫病又称松树萎蔫病,被称为松树的癌症,是松树的一种毁灭性流行病。松材线虫体长约1毫米,肉眼不易看到,通过松褐天牛等媒介昆虫侵入松树,破坏、堵塞松树疏导组织,具有传播途径多、发病部位隐蔽、发病速度块、潜伏时间长、治理难度大等特点。远距离传播主要依靠带有松材线虫病的松木木材及其制品传播,近距离传播主要依靠媒介昆虫松褐天牛等传播。松材线虫病发生后,最短40天左右就能导致整株松树失水死亡,如不采取有效措施防治,3～5年即可造成整片松林毁灭,带来的经济和生态损失巨大,其防治工作是世界性难题,对松林资源构成严重威胁。     

结核分枝杆菌RD1区T细胞表位分布情况预测及分析

[目的]对结核分枝杆菌RD1区T细胞表位分布情况进行预测和分析。[方法]利用NetMHC server生物信息学软件,以和HLA-Ⅱ和HLAⅠ-类分子结合能力为指标,分别对结核分枝杆菌RD1区9个编码蛋白进行T细胞抗原表位预测。[结果]通过预测,共获得和HLA-Ⅱ类分子结合的抗原表位1 580个和HLA-Ⅰ类分子结合的抗原表位336个。[结论]预测获得的T细胞抗原表位将对结核病特异性检测及新的结核疫苗研发起到借鉴作用。