山羊转人乳铁蛋白基因成纤维细胞和乳腺上皮细胞单克隆的制备及扩大培养

[目的]为探索单个转基因阳性细胞快速扩大培养成为细胞克隆的技术体系。[方法]对转染人乳铁蛋白(Human lactoferrin,hLF)基因乳腺特异性表达载体pBLM-C1的单个山羊胎儿成纤维细胞(Fetal Fibroblasts,FF)和乳腺上皮细胞(Mammary Gland Epithelial,MGE)细胞进行克隆。在96孔板中,首先用3种浓度(V/V:0、50%和100%)的适应性条件培养基对单个转染细胞进行细胞单克隆的制备,进而把转染细胞单克隆与非转染细胞共培养进行扩大培养,neo基因被用于筛选基因,以PCR方法鉴定转染细胞基因组DNA。并对单克隆细胞进行染色体核型分析。[结果]与非适应性条件培养基相比,100%适应性条件培养基能够显著提高细胞单克隆存活率;与对照相比,转染细胞单克隆与非转染细胞共培养,显著提高了转染细胞单克隆扩大培养后的比率(FF:53.33%vs.10.00%;MGE:33.33%vs.6.670%),且明显缩短了扩大培养汇合时间(20～30 d);PCR鉴定结果表明,上述方法获得的克隆细胞整合有hLF目的基因;核型分析表明,大部分细胞克隆染色体正常。[结论]该研究可为分离转基因细胞、理想载体的插入及诊断提供一种可靠的方法,并能节省转基因动物生产的及费用时间。     

叶面喷施锰肥对番茄果实品质的影响

以樱桃番茄品种金珠为材料,采用大棚土壤栽培的方法进行小区试验,研究在果实膨大期开始叶面喷施不同浓度的锰肥(硫酸锰)对完熟期番茄果实品质的影响.结果表明:适宜浓度的锰叶面喷施能提高番茄果实番茄红素、可溶性糖、维生素C含量并且可以改善糖酸比;而较高浓度的锰叶面喷施可对上述指标起到抑制作用.     

全膜面覆土式马铃薯播种联合作业机设计与试验

为实现马铃薯大垄双行膜上覆土自然破膜出苗机械化栽培,设计了一种可实现施肥、播种、起垄、覆膜和全膜面覆土一体化作业的全膜面覆土式马铃薯播种联合作业机。对样机关键部件进行了设计,确定其排肥系统、链勺式排种系统工作参数,同时分析了提土-膜面覆土装置作业过程,得到满足膜顶覆土厚度的必要作业条件。田间试验结果表明,当作业速度为1.8~2.0 km/h时,重种指数为4.9%,漏种指数为6.6%,种植深度合格率为95.2%,种薯间距合格指数为90.1%,膜顶覆土厚度合格率为98.8%,各行排肥量一致性变异系数为6.5%,总排肥量稳定性变异系数为5.1%,试验指标均符合国家和行业标准要求,试验结果满足设计和实际作业要求。     

不同黄瓜品种对枯萎病、白粉病及霜霉病的抗性鉴定

选用13份黄瓜品种为试验材料,通过单一接种和复合接种2种方法,评价了不同黄瓜品种对枯萎病、白粉病及霜霉病的抗性特征.在单一接种条件下,7份品种抗枯萎病,7份抗白粉病,5份抗霜霉病;在复合接种条件下,沪杂6号和日本秋绿对枯萎病、霜霉病和白粉病都表现抗性,8813和辽研白峰兼抗枯萎病和白粉病.     

提土-全膜面覆土装置作业参数优化与试验

为进一步研究提土-全膜面覆土装置作业参数对其覆土性能及质量的影响,解析膜顶覆土过程与规律,建立了提土-覆土过程关键参数方程,确定了试验因素及其取值范围。以刮板升运带式提土器线速度、联合机前进速度和水平双向螺旋覆土装置转速为自变量,覆土合格率为响应值,进行二次旋转正交组合试验,构建各因素与覆土合格率之间的数学模型,并结合响应曲面对各因素交互作用进行分析,探知试验因素对覆土合格率影响的主次顺序为水平双向螺旋覆土装置转速、刮板升运带式提土器线速度和联合机前进速度,获得提土-全膜面覆土装置最优作业参数:水平双向螺旋覆土装置转速为432 r/min,刮板升运带式提土器线速度为1.56 m/s,联合机前进速度为0.50 m/s。田间验证试验表明,提土-全膜面覆土装置覆土合格率均值为99.6%,较优化前有显著提升;应用离散单元法进行提土-全膜面覆土装置在最优参数条件下的"提土-输土-覆土"动态作业过程模拟,仿真结果与田间试验验证工况基本一致,表明该装置作业参数的优化计算准确可靠。     

涡轮反应器气固两相流动反应CFD模型建立

在气固两相湍流流动模型和反应动力学模型的基础上,系统地考虑两相流动、传热、传质、反应等复杂因素,建立了涡轮反应器三维气固两相流动反应模型,形成了相应的数值解法,并以此对工业涡轮反应器进行了数值模拟研究,展示其内部流动、传热、传质及反应等细节.     

人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体的构建及转染研究

构建了携带人乳铁蛋白(LTF)基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因的乳腺特异性表达载体(pEBL),用脂质体法转染泌乳期莎能奶山羊乳腺上皮细胞,转染后于荧光显微镜下观察GFP表达情况。用G 418对转染细胞进行筛选,获得抗性细胞克隆,并对转染细胞进行PCR检测。结果显示,pEBL构建成功,转染6 h后可观察到细胞有GFP表达,PCR检测阳性克隆细胞转有LTF基因。表明pEBL载体已转染山羊乳腺上皮细胞,为进一步建立转基因动物乳腺生物反应器奠定了基础。     

蓝藻沼液对小白菜产量、品质影响初探

随着富营养化加重,太湖有70％左右的水体处于富营养状态,常常发生以铜绿微囊藻（Microcystis aeruginosa）为优势种群的水华。蓝藻水华产生的毒素是细胞内毒素,当细胞腐败死亡后,毒素释放到水中,直接影响了水体的质量和利用,并危害着水生动、植物的生长、牲畜和人类的健康。因此,不及时将这些蓝藻水华从湖水中取出并进行处置,将会造成更严重的污染危害。     

秋茬青梗小白菜品种（系）比较试验

以上海青、华冠2个品种为对照,对6个青梗小白菜新品种（系）进行比较,选出产量、品质、抗病性等综合性状优良的新品种（系）。试验结果表明,T5×T6和白叶C×四月慢22—5是综合性状优良的青梗小白菜新品种（系）,适合苏州及周边地区秋茬栽培,但T5×T6需注意防治霜霉病。     

2012年秋季菜心品比试验初报

针对太湖地区缺少菜心优良品种的现状,对引进或自主选育出的6个菜心新品种(系)进行了田间品种比较试验,结果初选出"油绿粗苔"、"油绿501"、"08Z144"3个菜心品种在产量、商品性等方面表现较好,具有一定的优势,可进入下一轮试验做进一步观察。