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11.
小叶满江红内生细菌多样性的PCR—DGGE及电子显微镜分析 总被引:3,自引:0,他引:3
用16SrDNA-PCR-DGGE技术、电子显微镜和平板培养的方法系统地揭示了小叶满江红(Azolla microphylla)中内生细菌的遗传多样性和表型多样性.16S rDNA-PCR-DGGE的指纹图谱分析表明.在小叶满江红-蓝藻共生体内存在一个以蜡质芽胞杆菌(Bacillus cereus)为优势种群的复杂、多样的细菌区系;内生细菌在体内呈现各异的超微结构特征,体外培养生成不同大小、形态和色素的菌落.应用16S rDNA-PCR-DGGE技术能较全面地揭示满江红内生细菌的遗传多样性. 相似文献
12.
13.
苏云金芽胞杆菌BRC-HZP7杀虫晶体蛋白多样性分析 总被引:1,自引:1,他引:0
分离自武夷山土壤的苏云金芽胞杆菌BRC-HZP7菌株对小菜蛾和甜菜夜蛾幼虫有较好的毒杀作用.对该菌株进行了生理生化测定、cry基因的PCR-RFLP检测,以及通过SDS-PAGE检测晶体蛋白,并对蛋白点进行肽段指纹图谱鉴定.结果表明该菌株含有cry1Aa、cry1 Ba、cry1 Ia、cry2Ab、cry2Ac、cr... 相似文献
14.
以武夷山和福州森林公园采集获得的30份新鲜水样为材料,分离获得5株苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis,简称Bt)野生菌株.为了解这些新菌株的生物学特性,进行了形态学、生理生化、杀虫晶体蛋白等研究,并对白纹伊蚊(A edes albopictus)和棉铃虫(Helicoverpa armigera)两类靶标昆虫进行毒力测定,结果显示LLW1对白纹伊蚊有较高的杀虫活性,其较正死亡率可达95.5%.经PCR扩增,发现该菌株含有cty2基因.但这5个野生菌株对棉铃虫均无活性. 相似文献
15.
BRC-ZLL4是一株从鱼尾葵(Cargota mitis Lour)上分离到的,对柑橘凤蝶幼虫具有毒性的苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)菌株。本试验采用PCR-RFLP技术鉴定该菌株中含有cry1Ib基因。设计一对特异引物,分别引入SalⅠ和BamHⅠ酶切位点,以BRC-ZLL4的总DNA为模板,扩增cry1Ib全长基因。生物信息学分析表明,该基因全长2160bp,编码一个由719个氨基酸组成的、相对分子质量为81.39ku、等电点为6.425的蛋白。该基因已在GenBank上登录(登录号为EU233027),并被Btδ-内毒素国际命名委员会正式命名为cry1Ib2。信号肽预测显示,Cry1Ib2蛋白没有信号肽,为胞内蛋白。二级结构预测显示,在Cry1Ib2蛋白二级结构中,25%为α-螺旋,28%为β-片层,18%为β-转角,29%为无规则线圈。此外还对Cry1Ib蛋白的功能区和三级结构进行了预测和分析。 相似文献
16.
污水、污泥中苏云金杆菌的分离及其基因型鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
从40个样品中分离到112株芽孢菌,其中有2株为Bt,占1.8%;从城市污水和啤酒厂生物处理系统中分别分离到1株Bt:采用cry1-cry11、cyt、vip3A、aiiA和inhA引物对BRC-WLY1和BRC-WLY2进行PCR扩增,发现2株Bt含有cry1(cry1Ag、cry1Ba、cry1Gb、cry1La)、cry2Ac、vip3A、aiiA杀虫基因,其中BRC-WLY1还含有inhA基因. 相似文献
17.
18.
本研究分离并提纯苏云金芽胞杆菌8010菌株的质粒DNA,经BamHI/PstI双酶解后与DIG标记的cryI基因EcoRI-F片段的RNA探针杂交,显示出分子量分别为6.56kb和4.4kb的阳性片段。用Blassmilk回收4.4kb的阳性片段并与双功能载体pRIT5重组,转化感受态大肠杆菌TG1细胞,通过斑点杂交和快检获得含4.4kb片段的克隆株T2,SDS-PAGE电泳表明它表达了130kD 相似文献
19.
营养期杀虫蛋白(vegetative insectcidal protein,Vip)是由苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)在营养生长指数中期至稳定期期间分泌产生的一类新型杀虫因子,分为Vip1、Vip2和Vip3三种,以Vip3的研究最为深入。Vip3A对鳞翅目(Lepidoptera)害虫具有广谱杀虫活性,具有重要研究意义。本研究以Bt WB5菌株总DNA为模板,采用PCR方法扩增vip3Aa(Gen Bank登录号:AAM22456)全长,将该片段纯化回收后与p MD18-T连接并转入大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,进行酶切验证和序列测定。将vip3Aa基因片段与经同样酶切的表达载体p Czn1连接,构建重组表达载体p Czn1-vip3Aa,转入大肠杆菌Arctic ExpressTM(DE3),异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)进行诱导表达。SDS-PAGE结果表明,在沉淀和上清中均有约88 k D VIP3Aa蛋白质表达产物;采用Ni亲和树脂对上清中的VIP3Aa融合表达蛋白进行了纯化,获得了纯化蛋白。本研究成功亚克隆了vip3Aa基因,并表达纯化了VIP3Aa蛋白,为后续研究VIP3Aa蛋白在昆虫中肠的作用受体提供了基础资料。 相似文献
20.
应用旋转组合设计研究C、N、P对苏云金杆菌的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
采用二次回归旋转组合设计方法,对苏云金杆菌WB7菌株的溶解性葡萄糖培养基配方进行了摇瓶优化筛选.建立了产孢量与C源、N源、P源的数学模型,分析了各因素的单因素效应和互作效应.试验获得的C、N、P三因素最佳组合为:C源、N源、P源的质量分数分别为 1. 27%、2. 144%、0. 122%. 相似文献