不结球白菜响应ABA和低温基因WRKY18的克隆及表达分析

[目的]WRKY转录因子是植物特有的一类转录因子,广泛参与植物的生长发育、生物及非生物胁迫响应。克隆和鉴定不结球白菜共同响应ABA和低温的WRKY基因,对研究不结球白菜抗逆分子机制和改良其抗逆性具有重要意义。[方法]采用电子克隆的方法在NCBI数据库中进行不结球白菜WRKY18基因全长拼接,然后在不结球白菜‘苏州青’中,克隆到1个与低温及ABA响应相关的WRKY基因,通过生物信息学手段和实时定量RT-PCR(qRT-PCR)技术分析了该基因的序列结构特征及其在低温和ABA处理下的表达变化。[结果]该基因全长为1080bp,含有978bp的开放阅读框,编码326个氨基酸,与油菜及拟南芥的WRKY18直系同源,氨基酸序列相似性分别为87%和73%,命名为BcWRKY18。序列分析表明,该编码蛋白为核蛋白,不含跨膜区,无信号钛,具有WRKYGQK基序(motif)约60个氨基酸残基的WRKY保守结构域,为WRKY转录因子家族成员。系统聚类分析指出了BcWRKY18蛋白的保守性及其在开花植物中的进化关系;序列结构和同源建模分析指出了BcWRKY18蛋白的保守结构域、蛋白质的二级及三级结构分布模型;qRT-PCR检测了BcWRKY18基因在ABA和低温胁迫下的表达,表明低温和ABA都能诱导BcWRKY18基因表达,其表达模式都存在相似的过程,且BcWRKY18基因对ABA的响应比对低温的响应更快、更明显。[结论]从不结球白菜中克隆获得1个新的WRKY类转录因子基因BcWRKY18,基因表达分析发现BcWRKY18可能存在对ABA和低温的共响应及自身反馈调控。     

一例成年奶牛肺炎链球菌病诊断报告

2006年5月,黑龙江省大庆市某牛场发生一起产后奶牛急性死亡病例,以败血症为特征.经过病原分离鉴定以及动物试验等方法最终确诊为肺炎链球茵感染.药物敏感性试验表明,该细菌对青霉素G、先锋霉素V和菌必治等高度敏感,对红霉素、乙酰螺旋霉素和林可霉素等具有耐药性.     

白菜病程相关蛋白1基因cDNA全长的克隆与分析

 以水杨酸处理后的‘苏州青’白菜为材料, 通过RT2PCR和RACE技术, 获得了白菜病程相关蛋白PR-1基因的cDNA全长序列。该基因与甘蓝型油菜PR-1基因氨基酸序列的同源性为91% , 与拟南芥的同源性为78% , 与其它植物的同源性为57%～60%。Southern杂交表明该基因在白菜基因组中的拷贝数至少为2个。半定量RT2PCR分析表明, 2 mmol/L的水杨酸处理后12 h, 该基因的表达量达到高峰。     

同源四倍体青花菜花粉母细胞的减数分裂

 以同源四倍体青花菜为材料, 采用常规压片法研究花粉母细胞减数分裂行为。结果表明: 同源四倍体青花菜花粉母细胞减数分裂过程与二倍体基本相同但有其特殊性。主要表现在: 中期Ⅰ染色体的构型复杂, 有多价体、四价体、三价体、二价体和单价体; 中期Ⅰ和中期Ⅱ有赤道板外染色体; 后期Ⅰ和后期Ⅱ出现落后染色体、染色体桥及断片; 后期Ⅱ和末期Ⅱ还出现染色体分离不同步及不等分裂的现象;四分体时期出现二分体、三分体、含微核的异常四分体及多分体。花粉母细胞减数分裂平均异常频率为31.5% , 是同源四倍体青花菜花粉育性低的细胞学原因。     

奶牛无浆体病PCR诊断方法的建立及应用

利用边缘无浆体(Anaplasma marginale)高度保守的msp5基因,建立了奶牛无浆体病PCR诊断方法。特异性试验表明与牛巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、温氏附红细胞体、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和牛白细胞DNA无交叉反应;敏感性试验表明可检测到约200个感染红细胞。利用该方法对黑龙江省西部多个养牛场送检的140份血样进行检测,其中曾出现过高热、气喘、流涎和贫血等临床症状的"无名高热"奶牛血样95份、无临床症状奶牛血样45份,结果有上述临床症状奶牛PCR血样阳性率为44.2%,无症状奶牛血样PCR阳性率为13.3%。从而证实无浆体是引起奶牛"无名高热"的病原之一。     

6株柔嫩艾美耳球虫对4种药物的交叉抗药性研究

６株柔嫩艾美耳球虫对４种药物的交叉抗药性研究＠余丽芸＠汪明＠蒋金书＠侯喜林￥黑龙江八一农垦大学动物科技学院￥中国农业大学动物医学院６株柔嫩艾美耳球虫对４种药物的交叉抗药性研究＊余丽芸汪明＊＊蒋金书＊＊侯喜林（黑龙江八一农垦大学动物科技学院,密山１５８３０８...     

猪场暴发猪伪狂犬病的诊断

１发病情况黑龙江省牡丹江地区某工厂化养猪场,是１个年出栏万头肥猪的大型集约化养猪场,采用全封闭、全舍饲、全价料的饲喂方式,阶梯式饲养、板块式结合,以周为单位全年循环,饲养繁殖母猪６００余头,日存栏６０００余头。平时,除加强饲养管理外,还十分注重疫病的...     

二、四倍体青花菜花粉母细胞减数分裂比较

观察二、四倍体青花菜花粉母细胞减数分裂过程并对分裂各时期参数进行统计分析.结果表明,同源四倍体花粉母细胞减数分裂过程与二倍体相比,中期Ⅰ染色体构型复杂,有多价体、四价体、三价体、二价体和单价体;中期Ⅰ及中期Ⅱ有部分染色体没有排列在赤道板上;后期Ⅰ及后期Ⅱ出现落后染色体、染色体桥及断片;后期Ⅱ和末期Ⅱ有染色体不同步分离及不等分裂的现象;四分体时期还出现二分体、三分体、含微核的异常四分体及多分体.同源四倍体花粉母细胞减数分裂平均异常频率高达31.5%,二倍体则只有10.2%的细胞表现异常,说明同源四倍体遗传稳定性比二倍体差,减数分裂不正常是同源四倍体青花菜育性降低的细胞学原因.     

金黄色葡萄球菌β-溶血素基因的克隆与序列分折

1989年,金黄色葡萄球菌β-溶血素基因被命名为hlb,其染色体位于4kb Cla I DNA片段并编码300多个氨基酸多肽,其中分子质量为37～39 ku的镁依赖神经酯酶可以溶解红细胞.研究表明,牛源金黄色葡萄球菌与人源金黄色葡萄球菌相比大部分携带有β-溶血素,而且还表达该基因的表型.     

兔大肠杆菌性腹泻的诊断及防治

兔大肠杆菌性腹泻的诊断及防治崔玉东侯喜林赵淑兰朱战波朴范泽（黑龙江八一农垦大学动物科技学院，密山１５８３０８）１９９６年３月中旬，黑龙江省虎林县某种兔场长毛兔群发生了一起以水样或胶冻样下痢为特征的急性致死性疾病，经过系统地临床和实验室诊断，确认本病为...