CSFV强弱毒株双重RT-PCR方法的建立与应用

为了建立一种能在临床上快速鉴别猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)野毒和弱毒疫苗毒的检测方法,试验在对多株CSFV基因组序列比对分析后,选择特异保守区域设计2对引物构建CSFV强弱毒株双重RT-PCR方法,优化其退火温度,并检测该方法的特异性、敏感性及临床应用效果。结果表明:试验建立的双重RT-PCR方法能从CSFV弱毒疫苗毒和临床野毒株基因组中扩增出大小分别为447 bp和343 bp的特异性基因片段;最佳退火温度为55℃;应用该方法分别对繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)弱毒疫苗毒、猪口蹄疫病毒(FMDV)灭活疫苗毒、猪乙型脑炎病毒(JEV)弱毒疫苗毒总RNA和猪伪狂犬病毒(PRV)灭活疫苗毒、猪细小病毒(PPV)灭活疫苗毒、猪圆环病毒(PCV)灭活疫苗毒的总DNA进行检测,均未见特异性条带,特异性好;对CSFV疫苗弱毒的最低RNA检出量为6.28 ng,敏感性高;对临床混合感染病料进行检测,能同时或单独检测到CSFV强毒和CSFV弱毒疫苗毒核酸。说明试验建立的双重RT-PCR方法特异性好,敏感性高,可用于CSFV强弱毒株的检测。     

禽白血病病毒贵州流行株env基因克隆与序列分析

为了解禽白血病病毒（ALV）贵州流行株的遗传变异情况及分子特征,本试验基于ALV env基因设计合成引物对禽白血病贵州临床病例进行目的基因扩增、克隆和序列分析。结果显示,从临床病例中筛选获得3份阳性样本,PCR扩增均获得大小约921 bp的目的基因片段,将其命名为：GZ-ALV-1株、GZ-ALV-2株和GZ-ALV-3株。序列分析结果显示,3株ALV贵州流行株之间核苷酸同源性在97.2%~97.6%之间,与国内外ALV-J的同源性相对较高,为93.1%~99.3%;而与A、B、C、D、E、K亚群ALV同源性仅为51.4%~53.2%。系统进化分析显示,3株ALV贵州流行株与ALV-J亚群参考株处于同一分支,表明本试验所检测的ALV毒株均为ALV-J亚群;与A、B、C、D、E、K亚群处于不同进化分支。基因变异分析显示,3株流行株37处相同核苷酸变异导致17处氨基酸发生位点变异,其中9个可变点在高变区hr1和hr2,1个可变点在低变区vr3。结果表明,3株ALV贵州流行株均为ALV-J亚群,env基因存在位点发生了变异,且可变位点位于序列高变区。本研究结果为明确贵州禽白血病流行概况及ALV的防控与净化提供基础数据。     

百合鳞茎蔗糖合成酶活性检测体系的建立

为了建立富含多糖的百合鳞茎蔗糖合成酶(sucrose synthase,EC2.4.1.13,SuSy)活性检测体系,深入研究其蔗糖代谢机制,以兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)鳞茎外层鳞片为试材,分别研究了提取缓冲液种类及pH值、反应温度、底物浓度以及缓冲液pH值对SuSy合成和分解方向活性的影响.结果表明:SuSy合成方向活性检测的最适提取缓冲液是pH值为7.8的TrisHCl,最适反应温度为50℃,底物果糖最适浓度为50 mmol· L-1,UDPG最适浓度为5 mmol·L-1,反应缓冲液Tris-HCl最适pH值为7.5;SuSy分解方向活性检测的最适提取缓冲液为pH值7.8的Hepes-NaOH,最适反应温度为40℃,底物蔗糖最适浓度为10mmol· L-1,UDP最适浓度为7 mmol·L-1,反应缓冲液Mes-NaOH最适pH值为4.5.     

RFID读写器模拟前端中的电源电路设计

电子标签是RFID(射频识别)技术在物流方面的应用。标签芯片按功能可以分为模拟前端、数字控制和存储单元3个部分,其中模拟前端起着至关重要的作用。针对无源标签低功耗和低成本的特点,主要介绍了一种新的模拟前端中模拟电源和数字电源两种产生电路,并对其进行了仿真,仿真结果表明了两种电源电路的正确性与可行性。     

甘德县近10年来气温与降水的变化趋势及相关性分析

通过对甘德县1995～2004年10年来气温与降雨量的统计分析,探讨了甘德县气温和降雨量的变化趋势及二者的相关性。结果表明,1995～2004年平均气温逐渐升高,2003年达最高值,与1995年相比平均气温升高了1.30℃;历年降雨量变化规律不明显,在全年尺度上降雨量的变化与气温变化基本一致,表现出明显的季节性变化规律。     

农业科技园区创新驱动发展途径

实施创新驱动发展战略是宁夏2017—2022年实现经济突破最重要的发展战略.为了适应新发展和落实自治区创新驱动发展战略要求,宁夏旱作节水高效农业科技园区在多年形成的科研模式和基础条件下,趁创新驱动发展战略之势,在现代化设施、科技创新、合作共建、市场化运作、"互联网+"、成果转化等方面寻找突破,解决传统农作、科研力量薄弱、成果转化推广不突出和立地条件有限等问题,全力建设一个具有特色产业链的现代化农业科技园区,助力实现农村、农业现代化.     

一种便携式田间打窝机

为解决丘陵地形现有人力铲打窝作业劳动强度大、效率低、质量差,极大影响后续作业和农作物生长条件的问题,根据丘陵地带的地势条件及农作物的农艺要求,结合现有的挖穴机的结构特点,设计一种适合于丘陵地带的新型便携式田间打窝机,解决了打窝过程中掉土、回土、窝壁四周不平整等问题,并能极大程度上减轻劳动人员的劳动强度。文章介绍便携式田间打窝机的整机结构、工作原理、关键部件设计以及作业过程。     

超声波提取火棘红色素工艺参数的优化

以火棘果为原料,利用超声波提取红色素。通过四因素二次通用旋转组合试验设计,分析了浸提温度、料液比、浸提时间和超声波功率对火棘红色素提取的影响,建立了数学回归模型。结果表明:料液比对火棘红色素提取的影响极为显著(p<0.01);浸提温度和超声波功率对火棘红色素提取的影响显著(p<0.05)。火棘红色素提取最佳工艺参数为浸提温度50℃,浸提时间30min,液比1:8(m/v),超声波功率375W。     

副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立与应用

本试验采用121 ℃高压处理副猪嗜血杆菌4型和5型耐热蛋白,混合作为包被抗原,建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法。通过对试验条件进行筛选优化,确定了最佳反应条件:抗原包被浓度为10 μg/mL,37 ℃包被2 h;封闭液选择含20 g/L脱脂奶粉的PBST,封闭30 min;血清的稀释度为1∶80;抗原抗体反应时间为45 min;酶标二抗稀释度为1∶12000,作用时间为30 min;底物显色时间为15 min。特异性、重复性和敏感性试验及对200份送检血清的检测结果表明,建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比间接血凝试验高,对已知阴阳性血清的临床样本检测结果与国外ELISA试剂盒一致,可用于副猪嗜血杆菌的血清抗体检测和血清流行病学调查。     

小苹果的加工利用研究

对当地小苹果123品种的加工工艺进行了研究,有利于小苹果的开发利用。