用地高辛标记的核酸探针检测猪伪狂犬病毒野毒感染的研究

利用PCR技术从带有伪狂犬病毒（PRV）gE基因的重组质粒pMD18-T-gE中扩增回收约304bp大小的片段,并制备出地高辛标记的gE基因核酸探针。特异性检测结果表明,该探针能与重组质粒DNA发生特异性杂交,而与对照的PRVBartha-k61株疫苗毒DNA、猪细小病毒（PPV）DNA、猪圆环病毒（PCV）DNA、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRsV）cDNA、猪瘟病毒（CSFV）cDNA的杂交反应均为阴性;敏感性检测结果表明,该探针对PRV野毒的最低检出量为4pg。应用该探针对11份繁殖障碍病料进行了杂交检测,共检出4份阳性病料,该结果与PCR检测结果一致,表明该核酸探针可用于猪伪狂犬病野毒感染的临床诊断。     

肉鸡大肠杆菌病的噬菌体治疗

鸡大肠杆菌病是由病原性大肠艾希氏杆菌引起的禽类传染病,各种日龄鸡及各品种鸡均易感染,表现为大肠杆菌性败血症、大肠杆菌性肉芽肿、气囊炎、肝周炎、肿头综合征、腹膜炎、输卵管炎、滑膜炎、全眼球炎及脐炎等一系列疾病。近年来,随着养鸡业的不断发展,特别是集约化饲养,该病在一些鸡场中不同程度发生,给养鸡业带来了严重危害,并造成较大的经济损失,不少鸡场由于大肠杆菌造成的死鸡数往往占死亡数的50％以上。噬菌体是一类能够感染和杀死细菌的病毒,这使其有可能成为抗生素的替代品而用于预防和治疗细菌性感染、减少农产品中的食源性病原体。细菌病的噬菌体治疗前景有赖于多价噬菌体的分离及多株不同宿主谱噬菌体的混合应用,相信在不久的将来,通过改造现有噬菌体的宿主谱或从自然界分离到更多的多价噬菌体,利用噬菌体制剂将可以轻松有效地控制鸡大肠杆菌病。     

I群禽腺病毒的分离鉴定与同源性分析

为了解鸡群中I群禽腺病毒(FAd V-I)的流行现状,从山东、黑龙江、吉林等地部分大规模养鸡场采集病料,进行病毒分离、PCR鉴定及同源性分析。结果显示:从76份病料中分离到10株FAd V-I,分离率为13%;10株FAd V-I中,1株为血清4型,6株为血清8b型,1株为血清9型,2株为血清11型。结果表明,山东、黑龙江、吉林等地均存在一定的FAd V-I流行,主要流行血清型已由4型转变为8b型,因此需要评估当前的4型灭活苗能否有效防控这些地区的FAd V-I流行。     

谷氨酰胺对夏季水貂生长性能、血清生化指标和抗氧化能力的影响

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平的谷氨酰胺(Gln)对夏季水貂生长性能、血清生化指标及抗氧化能力的影响。选取育成期水貂160只,随机分为5组,每组32只(16只公貂,16只母貂),水貂单笼饲养。对照组水貂饲喂不添加Gln的基础饲粮,试验组水貂分别饲喂在基础饲粮基础上添加0.2%、0.4%、0.6%和0.8%Gln的试验饲粮。试验期8周。结果表明:饲粮中添加0.4%和0.6%的Gln可显著提高母貂的平均日采食量(P0.05);饲粮中添加0.4%的Gln可极显著提高水貂的平均日增重(P0.01),并显著降低水貂的料重比(P0.05)。饲粮中添加Gln对水貂血清葡萄糖含量和肌酸激酶活性无显著影响(P0.05),但添加0.4%和0.6%的Gln可显著提高血清总蛋白含量(P0.05),显著降低血清尿素氮含量(P0.05)。饲粮中添加0.2%和0.4%的Gln可显著提高水貂血清抑制羟自由基能力(P0.05),但对血清抗超氧阴离子能力无显著影响(P0.05);饲粮中添加0.4%和0.6%的Gln可显著降低水貂血清丙二醛含量(P0.05),极显著提高血清总抗氧化能力(P0.01),显著提高血清谷胱甘肽过氧化物酶活性(P0.05)。综合各项指标,夏季高温条件下,育成期水貂饲粮中Gln的适宜添加水平为0.4%。     

PCR及核酸探针检测耐甲氧西林葡萄球菌mecA基因的研究

为了解耐甲氧西林葡萄球菌在畜禽间的存在情况.试验建立针对mecA基因的PCR方法及地高辛标记核酸探针技术,分别用两种方法对75株葡萄球菌分离株进行检测.结果显示,经PCR方法检出42株耐甲氧西林葡萄球菌,占分离株的56.0%;经核酸探针方法检出47株耐甲氧西林葡萄球菌,占分离株的62.7%,两种方法的总符合率为93.3%.通过研究证实,在畜禽的体表及体内能够分离到耐甲氧西林葡萄球菌,且有较高的分离率,应该引起兽医工作者的足够重视.     

宽裂解谱禽源沙门氏菌噬菌体的筛选及其裂解性能分析

为了筛选宽裂解谱禽源沙门氏菌噬菌体并分析其裂解性能,本试验首先对分离自不同年份、不同地区、不同宿主来源的238株禽源沙门氏菌(C01～C238株)进行药物敏感性检测和血清型鉴定,筛选出耐药率大于60.00%的抗生素;然后采用双层平板法测定50株沙门氏菌噬菌体(NP01～NP50)对238株禽源沙门氏菌的裂解谱并统计裂解率;最后选择裂解率最高的噬菌体,进一步统计其对筛选到的抗生素耐药的沙门氏菌菌株的裂解率及对不同分离年份、分离地区、宿主来源及血清型的沙门氏菌菌株的裂解率。结果表明：238株沙门氏菌对青霉素、阿莫西林、红霉素、利福平、复方新诺明的耐药率较高,均大于60.00%;其中对红霉素的耐药率最高,为88.24%;对头孢噻肟、氧氟沙星、庆大霉素、四环素的敏感率较高,为64.71%～86.13%。在238株被检沙门氏菌中,肠炎沙门氏菌有128株,鸡白痢沙门氏菌有95株,鼠伤寒沙门氏菌有6株,伤寒沙门氏菌有2株,甲型副伤寒沙门氏菌有1株,未定型沙门氏菌有6株。在50株沙门氏菌噬菌体中,有14株对238株沙门氏菌的裂解率在80.00%以上,有17株裂解率在20.00%以下;NP17的裂解率最...     

酵母铬对热应激肉鸡抗氧化性能的影响

本试验旨在研究酵母铬不同添加水平对热应激肉鸡体内抗氧化性能的影响.选用14日龄AA肉仔鸡216只,随机分为6个处理,在基础口粮中分别添加铬0(对照组)、1.0、2.0、3.0、4.0和5.0 mg/kg,每组设3个重复,每重复12只鸡,试验期4周,在热应激条件下测定了28和42日龄肉鸡血清和肝脏组织中抑制羟自由基(·OH)能力、抗超氧阴离子自由基(O2-·)活性、MDA含量、GSH-Px、T-SOD、CAT活性和T-AOC.试验结果表明:3.0、4.0 mg/kg铬添加水平能够显著增强热应激肉鸡血清(28日龄)和肝脏(42日龄)中抑制羟自由基能力(P<0.05),提高血清(28和42日龄)和肝脏组织(42日龄)中抗超氧阴离子自由基活性(P<0.05);减少血清(28和42日龄)和肝脏(28日龄)中MDA生成(P<0.05);显著提高血清(28和42日龄)和肝脏组织(28和42日龄)中GSH-Px活性和T-AOC(P<0.05);极显著提高肝脏组织(28和42日龄)中T-SOD活性(P<0.01);并能提高血清(42日龄)CAT活性(P<0.05).结果显示,日粮添加酵母铬可以提高热应激肉鸡血清和肝脏中抑制羟自由基(·OH)能力、抗超氧阴离子自由基(O2-·)活性,减少MDA生成,并能提高血清和肝脏组织中GSH-Px、T-SOD、CAT活性和T-AOC,日粮中适宜的铬添加水平为3.0 mg/kg. (P<0.05);显著提高血清(28和42日龄)和肝脏组织(28和42日龄)中GSH-Px活性和T-AOC(P<0.05);极显著提高肝脏组织(28和42日龄)中T-SOD活性(P<0.01);并能提高血清(42日龄)CAT活性(P<0.05).结果显示,日粮添加酵母铬可以提高热应激肉鸡血清和肝 中抑制羟自由基(·OH)能力、抗超氧阴离子自由基(O2-·)活性,减少MDA生成,并能提高血清和肝脏组织中GSH-Px、T-SOD、CAT活性和T-AOC,日粮中适宜的铬添加水平为3.0 mg/kg. (P<0.05);显著提高血清(28和42日龄)和肝脏组织(28和42日龄)中GSH-Px活性和T-AOC(P<0.05);极显著提高肝脏组织(28和42日龄)中T-SOD活     

纳米硒对肉鸡肝脏硒含量和抗氧化能力的影响

试验选用1日龄艾维茵(Avian)肉鸡225只,随机分为5个处理组,每组设3个重复,研究纳米硒对肉鸡肝脏硒含量和抗氧化能力的影响。在玉米-豆粕型日粮基础上添加纳米硒0、0.15、0.3、0.6、1.2mg/kg,基础日粮组为对照组,试验期6周。结果表明:42日龄时,日粮中添加纳米硒显著提高了肝脏总抗氧化能力、谷胱甘肽过氧化物酶活力、总超氧化物歧化酶活力、抑制羟自由基能力(P<0.05),显著降低了肝脏丙二醛含量、一氧化氮含量(P<0.05),极显著提高了肝脏硒含量(P<0.01)。而且随日粮中纳米硒添加量的增加,肝脏抗氧化能力和硒含量均呈二次曲线关系。因此,肉鸡日粮中纳米硒的适宜添加水平为0.7～1.0mg/kg。     

猪泛素基因与PRRSV GP5基因融合表达质粒的构建

采用RT—PCR技术从长白猪的肌肉组织中扩增出了泛素(Ubiquitin)基因，并将其克隆到pGEM—T easy载体，经测序表明，所克隆的基因与GenBank中已登录的序列同源性达99％。利用设计的融合表达引物，分别将泛素基因与猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白成熟肽基因进行扩增，用重叠区扩增基因拼接法将2个基因片段进行拼接，并插入真核表达载体pcDNA4．0 HISMAXA中，构建出了pcDNA—U—GP5重组质粒。     

繁殖与呼吸综合征疫苗研究进展

美国Boehfinger Ingleheim公司于1995年首次推出商品化减毒疫苗Resp PRRS／Repro^TM．已获准用于3～18周龄猪的预防接种，有些国家还将其用于繁殖猪群。Schedng-Hough动物保健公司生产的弱毒疫苗Prime Pac^R PRRS．用于母猪或后备母猪配种前3～6周的预防接种，但禁用于PRRS阴性猪群、妊娠母猪和育龄公猪。何信群等制备了PRRSV减毒活疫苗，并进行了猪体试验，结果表明免疫后20～35d左右出现抗体高峰，