慢病毒载体介导外源基因在不同细胞及鸡体不同组织中的表达

以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为标记基因构建复制缺陷型慢病毒载体生产病毒,以病毒感染不同来源、不同分化特征的细胞,并进行鸡囊胚注射,观测外源基因的表达情况。试验结果表明,在所有类型细胞中均可检测到EGFP较高水平的表达,其中在HeLa、293FT细胞中的转染效率约1×10^8TU·mL^-1（TU：转染单位）,在C127细胞中为5×10^7TU·mL^-1,在鸡胚胎成纤维细胞（CEF）中约为1×10^6TU·mL^-1,病毒在鸡原生殖细胞（cPGC）中转染效率最低为1×10^2TU·mL^-1。病毒的感染可引起细胞表型的不利改变。用该病毒载体注射鸡囊胚获得了可直接活体观察绿色荧光信号的转基因鸡,转基因效率约53％;外源基因在鸡体不同组织如表皮、消化道等器官中检测到不同水平的表达,并表现出不同的分布特征。     

小鼠植入前胚胎MuERV-L基因表达特征研究

利用实时定量RT-PCR技术,对体外培养的小鼠植入前胚胎发育过程中鼠内源逆转录病毒样基因(MuERV-L)的表达进行研究,并通过appdicolin(DNA复制抑制剂)、TSA(组蛋白去乙酰化酶特异性抑制剂)分别抑制1-细胞期DNA的复制和合子基因组激活(ZGA)过程中组蛋白去乙酰化,探索MuERV-L基因表达的变化.结果表明:MuERV-L基因的转录在受精后9～11 h快速启动,并在2-细胞阶段出现瞬时高表达.抑制试验显示:1-细胞期DNA的复制受抑制后,MuERV-L基因的转录也被显著抑制(P《0.05);在TSA处理的4-细胞胚胎中,MuERV-L基因显著高表达(P《 0.01),且其水平达到正常2-细胞的转录水平.提示:该基因可能对小鼠胚胎ZGA过程起重要作用.     

关于农民增收缓慢的原因及对策

农业、农村和农民问题 ,始终是关系到我们党和国家全局的根本问题。“要把加强和增加农民收入作为整个经济工作突出的任务”。