PCR技术在农药学研究中的应用

聚合酶链式反应具有灵敏度高、特异性强和操作简便等优点,是应用最为广泛的分子生物技术之一。目前,农药学越来越多的研究涉及分子和基因,PCR技术有着广泛的应用前景。本文简要介绍PCR技术的基本原理和特点,以及其在靶标生物抗药性研究、农药环境毒理、农药作用机理、生物农药的开发等方面的应用。     

超级稻病虫发生特点及其药剂防治技术

超级稻从孕穗末至齐穗期如遇上连续阴雨天,稻曲病大发生,纹枯病发生较普遍;二化螟、稻飞虱发生量大,危害较重。在超级稻大田生长期,抓住施药适期,选用高效、内吸、广谱、环保型农药,进行3～4次防治,可有效防控病虫危害,达到节本增效、减少农药污染的目的。     

2002年江苏省水稻稻瘟病菌致病性及遗传多样性研究

 由稻瘟病菌(Magnaporthe grisea,无性世代为Pyricularia grisea)引发的水稻稻瘟病是目前水稻生产上的重要病害之一,存在着品种专化性和致病性的分化.一些抗病品种推广3~5年后即丧失抗病性,给生产带来很大危害.目前选育和利用抗病良种仍是防治该病最经济有效的措施^[1].由于稻瘟病菌的多样性及易变性直接导致了品种的抗病性丧失,因此研究稻瘟病菌的致病性和群体遗传结构组成等具有重要意义.     

猪肺炎支原体与猪支气管败血波氏杆菌在猪体液免疫和生长性能上的协同作用

试验选用10日龄成华×大约克杂交猪36头,随机分成四组(1、2、3、4),每组9头.其中1、2组用猪肺炎支原体全菌抗原免疫后再分别用猪肺炎支原体和猪支气管败血波氏杆菌进行攻毒,3、4组注射生理盐水作为对照,并与前两组同时分别用猪肺炎支原体和猪支气管败血波氏杆菌进行攻毒.采用间接ELISA、组织切片等方法对猪血清中的抗体水平、肺脏的病理变化及生长性能进行测定.试验表明:用猪肺炎支原体全菌抗原接种猪后,在血清中能检测到较高的抗体水平(25).猪肺炎支原体攻毒后2周,免疫猪和对照猪血清中猪肺炎支原体抗体的滴度分别为23.8与22.4(P＜0.05),且免疫猪的生长性能比对照猪好.在猪支气管败血波氏杆菌攻毒组,攻毒2周和4周后免疫猪血清中的猪支气管败血波氏杆菌抗体水平与对照猪相比分别提高了26.67%和30.00%(P＞0.05),6周后免疫猪和对照猪血清中的猪支气管败血波氏杆菌抗体分别为21.7和20.3(P＜0.05),且在攻毒后4～6周,免疫猪的生长性能有了显著的改善.组织切片显示,无论是用猪肺炎支原体攻毒还是用猪支气管败血波氏杆菌攻毒,免疫猪的肺脏病变程度都较对照猪轻.     

Changes of cellular immunological function after surgical operation in patients with locally advanced lung cancer

AIM: To study the change of cellular immunological function in patients with locally advanced lung cancer before and after operations. METHODS: A lung cancer group of 20 cases with locally advanced lung cancer (group A), a benign disease group of 20 cases with lung benign disease (group B) and a normal group of 20 cases from healthy volunteers (group C) were set up. The levels of the peripheral blood T lymphocyte subsets (CD+3, CD+4, CD+8, CD+4/ CD+8 ratio) were detected in the group A before operation and on the 10th day and 17th day after operation by indirect immuno-fluorescence assay and contrasted with the group B and group C. RESULTS: The levels of T lymphocyte subsets in group A were abnormal before operation, CD+3, CD+4/ CD+8 ratio were significantly lower than those in group B and group C (P<0.05), and CD+8 was significantly higher (P<0.05). CD+3 significantly increased (P<0.05) and CD+8 decreased (P<0.05) on 10th day and 17th day after operation. CD+4/ CD+8 ratio significantly increased on 17th day after operation (P<0.05). There was no significant difference of the levels of T lymphocyte subsets between the 10th day and 17th day after operation. CONCLUSIONS: The patients with locally advanced lung cancer have a remarkable impairment of immunological function, which mainly show stronger immunosuppression and have some recovery after operation. In the view of immunology, the surgical resection for locally advanced lung cancer shows active significance.     

日粮类型对猪肉营养和品质的影响

在日粮粗蛋白、能量、钙、磷水平相近的情况下，蛋白饲料种类及微量元素Ｆｅ、Ｃｕ添加水平不同，所饲喂猪只肉质与肉食营养不相一致。根据本试验结果，“豆饼＋鱼粉”型日粮在高剂量Ｆｅ、Ｃｕ的协同作用下有利于促进肌肉的生长和饲料氨基酸向肌肉氨基酸的转化，而“棉籽饼＋菜籽饼”型日粮可期望获得较好的肉质。肌肉Ｆｅ、Ｃｕ、Ｚｎ、Ｍｎ沉积受饲料影响不明显。     

H5亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆及表达

研究以RT-PCR方法从H5N1亚型禽流感病毒A/DKZJ/12/00(H5N1)中获得禽流感病毒HA部分基因,将目的基因定向克隆到原核表达载体pET-32a,将测序和酶切验证正确的阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达。结果表明该蛋白得到了可溶性的表达,表达蛋白的分子质量为25ku;Western-blot分析结果表明,该蛋白可以与禽流感H5阳性血清反应(禽流感的单克隆抗体所识别),检测HA的抗体时具有良好的免疫原性。     

新疆库尔勒市区草坪植物多样性研究

在室内外调查研究的基础上，应用生物多样性基本原理，首次论述了库尔勒市区草坪植物区系、染色体遗传、生活型、生态型、植物景观和资源植物的多样性及其质量特征。结果表明，库尔勒市区草坪植物的多样性，在植物物种组成上，以人工栽培和引种为主，本土杂草为辅；在地理成分上，以本土地理成分为主，外引地理成分为辅；在染色体组型上，以单染色体组型为主，多染色体组型为辅；在生活型组成上，以木本植物为主，草本为辅；生态类型组成上，以中生为主，旱生为重要组成部分，湿、水生为补充；在植物景观组成上，以2、4、5要素景观为主，1、3要素景观为辅；在资源植物构成上，以环境和生产类为主，食用和特殊类为辅。     

H5N1亚型禽流感病毒神经氨酸酶基因的表达及纯化

用RT-PCR方法从H5N1亚型禽流感病毒（AIV）A／Duck／Zhejiang／12／00中获得NA基因，将目的基因定向克隆到原核表达载体pET-32a中，将序列测定和双酶切验证准确的阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21，用IPTG诱导，经SDS-PAGE和Western-blot分析，结果显示，重组蛋白得到了可溶性表达，表达的蛋白质分子质量为33ku；该蛋白可以与禽流感H5N1亚型阳性血清反应，具有良好的免疫原性；ELISA检测结果表明，用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV神经氨酸酶抗体具有良好的灵敏性。     

仔猪大肠杆菌的分离鉴定及中药抑菌试验

仔猪大肠杆菌病是由病原性大肠杆菌引起的一类多发性、致死性肠道传染病。因不同年龄、个体和生理机能的差异而呈不同的表现，常见的有仔猪黄痢、仔猪白痢和猪水肿病。该病是目前仔猪疾病群之一，也是导致仔猪死亡率高的主要原因之一，发病季节多集中于产仔旺季。仔猪自出生至断乳期均可发病，在1月龄内发病较多。目前用于防治仔猪大肠杆菌病的药物多为抗菌药，由于抗菌药在使用过程中，不仅杀灭了致病菌，而且也破坏了机体原有的正常菌群，导致微生态平衡的破坏，进而增加了机体对外源感染的敏感性，同时由于长期使用抗菌药，