猪伪狂犬病病毒gB蛋白抗体竞争化学发光酶联免疫检测方法的建立

为了建立一种快速定量检测猪伪狂犬病病毒（PRV）gB蛋白抗体的竞争化学发光酶联免疫检测方法,以大肠杆菌表达并纯化的猪伪狂犬病病毒gB重组蛋白作为包被抗原,以辣根过氧化物酶标记的抗gB蛋白单克隆抗体作为酶标抗体,以国家参考品稀释制备的校准品绘制标准曲线实现定量检测,成功建立的PRV-gB-CLEIA在45 min内即可完成检测,可检测到最大稀释倍数为1：2 048稀释的国家参考品;与猪瘟等其他5种病毒抗原的标准阳性血清无交叉反应;批内变异系数为1.13%~9.47%,批间变异系数为2.43%~14.07%,重复性和稳定性较好。通过对采集的180份临床血清检测结果进行比较,该方法与中和试验阳性符合率为94.00%,阴性符合率为96.92%,总符合率为96.11%,明显优于商品化ELISA试剂盒。本研究建立的PRV-gB-CLEIA检测方法可以用于PRV gB抗体的快速定量检测。     

PCV2衣壳蛋白羧基端基因在T4噬菌体表面的展示及ELISA方法的建立

用PCR扩增猪圆环病毒Ⅱ型广东分离株的衣壳蛋白羧基端基因,将PCR产物连接到pR质粒,转化DH5α细胞,筛选阳性克隆进行PCR鉴定并测序后,转化E2菌,将重组E2菌与缺陷型噬菌体T4-Z1同源重组后,得到重组噬菌体,经SDS-PAGE和Western blotting分析,表明衣壳蛋白片段在噬菌体表面正确展示,表达的融...     

复合微生态制剂与饲用抗生素对肉雏鸡免疫性能和肠道微生物菌群的影响

试验选取240只1日龄的黄羽肉雏鸡,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ 4个组,其中Ⅰ组为对照组,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别添加复合微生态制剂、头孢类药物和氟苯尼考药物,研究添加复合微生态制剂和饲用抗生素对肉雏鸡免疫性能和肠道菌群的影响.结果表明:复合微生态制剂对肉雏鸡法氏囊的发育有明显促进作用,9日龄时复合微生态制剂组法氏囊指数分别高出对...     

草原和农田几种主要鼠种数量动态研究及预测

2007年4～10月,在内蒙古呼和浩特郊区和锡林郭勒草原分别对长爪沙鼠、黑线仓鼠、五趾跳鼠和布氏田鼠进行了种群数量动态和预测研究.根据2007年实地调查数据,利用已经建立的预测模型,分别对上述4种鼠2008年的数量作出预测:预测2008年上述两地长爪沙鼠数量均不多,不致形成危害;黑线仓鼠2008年春季捕获率为0.97±0.48%～1.49±0.59%,秋季捕获率为0.52%,也不会形成危害;2007年五趾跳鼠捕获率0.06%,预测2008年该鼠数量也不多,不会造成危害;锡林郭勒草原2007年布氏田鼠年捕获率为1.67%,预测2008年布氏田鼠数量仍处在低谷期,不会形成大面积危害,但局部地方,如锡林浩特市郊的草场春季可能增多,应作好防治的准备工作.建议建立草原鼠类数量长期监测点,开展预测预报,在鼠的数量上升之前采取主动防治措施,把鼠密度长期控制在危害阈值之下,实现草原鼠害的持续控制.     

牦牛、犏牛睾丸组织中SYCP 3基因mRNA表达水平研究

本文采用RT-PCR和荧光定量PCR对牦牛SYCP3基因的组织表达,以及SYCP3基因在牦牛和犏牛睾丸组织中的表达水平进行分析。结果表明,SYCP3基因在牦牛睾丸组织中特异表达,牦牛与犏牛睾丸组织中SYCP3基因的表达水平差异极显著（P〈0．01）。睾丸和附睾组织切片显示,牦牛睾丸组织中可见各级生精细胞,附睾内可见发育良好的精子,而犏牛睾丸组织中无次级精母细胞和更高级生精细胞、附睾内未观测到精子,与人和小鼠SY-CP3基因缺失或表达水平降低出现的表型一致,可以认为SYCP3基因的表达水平可能与犏牛的雄性不育有一定的关系。     

抵抗素样Relmβ分子研究进展

Relmβ亦称发现于炎症带2(found in inflammatory zone2,FIZZ2),是一种富含半胱氨酸的分泌蛋白。目前的研究表明,Relmβ在许多方面发挥着非常重要的作用,包括胰岛素抵抗,抵制肠腔寄生线虫的感染,预测胃肠道肿瘤的发生,促进小鼠结肠炎和回肠炎模型中的炎症反应,诱导肺部纤维化、缺氧肺血管的重建,促进气道重塑等。通过对Relmβ分子的结构、表达分布、生物学功能的研究进展进行归纳,为Relmβ分子在生物学和医学方面更深入的研究提供参考。     

生长前期北京鸭生物素需要量及脚裂症的初步探究

本文旨在研究不同生物素水平对生长前期北京鸭生长性能的影响,并对生物素缺乏症———脚裂症进行初步探究。试验选用体重相近的1日龄雄性北京鸭480只,随机分成10组,每组6个重复,每个重复8只鸭。各组分别添加0、0.03、0.06、0.09、0.12、0.15、0.18、0.21、1.50 mg/kg生物素及3 g/kg蛋清粉。试验期4周。结果表明,不同生物素水平对1～21日龄北京鸭平均日采食量和平均日增重有显著影响(P<0.05),但对料重比没有显著影响(P>0.05)。统计发现,各组表现出不同程度的脚裂症,其中3 g/kg蛋清粉组最为严重;生物素添加水平高于0.15 mg/kg时,脚裂症得到有效缓解。不同生物素水平对28日龄北京鸭肝脏磷脂含量和血清谷丙转氨酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性有显著影响(P<0.05)。通过数据分析得出,以平均日增重为衡量指标,采用直线折线和二次曲线模型估测生物素适宜需要量分别为0.180和0.202 mg/kg,并初步判断脚裂症与脱水存在一定的关系。     

尼帕病毒流行病学研究进展

尼帕病是由副黏病毒科中的尼帕病毒引起的新型烈性人畜共患传染病,其严重威胁人类与猪等动物的健康。作者就尼帕病毒的病原学特征、流行病学和临床症状等进行了概述,以期初步了解尼帕病毒。     

2年生桉树杂交种生长与抗风的遗传变异研究

 以２×１０的析因交配桉树杂交种为研究材料,杂种的母本为尾叶桉和细叶桉,父本为巨桉、粗皮桉、细叶桉和尾叶桉。对２７个月生杂交种的材积生长、抵抗风速为１８和４０ｍ／ｓ台风的抗风指数（ＷＲ１ 和ＷＲ２）的研究表明,材积生长在母本间差异不显著（犘＞０．０５）,但在父本间、母本与父本的交互作用间差异显著（犘＜０．０５）;ＷＲ１ 在父、母本间均存在显著差异（犘＜０．０５）,ＷＲ２ 只在父本间差异显著（犘＜０．０５）。在材积生长上,巨桉作为父本具有高的一般配合力,Ｔ１×Ｇ２、Ｕ１×Ｐ３具有高的特殊配合力;在抗风指数上,Ｇ１、Ｇ２和Ｐ２作为父本分别对ＷＲ１ 和ＷＲ２ 具有高的一般配合力。材积生长性状受加性基因和显性基因的控制,狭义和广义遗传力分别为０．１４～０．１７ 和０．３０～０．３６;抗风指数受加性基因控制,遗传力为０．１０～０．１１。以尾叶桉为母本的子代材积生长性状遗传力高于细叶桉母本的子代、抗风指数的遗传力高于细叶桉母本的子代;材积生长性状与ＷＲ１ 总体上呈显著正相关（犘＜０．０５）,与ＷＲ２ 呈显著负相关（犘＜０．０５）。     

PRRSV重组N蛋白表达、纯化及间接ELISA检测试剂盒的研制

采用RT-PCR扩增出大小409bp猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因（PRRSV N gene）,将该基因克隆到表达载体pGEX-KG,构建重组表达载体pGEX-KG-N,转化表达菌株BL21（DM3）诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,重组N蛋白获得了高效表达,融合蛋白相对分子质量为41 000,并具有良好的免疫学活性。扩大诱导培养,收集菌体,提取包涵体,用GST-Protein Purtification Kit亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳检测纯度达到90%以上,可满足诊断抗原质量要求。用纯化PRRSV重组核衣壳蛋白GST-N为包被抗原,建立检测PRRSV血清的间接ELISA诊断方法,并组装ELISA试剂盒。优化后抗原最适包被质量浓度为2.5mg/L;血清最适稀释度为1∶100;对血清样本检测临界值为0.224;与美国IDEXX公司的HerdChek ELISA试剂盒符合率为92%,特异性为95%,敏感性为90%;与猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒等常见猪繁殖障碍病标准阳性血清无交叉反应。ELISA试剂盒批内和批间变异系数分别为3.44%～6.34%和5.04%～7.64%。置4℃条件保存12个月,试剂盒稳定性无明显改变。该试剂盒对350份临床疑似血清检出率为88.6%。研制的ELISA试剂盒为PRRSV临床血清抗体检测及流行病学调查提供了技术手段。