牛蛙腐皮病病原菌分离鉴定及药敏试验

[目的]明确浙江嘉善某养殖场引起牛蛙腐皮病的致病菌,并探究益生菌与牛蛙腐皮病病原菌间的相互作用,为今后利用益生菌防控牛蛙腐皮病的发生提供技术支持.[方法]通过常规的细菌分离纯化、人工回归感染试验、生理生化特性鉴定及16S rDNA序列扩增,确定引起牛蛙腐皮病的致病菌;根据药敏试验筛选抗菌药物,并从生物防控的角度探究枯草芽孢杆菌等益生菌与致病菌间的相互作用.[结果]从患病牛蛙的内脏及体表溃烂处共分离获得9株疑似致病菌株,经人工回归感染试验确定菌株NWt-2为引起牛蛙腐皮病的致病菌;综合其形态学特征、生理生化特性及分子生物学鉴定结果,可确定菌株NWt-2为布韦不动杆菌(Acinetobacter bouvetii).菌株NWt-2对丁胺卡那、庆大霉素、哌拉西林、头孢氨苄和硫酸阿米卡星等5种抗菌药物高度敏感,对青霉素、复方新诺明、诺氟沙星、氟苯尼考、复方磺胺嘧啶、盐酸林可霉素和盐酸大观林可霉素等7种抗菌药物不敏感(耐药).浓度为105 CFU/mL的枯草芽孢杆菌和紫色杆菌对菌株NWt-2有一定的抑制作用,抑菌圈直径分别为1.45±0.46和0.97±0.38 mm.[结论]布韦不动杆菌是引起浙江嘉善养殖牛蛙发生腐皮病的致病菌,可选用丁胺卡那、庆大霉素、哌拉西林、头孢氨苄和硫酸阿米卡星等抗菌药物进行防治.鉴于枯草芽孢杆菌对布韦不动杆菌具有一定的抑制效果,在当前病原菌对抗菌药物普遍存在耐药性的情况下,选择枯草芽孢杆菌等益生菌进行生物防控具有可行性.     

云南黄毛草莓的nrDNA ITS和cpDNA psbA-trnH序列分子鉴定及进化特征分析

[目的]利用核糖体DNA(nrDNA)ITS序列和叶绿体DNA(cpDNA)psbA-trnH序列对云南不同地理区域的黄毛草莓进行分子鉴定,并分析不同地理居群间的分子进化及地理分布特征,为黄毛草莓种质鉴定、保护及开发利用提供理论依据.[方法]以云南省12个不同地理区域的黄毛草莓居群样品为材料,PCR扩增其ITS和psbA-trnH序列,并进行双向测序及序列合并,分别基于ITS和psbA-trnH序列及二者合并序列构建系统发育进化树.最后利用DnaSP 5.10对ITS和psbA-trnH序列进行核苷酸多样性(π)及单倍型数目、类型和多样性(Hd)分析,并对黄毛草莓居群进行中性检验及分子进化特征分析.[结果]基于ITS和psbA-trnH序列的聚类分析结果均显示,12个不同地理区域的黄毛草莓居群样品均与GenBank数据库中下载的黄毛草莓聚在一个分支上,分支自展值均大于阈值(75%),表明这两种序列均可用于黄毛草莓种质的分子鉴定.基于二者合并序列的聚类分析结果与上述结果基本一致,但分支自展值达99%,表明该聚类分析结果更可靠.不同地理区域的黄毛草莓ITS序列间的遗传距离为0~0.014,排序为迪庆州>昆明市>文山州,psbA-trnH序列间的遗传距离为0~0.025,排序为昆明市>迪庆州>文山州,推测ITS和psbA-trnH序列均能显示黄毛草莓居群遗传分化与地理分布格局的相关性.ITS序列长度为668 bp,变异位点百分率为1.8%,共有8种单倍型,Hd和π分别为0.894±0.078和0.006,以昆明市黄毛草莓样品的单倍型最多,为4种;psbA-trnH序列有203 bp,变异位点百分率为2.5%,psbA-trnH序列共有5种单倍型,Hd和π分别为0.788±0.090和0.009,以昆明市黄毛草莓样品单倍型最多,为3种,表明两种序列的单倍型均呈现地理分布格局.黄毛草莓ITS和psbA-trnH序列的中性检验Tajima's D值分别为-0.673和0.227(P>0.1),表明云南省12个不同地理区域的黄毛草莓居群保持稳定状态,在截至目前的历史时间内不存在扩张.[结论]从云南不同地理区域采集的样品均为黄毛草莓.ITS序列和psbA-trnH序列均可作为黄毛草莓的DNA条形码,二者的合并序列更能准确鉴定黄毛草莓种,适用于黄毛草莓分子谱系地理学研究.     

Response of axillary bud development in garlic(Allium sativum L.) to seed cloves soaked in gibberellic acid(GA_3) solution

Gibberellins(GAs) are important phytohormones that regulate many developmental processes in plants. Clove, as the reproductive organ of garlic, dramatically affected garlic bulb development. Considering the potential of gibberellins in plant development and our previous studies, we investigated the effect of soaking two types of seed cloves(seed clove-I: without root/shoot sprouting; seed clove-II: with root/shoot sprouting) in GA_3 solution on axillary bud development and examined the effect of soaking seed cloves in GA_3 solution on bulb development, phytohormone level and sugar content in this study.Results indicated seed clove types, soaking liquids and their interaction significantly affected the number of cloves per bulb and the rate of single-clove bulb. Moreover, soaking seed cloves in 1 mmol L~(–1) GA_3 solution for 24 h not only promoted axillary bud formation and secondary plant growth(equal to tillering or branching), but also slightly increased the number of cloves per bulb and changed bulb structure with a low yield and marketable quality. On the 40 th day after GA_3 treatment(at axillary bud outgrowth stage), zeatin riboside(ZR) and soluble protein in stem were sharply increased with the increase of GA_3, sucrose, fructose and soluble protein in leaf. However, GA_3, indole~(-3)-acetic acid(IAA), soluble sugar and sucrose in stem(3.52 ng g~(–1) fresh weight(FW), 19.88 ng g~(–1) FW, 237.3 mg g~(–1) FW, and 8.24 mg g~(–1) FW, respectively) were significantly decreased on the 40 th day after GA_3 treatment, compared to the control of water treatment(5.56 ng g~(–1) FW, 32.96 ng g~(–1) FW, 263.6 mg g~(–1) FW, and 10.37 mg g~(–1) FW, respectively). To our knowledge, these novel results indicate seed cloves soaked in GA_3 solution promotes axillary bud formation and outgrowth that caused the changes in plant architecture and bulb structure. Meanwhile, our findings suggest that the level of endogenous plant hormone(GA_3, IAA and ZR) cooperates with the content of sugar(sucrose and fructose) in leaf and stem to regulate axillary bud outgrowth in garlic.     

饥饿对泥鳅某些血液指标的影响

对体长9·7~12·0cm、平均体重8·3g的泥鳅(Misgurnusanguillicaudatus)在正常摄食和饥饿4~16d状态下的血液指标进行了测定。结果表明:随着饥饿时间的延长,红细胞数量呈下降趋势,在饥饿的第4d、8d、12d和16d,红细胞数量分别是正常摄食时数量的67·5%,63·0%、61·3%和60·5%,差异极显著(P<0·01);红细胞的体积变大,饥饿到第16d时,红细胞的长径和短径分别比正常摄食时增加了2·8%和13·0%;白细胞数量呈上升趋势,在饥饿的第4d、8d、12d和16d,白细胞数量分别是正常摄食时数量的114·3%、121·7%、137·1%和139·4%;白细胞的体积逐渐变小,饥饿到第16d时,其长径和短径分别是正常摄食时的88·2%和89·4%,差异显著(P<0·05);血红蛋白含量在前8d的饥饿中是下降的,之后出现上升;红细胞的脆性在饥饿前期有所下降,后期则维持在一定水平;红细胞的沉降率随着饥饿时间的延长而有所加快,差异不显著。     

单链抗体及其在肿瘤诊断和治疗中应用研究进展

单链抗体(ScFv)是将抗体重链可变区和轻链可变区通过一段连接肽连接而成的重组蛋白,也是目前报道最多的基因工程抗体。ScFv具有分子质量小,免疫原性低,无Fc端,不易与具有Fc受体的靶细胞结合,对肿瘤组织的穿透力强,可以与其他效应分子连接成抗肿瘤融合蛋白等特点,是保持抗体亲和性和特异性的最小功能性抗体片段,广泛应用于医学和生物技术研究领域。文章介绍了ScFv的特点、基因来源、构建、表达及其在肿瘤的诊断和治疗中的应用研究进展。     

包菜废弃物好氧堆肥初始条件研究

为建立适宜叶类蔬菜废弃物的快速好氧堆肥工艺,以包菜废弃物为主要堆肥原料,探索包菜废弃物直接堆肥或添加少量辅料情况下堆肥的可能性,以及叶菜废弃物细碎程度对堆肥效果的影响,共设置两个试验。试验一,调节包菜废弃物和秸秆粉混合物料初始含水量分别至70%、65%、60%、55%、50%,结果表明,当含水量低于70%时,混合物料外观以秸秆粉的黄褐色为主,且含水量在最优状态时（50%～60%）,碳氮比难以在理想状态（20～40）。试验二,以不粉碎、不添加秸秆的包菜废弃物堆肥为对照,设置不粉碎、粗粉碎、细粉碎3个处理（均添加5%秸秆）,测定堆肥温度、pH、有机质、养分、种子发芽指数和电导率。结果表明,包菜废弃物直接堆肥能完成整个堆肥过程;相较于对照,添加秸秆粉显著提升了堆肥温度、pH、有机质及种子发芽指数,降低了养分含量和电导率;粉碎程度对有机质、养分、种子发芽指数、电导率没有显著影响。因此,高含水量的包菜废弃物在不脱水、不粉碎的情况下,添加少量秸秆即可取得较好的堆肥效果。     

高产优质抗病杂交稻Ⅱ优69的选育

Ⅱ优69(原名N069、红庙2号)是用恢复系恩恢69与不育系Ⅱ-32A组配而成的杂交水稻优质新组合.该组合具有米质优、产量高、抗稻瘟病等特点.2005年3月通过湖北省农作物品种审定委员会审定.     

利用嫁接技术改造老茶园的研究

以鸠坑种为砧木,采用不同的嫁接方法、嫁接时期和嫁接组合,进行改造老茶园的研究。结果表明：（１）培土代绑的嫁接方法操作简便,成活率较高;塑料膜捆扎切接,技术要求较高,但接后芽梢抽生快,并且无需增有与浇水工作,在一定地区有应用价值。（２）在杭州的气候条件下,５－１０月是嫁接适期,但应注意７－８月引起热危害而降低嫁接成活率,５月下旬、６月和９月嫁接成活率均在８５％以上。（３）砧木庞大根系有利接穗伤口愈合     

惠民短枝红富士、首红苹果的生物学特性及适应性

对短枝型苹果优良新品种惠民短枝红富士和首红的生长结果习性,果实经济性状以及适应性等进行了调查研究。结果表明：这两上品种在黔西北咸宁等县种植,具有树势强健,树冠较小,萌芽率高,成枝力弱,以短果枝结果为主,结果早,易丰产,果实较大,颜色鲜艳美观,风味好等特点,适宜在黔西北苹果适宜区大力发展。     

六盘山叠叠沟华北落叶松人工林叶面积指数的时空变化特征

在具有半干旱气候的宁夏固原六盘山区叠叠沟小流域,于2009年整个生长季内(5-10月)监测了典型阴坡坡面上的华北落叶松人工林不同坡位的7个样地的林冠层、林下灌木层和草本层的叶面积指数(LAI)的数量变化和季节动态.结果表明:(1)华北落叶松不同样地的林冠层LAI随坡位升高的变化趋势基本上是逐渐减小,从坡下部的1.52～...