凝结芽胞杆菌的生物学功能及其在畜禽生产中的应用研究进展

凝结芽胞杆菌兼具乳酸菌和芽胞杆菌双重生物学功能,因具有良好的耐胃酸、耐胆盐、耐高温和耐储存等性能而受到广泛关注。就凝结芽胞杆菌的生物学功能及其在畜禽生产中的应用进行了综述,以期为凝结芽胞杆菌在畜禽生产中的应用研究提供参考。     

猪囊尾蚴头节单链抗体-PE40重组载体的构建及表达

从绿脓杆菌ATCC27853菌株中提取基因组,PCR扩增PE40基因,与pMD18-T栽体连接并转化感受态大肠杆菌JM109中,构建重组质粒pMD-PE40;经鉴定正确后将PE40基因插入抗猪囊尾蚴头节单链抗体基因重组质粒pMD-ScFv中,构建重组质粒pMD-ScFv-PE40,经酶切、电泳回收目的片段,并亚克隆到表达栽体pET-28a中,构建重组表达载体pET-ScFv-PE40;鉴定后转化E.coli BL21,IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western blotting验证.结果表明,试验成功构建了重组表达载体pET-ScFv-PE40,目的片段约为1800 bp;Western blotting证明重组蛋白具有一定的反应原性,为重组免疫毒素的制备及动物保护性试验奠定了基础.     

蓝舌病病毒衣壳蛋白VP2、VP5、VP7酵母双杂交诱饵质粒的构建及鉴定

蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)的结构主要由3层衣壳蛋白组成,其中VP2、VP5蛋白构成了BTV的外层衣壳,VP7蛋白构成了BTV的中间衣壳,最内层衣壳则由VP3蛋白构成。VP2、VP5及VP7蛋白在BTV侵染宿主细胞的过程中起着非常重要的作用。为了研究BTV与宿主细胞相互作用的分子机制,本研究将BTV的VP 2、VP 5、VP 7基因分别克隆到pGBKT7载体中,成功构建了pGBKT7-VP2、pGBKT7-VP5与pGBKT7-VP73个诱饵质粒,且通过自激活和毒性验证,证明所构建的3个质粒均无自激活作用,对酵母细胞无毒性作用。本研究为今后利用酵母双杂交筛选VP2、VP5、VP7蛋白中与宿主细胞相互作用的蛋白做好了铺垫,为深入研究BTV与宿主细胞的相互作用奠定了基础。     

槟榔江水牛OXCT1基因的分子特征及组织表达谱分析

本研究对槟榔江水牛3-酮酸辅酶A转移酶1（3-oxoacid CoA-transferase 1,OXCT1）基因的完整CDS区进行了PCR扩增,并对其功能生物信息学和多组织差异表达进行了分析。以普通牛OXCT1基因序列（GenBank登录号：XM_006076397）为参考序列,采用Primer Premier 5.0软件设计引物序列,以提取的槟榔江水牛基因组DNA为模板,PCR扩增获得槟榔江水牛OXCT1基因mRNA序列,扩增产物经测序后利用ORF Finder软件进行开放阅读框识别,获得水牛OXCT1基因CDS区全序列,并对其进行生物信息学分析。结果显示,槟榔江水牛OXCT1基因CDS序列全长1 563 bp,编码520个氨基酸,蛋白分子式为C₂₅₀₉H₄₀₄₁N₆₈₇O₇₄₆S₂₃,分子质量为56.50 ku,理论等电点（pI）为8.69,不稳定系数为27.49,平均疏水性（GRAVY）为-0.097,该蛋白属弱亲水性蛋白。OXCT1蛋白无信号肽和跨膜结构,属于线粒体膜蛋白;包含pcaJ_scoB_fam和AtoD 2个保守结构域,且具有5个功能活性位点。槟榔江水牛与普通牛、藏羚羊等5个物种的OXCT1氨基酸序列同源性≥ 97%。对槟榔江水牛13个组织进行表达谱分析表明,在泌乳期,OXCT1基因在乳腺中表达量最高,在肾脏、垂体、脂肪、大脑、皮肤和肌肉中不表达;在非泌乳期,OXCT1基因在除脂肪以外的其他12个组织中都有表达。OXCT1基因在槟榔江水牛泌乳期乳腺组织中表达量最高,推测其可能参与了水牛的乳脂合成调控事件。本研究结果可为深入了解乳脂合成代谢及其调控机制提供依据。     

非洲猪瘟疫情形势下生长育肥猪饲养管理关键技术

育肥猪的科学饲养与管理直接影响猪场经济效益,非洲猪瘟疫情形势下的育肥猪生产更是充满挑战与压力。文章旨在针对生长育肥猪养殖的基本环节及操作要点,从环境控制、科学饲养与管理、严格防疫等方面阐述了育肥猪养殖的关键技术,为非洲猪瘟疫情防控形势下的生猪保供复产提供技术支撑。     

新生仔猪的护理——以上海某规模猪场为例

我国养猪业发展迅速,整体水平在不断提高,但是与养殖业较为发达的国家相比仍有一些差距。以每年每头母猪断奶的仔猪数（PSY）为例,目前国外养猪发达国家PSY普遍已超30头,而我国却仍在25头左右,仍有较大的提升空间。仔猪护理工作在生猪生产过程中尤为重要,一旦护理措施不当就会造成仔猪死亡,从而降低PSY,直接影响到养猪企业的经济效益。规模猪场仔猪死亡的主要原因就是由于仔猪护理不当所引起的,仔猪护理问题一直是养猪业的一个难题。文内以2020年4—5月上海某规模猪场某栋产房新生仔猪（共477头,其中压死8头,瘦弱致死12头,腹泻致死亡的32头）为例,介绍规模猪场的仔猪护理及注意事项,以期为仔猪护理工作提供借鉴。     

Expression kinetics of chicken β2-microglobulin and Class I MHC in vitro and in vivo during Marek’s disease viral infections

Marek’s disease virus (MDV) is a highly cell-associated herpesvirus that causes a disease in chickens characterized by tumor formation and immunosuppression. The changes of major histocompatibility complex (MHC) expression in different MDV-infected cells are not completely understood. In this study, we investigated the expression of the Class I MHC and β2-microglobulin (β2m) genes in response to MDV infection at different time points by real-time PCR. In both in vitro and in vivo, the expression levels of Class I MHC and β2m genes were upregulated during early MDV infections in comparison to control cells; We also found that the expression of Class I MHC gene was downregulated in BudR (5-bromo-2′-deoxyuridine)-treated MSB1 cells at 48 h and MDV-infected chicken embryo fibroblast cells (CEF) at 120 and 168 h post infection (hpi); Furthermore, compared to control groups, Class I MHC and β2m expression levels were downregulated in peripheral blood lymphocytes (PBLC) from MDV-infected chickens at 14 and 28 days post infection (dpi); Interestingly, both Class I MHC and β2m gene expression levels increased again in PBLC from MDV RB1B-infected chickens at 35 dpi, in which MDV was in the latent or transformed infection stages. In addition, Class I MHC expression was clearly decreased in MDV-infected CEF at 120 hpi although β2m expression was significantly increased. These changes in Class I MHC and β2m gene expression might provide more insights into host-virus interaction.     

山羊毛霉菌病临床与病理学观察

以１０７个／ｍｌ微小根毛霉（Ｒｈｉｚｏｍｕｃｏｒｐｕｓｉｌｕｓ）孢囊孢子悬液颈静脉接种２月龄山羊,每只５ｍｌ,每日１次,连续３日,经８８ｄ观察３／４只山羊死亡。病羊临床表现精神沉郁,消瘦,体温升高,腹泻,后肢瘫痪,白细胞总数及嗜中性白细胞成倍增加,全血ＧＳＨ－ＰＸ活性降低,Ｓ－ＧＯＴ、Ｓ－ＧＰＴ和ＡＫＰ活性升高,血清胆固醇值上升,但以上各项血液生化指标变化与对照羊相比差异不显著（ｐ＞０．０５）。病理变化为全身扩散性毛霉菌病,其典型病变在肺脏,整个肺脏遍布灰白色圆形小结节。镜险肺结节中心为毛霉菌丝或碎片,周围淋巴细胞、单核细胞包绕。腿肌大部分肌束呈凝固性坏死,周围微血管内形成血栓