RNA干扰抑制猪繁殖与呼吸综合症病毒N基因表达及病毒复制

根据siRNA设计原则,选取了PRRSV N基因上的保守序列作为可能的干扰位点,设计、合成了3个siRNAs,分别将其克隆到pSIREN-Shuttle中,获得3个siRNA重组表达质粒:pShuttle-NI,pShuttle-N2和pShuttle-N3.将siRNA重组表达质粒与融合表达质粒pEGFP-ORF7共...     

新疆野苹果的不同种下类型染色体核型分析

【目的】新疆野苹果（Malus sieversii）是新疆伊犁地区的主要野生苹果种质资源,是中国苹果资源中的独特分支,加强该资源的研究对保护苹果种质资源的丰富性具有重大意义。对新疆野苹果的不同种下类型进行细胞学分类,探讨新疆野生苹果种下类型之间的亲缘关系,为新疆野苹果资源的保护、开发与利用提供科学依据。【方法】以采自伊犁的新疆野苹果24个种下类型为研究对象,在4月初至4月中旬,选取其幼嫩的茎尖,采用改进的适合新疆野苹果核型分析的染色体制片方法进行压片,并根据不同种下类型染色体数目及其相对长度、平均臂比等核型指标,观察分析新疆野苹果24个种下类型染色体的核型特征。【结果】（1）新疆野苹果24个种下类型均为二倍体,染色体数目为34条,所有种质染色体相对长度平均值为3.23 μm,属小染色体。从着丝点位置观察,多数类型均含有不同数量的m和sm染色体,个别类型只有m染色体,核型公式为2n=2x=34=34m、2n=2x=34=30m+4sm、2n=2x=34=28m+6sm、2n=2x=34=32m+2sm等4种类型。从染色体长度观察,除了香酸野苹果和长柄红霞果以外,其他的类型均含有不同数目的长染色体（L）、中长染色体（M2）、中短染色体（M1）以及短染色体（s）等4种类型,没有发现随体。（2）染色体结构特征方面,新疆野苹果24个种下类型染色体的平均臂比为1.27-1.56,核型不对称系数为56.01%-63.39%。核型类型大部分为1A和1B型,也有个别的2A和2B;1A、1B、2A、2B所占的比例分别为41.67%、37.5%、8.33%和12.50%。（3）进化趋势图显示,黄圆野苹果最为特殊,其核型不对称系数最高（63.39%）,其进化程度最高,其次是霍城圆果野苹果和清香野苹果,小花野苹果的进化程度最低（56.01%）;其余20个种下类型进化趋势具有较高的一致性,趋势较为集中;其中,大扁心野苹果的进化程度最低。（4）聚类分析显示,24个种下类型分为3类,第一类包括9个种下类型,它们具有较高的核型特征相似性,大多数类型的平均臂比大于其他类型,结合进化趋势结果,发现它们的进化趋势比别的类群较高;第二类包括11个,核型类型大多数为1B、2A、2B;第三类4个类型,它们的平均臂比和核型不对称系数最小,核型类型属于1A和1B,说明这类群的遗传相对稳定。【结论】新疆野苹果24个种下类型的核型特征有一定差异,根据核型特征,可以对其进行分类;与传统分类方法比较,其揭示的种下类型之间的亲缘关系更加明晰,聚类结果更能反映出类型之间的一致性与差异性。结合核型特征可初步判断种下类型的进化趋势,这对进一步研究新疆野苹果种下类型的系统进化有重要参考作用。     

拟南芥T1N6_22在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能分析

【目的】明确拟南芥抗灰霉病基因T1N6_22在抗Pst DC3000过程中的功能,分析T1N6_22影响拟南芥对Pst DC3000的抗性原因。【方法】对t1n6_22突变体和转基因回复突变体（t1n6_22/T1N6_22）接种Pst DC3000,检测其症状;采用间苯胺蓝染色法检测接种突变体中胼胝质的积累情况;测定接种叶片中Pst DC3000的生长量,明确T1N6_22在拟南芥抗Pst DC3000过程中的功能。利用RT-PCR技术,检测SA、JA和ET对T1N6_22表达的影响及T1N6_22对抗病防御相关基因表达的影响;利用quantitative real-time PCR技术,检测Pst DC3000对T1N6_22及抗病相关基因表达的影响,分析T1N6_22影响拟南芥对Pst DC3000的抗性原因。【结果】t1n6_22突变体接种Pst DC3000后表现明显的抗病症状,而回复突变体t1n6_22/T1N6_22和拟南芥野生型表现明显的感病症状。SA处理拟南芥野生型,T1N6_22的表达量明显增强,经JA和ACC处理,该基因的表达量无显著变化。t1n6_22突变体中,PAL、PR4、PPO、SOD和CAT的表达水平均明显高于野生型Col-0和转基因回复植株。接种Pst DC3000后,拟南芥野生型中T1N6_22及抗病相关基因PR1、PR3、PR5和PDF1.2的表达量明显增强。【结论】T1N6_22在拟南芥抗Pst DC3000过程中起负调控作用,T1N6_22的表达受SA诱导,可能主要通过调节植物的次生代谢产物的分泌影响拟南芥对Pst DC3000的抗性。     

(土娄)土区不同蔬菜对钾肥的肥效反应

在陕西省关中土娄土区布置线辣椒、甘蓝、白菜、芹菜钾肥大田试验,研究不同蔬菜对钾肥的肥效反应。结果表明,增施钾肥可使蔬菜硝态氮含量降低11.8%～116.0%,维生素C含量增加0.4～147.4mg/kg;产量增加9.3%～33.8%;明显促进营养生长和生殖生长;400cm深土壤剖面硝态氮累积量减少22.7～48.0kg/hm2,尤其在80～220cm剖面减少最为明显。     

新型花茶的香气特征研究

研究新型花茶的香气特征及其化学组成,采用感官审评法和超临界CO₂萃取法,并结合气相色谱-质谱仪联用技术,对香气特征和精油成分进行了分析鉴定。结果表明,新型花茶的香气具有馥郁高雅、芬芳持久、茶香协调的特征,从其精油中共分离出121个峰,分析鉴定出103种成分,占总面积的99.51%。相对含量较高的8种成分为：邻苯二甲酸二异丁酯（8.81%）、大根香叶烯D-4-醇（6.28%）、β-芳樟醇（3.39%）、二十一烷（3.58%）、四甲基环癸二烯甲醇（2.76%）、茉莉酮酸甲酯（2.31%）、库毕醇（2.24%）、二十烷（2.23%）。4-甲基-反式-3-硫杂双环[4.4.0]葵烷、环氧化马兜铃烯、1-氯十八烷、3-十二烷基-2,5-呋喃二酮等成分属首次分离。     

阿夫及其衍生小麦品种（系）的SSR分析

为了研究小麦骨干亲本阿夫(Funo)遗传物质在其衍生品种(系)的传递规律,用247对SSR引物对阿夫和8个阿夫子一代衍生品种(系)的亲本进行分析,发现有3个标记Xwmc398 (178 bp, 151 bp)、Xgwm400(180 bp, 149 bp)和Xgwm268(191 bp)在阿夫上有稳定、清晰的特异带。以筛选的特异引物对5个阿夫系选品种和255个阿夫衍生品种(系)进行了SSR分析。结果表明,Xwmc398在5个系选品种中均有阿夫的特异带,而Xgwm400只在安选2号,Xgwm268只在扬麦1号具有阿夫特异带。Xwmc398在阿夫子一代至子六代衍生品种(系)中的遗传频率分别为52.8%、38.4%、16.7%、0.0%、0.0%和0.0%, 平均为32.2%;Xgwm400的相应遗传频率分别为32.1%、19.2%、41.7%、33.3%、20.0%和0.0%,平均为26.7%;Xgwm268的相应传递率分别为22.6%、34.4%、11.1%、12.1%、0.0%和0.0%,平均为24.7%。表明SSR位点Xwmc398、Xgwm400和Xgwm268在阿夫衍生品种(系)中有明显的传递。     

钙盐诱导下土壤锰和铁的释放及其对胡椒的生物有效性

Releases of manganese and iron ions from an albic soil (Albic-Udic Luvisol), a yellow-red soil (Hap-Udic Ferrisol) and a yellow-brown soil (Arp-Udic Luvisol) induced by calcium salt addition and their bioavailability to pepper (Capsicum frutescens L.) were studied in a pot experiment. Addition of Ca(NO₃)₂ decreased soil pH and increased both exchangeable and DTPA (diethylenetriamine pentaacetic acid)-extractable Mn and Fe in soils. Meanwhile, total Mn accumulation in the shoots of Capsicum frutescens L. on the salt-treated soils increased significantly (P< 0.01) compared with the control, suggesting that salt addition to soil induced Mn toxicity in Capsicum frutescens L. Although exchangeable and DTPA-extractable Fe increased also in the salt-treated soils, Fe uptake by the shoots of Capsicum frutescens L. decreased. The effect of added salts in soils on dry matter weight of pepper varied with the soil characteristics, showing different buffer capacities of the soils for salt toxicity in an order of yellow-brown soil > albic soil > yellow-red soil. Fe/Mn ratio in shoots of Capsicum frutescens L. decreased with increasing salt addition for all the soils, which was ascribed to the antagonistic effect of Mn on Fe accumulation. The ratio of Fe/Mn in the tissue was a better indicator of the appearance of Mn toxicity symptoms than Mn concentration alone.     

爬山虎水提液与抗菌药联用对含fosA3基因大肠杆菌的抑菌效果

[目的]探讨爬山虎水提液与抗菌药联用对含fosA3基因大肠杆菌的抑菌效果,为爬山虎的综合开发利用提供参考依据.[方法]从病猪的肠道组织分泌物中分离菌株,对其进行鉴定和fosA3基因检测,采用二倍微量稀释法检测爬山虎水提液与不同抗菌药的最小抑菌浓度(MIC),然后用微量棋盘稀释法测定爬山虎水提液与抗菌药联用的抑菌浓度指数(FICI).[结果]分离获得的菌株为含fosA3基因大肠杆菌,爬山虎水提液对含fosA3大肠杆菌的MIC为500g/mL.以500 g/mL爬山虎水提液与头孢曲松钠、磷霉素、粘杆菌素、痢菌净、磺胺间甲氧嘧啶、阿米卡星、头孢噻呋钠、氟苯尼考、头孢噻肟等9种抗菌药联用的FICI为0.188～1.000,其中,爬山虎水提液与粘杆菌素、氟苯尼考间存在协同作用,与头孢曲松钠、磷霉素、痢菌净、磺胺间甲氧嘧啶、阿米卡星、头孢噻呋钠、头孢噻肟呈相加作用.[结论]爬山虎水提液可增强部分抗菌药对含fosA3大肠杆菌的抗菌活性,且呈协同或相加作用.     

5个种源铁皮石斛的光合特性

为了解不同种源铁皮石斛Dendrobium officinale的光合特性,采用Li-6400光合测定系统对5个铁皮石斛（浙江庆元、浙江天台、浙江武义、云南广南、云南麻栗坡）种源光合速率及光强响应曲线进行了测定分析。结果表明:铁皮石斛净光合速率、光补偿点、光饱和点均较低,不同种源间存在一定的差异（P＜0.05）。铁皮石斛的光合特性表现出阴生植物的特性,对光照的需求不强,在设施栽培过程中要控制光照强度,促进铁皮石斛优质、低碳、高效生产。图6表1参8     

Construction and Virulence of Filamentous Hemagglutinin Protein B1 Mutant of Pasteurella multocida in Chickens

Pasteurella multocida, a Gram-negative nonmotile coccobacillus, is the causative agent of fowl cholera, bovine hemorrhagic septicemia, enzoonotic pneumonia and swine atropic rhinitis. Two filamentous hemagglutinin genes, fhaB1 and JhaB2, are the potential virulence factors. In this study, an inactivationfhaB1 mutant ofP. multocida in avian strain C48-102 was constructed by a kanamycin-resistance cassette. The virulence of thefhaB1 mutant and the wild type strain was assessed in chickens by intranasal and intramuscular challenge. The inactivation offhaB1 resulted in a high degree of attenuation when the chickens were challenged intranasally and a lesser degree when challenged intramuscularly. ThefhaB1 mutant and the wild type strain were investigated their sensitivity to the antibody-dependent classical complement-mediated killing pathway in 90% convalescent chicken serum. ThefhaB1 mutant was serum sensitive as the viability has reduced between untreated serum and heat inactivated chicken serum （P〈0.007）. These results confirmed that FhaB1 played the critical roles in the bacterial pathogenesis and further studies were needed to investigate the mechanism which caused reduced virulence of the fhaB1 mutant.