牛TLR4基因的遗传多态性与乳房炎的关联分析

TLR4通过识别病原体而激活免疫细胞，在先天免疫和适应性免疫防御中起着重要作用。以中国荷斯坦奶牛、三河牛和中国西门塔尔牛共397头为研究对象，利用创造酶切位点PCR法扩增243bp的目的片段，通过限制性内切酶HinfⅠ酶切来检测TLR4第3外显子的多态性，结果发现扩增产物的27bp处C到T的突变使得多态位点产生，编码的氨基酸由苏氨酸变为异亮氨酸。A、B2个等位基因在3个群体中均有分布，A等位基因占优势（大于78％），经χ^2适合性检验，三河牛在该位点未达到Hardy-Weinberg平衡状态（P〈0．05）。运用SAS8．2软件采用最小二乘法拟合线性模型，将该基因座不同基因型与奶牛乳房炎进行了关联分析，结果表明：AA基因型为乳房炎抗性基因型（P〈0．05），A等位基因为乳房炎抗性的有利基因。     

用绵羊小肠液冻干粉测定饲料过瘤胃淀粉小肠消化率方法的研究

本试验旨在以玉米为样本筛选用绵羊小肠液冻干粉测定精饲料瘤胃非降解残渣淀粉小肠消化率的最佳培养条件。分别研究了小肠液冻干粉用量(0.2、0.3、0.4、0.5和0.6g)对16h玉米瘤胃非降解残渣干物质和淀粉小肠消化率的影响;离体培养时间(4、8、12、16、20和24h)对16h玉米瘤胃非降解残渣干物质和淀粉小肠消化率的影响。结果表明,在本试验条件下,绵羊小肠液冻干粉测定玉米瘤胃非降解残渣淀粉小肠消化率的最佳用量为0.45g小肠液冻干粉/0.56g玉米瘤胃非降解残渣,最佳培养时间为12h。利用绵羊小肠液冻干粉测定常用饲料过瘤胃残渣淀粉小肠消化率的方法是可行的。     

小尾寒羊白介素1β全长cDNA序列克隆及生物信息学分析

本研究旨在克隆白介素1β(IL-1β)全长cDNA,为深入研究其生物学功能提供全长cDNA信息和试验材料.本试验利用前人构建的布鲁氏菌强、弱毒株感染小尾寒羊白细胞层抑制性差减杂交(SSH)cDNA文库,获得小尾寒羊IL-1β部分cDNA序列信息,利用cDNA末端快速扩增技术(RACE),克隆小尾寒羊IL-1β全长cDNA,并申请GenBank登录号KC425612.2.该cDNA全长1494 bp,含有801 bp开放阅读框(ORF),可编码266个氨基酸残基,预测其编码蛋白分子质量为30.622 ku,与林麝、牛、海豚、虎鲸的IL-1β一致性较高,亲缘关系较近.     

青海血蜱cDNA表达文库的免疫学筛选和阳性克隆的鉴定

为获得抗青海血蜱免疫原基因，用免抗青海血蜱差异蛋白阳性血清和兔抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清对青海血蜱cDNA表达文库进行了免疫学筛选，经过初筛和复筛共获得58个阳性信号。用所得阳性噬菌体转染宿主菌BM25．8使之自动亚克隆为重组质粒，用此亚克隆质粒转化宿主菌JM109并从中提取重组质粒进行PCR、酶切和测序分析。序列分析表明：共获得新cDNA序列21个。将前5个cDNA登录GenBank／ncbi，获取登录号。所获阳性克隆为青海血蜱保护性抗原的筛选奠定了基础。     

秦川牛血液蛋白多态性与繁殖性状关系的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术测定了秦川牛（148头）血红蛋白（Hb）、运铁蛋白（Tf）、后运铁蛋白（PTf）、血清白蛋白（Alb）和后白蛋白（Pa）的遗传多样性。分析了各多态座位不同基因型与秦川牛若干繁殖性状的关系。结果表明：HbAA型母牛的初情期年龄（AFS），初产年龄（AFC）极显著早于HbAB型母牛（P〈0．01）。TfAA型母牛的初情期和初产年龄显著早于TfDD型母牛（P〈0．05）。PTf SS型母牛的初情期显著早于PTf FS型母牛和PTf FF型母牛（P〈0．05）。Alb AA型母牛的初情期显著早于Alb AC型母牛（P〈0．05）。Tf A基因对D基因的替代平均效应值初情期提前1．68d，初产年龄提前19．89d。AlbA基因对B基因的替代平均效应值初情期提前8．06d。     

两株乳酸菌对鸡新城疫HI抗体效价影响的研究

本研究利用两株乳酸杆菌Lcaseizhang和MG 2-1制成乳酸菌液和发酵乳以不同的剂量给雏鸡灌服,在10日龄和28日龄进行2次新城疫疫苗(IV系)滴鼻点眼免疫,在二免后的第7 d和14 d检测血凝抑制效价。结果表明,与对照组相比,试验各组抗体水平均达到显著或极显著水平,可提高抗体水平0.61~1.77(log2)。由于菌株、剂量等的差异,各试验组在提高抗体水平上也有所不同。两株乳酸杆菌制成乳酸菌液和发酵乳对雏鸡免疫机能均有促进作用。     

饲喂乳酸菌对小白鼠血清中IgG及肠道中SIgA影响的研究

本试验以2株乳杆菌MG2-1、L.casei.zhang按不同剂量分别饲喂小鼠,在5、10、15、20、25、30d测定其血清中IgG及肠道内SIgA含量,结果表明饲喂不同剂量的2株菌的乳悬液均能极显著提高IgG、SIgA含量(P<0.01)。对提高IgG含量方面两菌株均表现出低、中剂量饲喂组随着饲喂时间不断增加,有超过高剂量组的趋势。在第25d时,菌株MG2-1组,中剂量组极显著的高于高剂量组,L.casei.zhang组低剂量极显著的高于中、高剂量组。而SIgA水平高剂量组比低、中剂量组高。     

苜蓿皂甙对绵羊氮平衡及生产性能的影响

选用12只2周岁体况良好,体重35 kg的内蒙古半细毛羯羊,随机分成4组,每组3头,分别饲喂4种不同水平苜蓿皂甙的日粮(0、8、16、32 g/d)。试验结果表明,在试验期内,苜蓿皂甙对绵羊氮平衡及生产性能有影响。当苜蓿皂甙添加量为8g/d时,氮沉积及日增重最高。     

胶体金免疫层析法检测猪PRV gE抗体方法的建立及应用

利用PCR技术从猪伪狂犬病毒基因组中克隆gE抗原表位基因，并将其插入到载体pET-22b（＋）中，构建成原核表达质粒pET-22b（＋）-gE，使其在E．cobBL21（DE3）中诱导表达，经瘫点杂交证实表达产物具有抗原性。表达产物纯化后作为抗原，结合胶体佥标记技术，运用双抗原夹心法于国内首先建立了猪PRV gE抗体检测的免疫层析试纸务。该方法操作简单灵敏度高、特异性好，适合猪伪狂犬病的临床诊断。     

分光光度法测定盐霉素的含量

研究了分光光度法测定盐霉素含量的方法.检测波长为528 nm,以95%乙醇为溶剂,4%香草醛溶液为显色剂,显色温度70～74 ℃,显色时间40 min.盐霉素浓度在40～280 u/mL范围内与吸光度呈线性关系,相关系数0.999 6(n=6),回收率在100.1%～100.8%(n=5);RSD在0.8%～1.2%.本法适用于制药厂盐霉素生产的中间体质量控制.