不同窖藏时间丹溪红曲酒活性成分及抗氧化评价

为探究不同窖藏时间（3、5、8、15和20年）丹溪红曲酒的活性成分及抗氧化能力,参照GB/T 13662—2018《黄酒》的方法对酒精度、总酸、pH、总糖和非糖固形物含量进行测定,采用3,5-二硝基水杨酸比色法对还原糖进行测定,采用福林酚法对总多酚和总黄酮含量进行测定,利用1,1-二苯基-2-苦肼基（DPPH）自由基清除能力和氧自由基吸收能力（ORAC）评价红曲酒的体外抗氧化能力,并且运用高效液相色谱（HPLC）法测定红曲酒中洛伐他汀的含量。结果表明：1）总糖含量随着窖藏时间的增加先降低后升高,窖藏20年的红曲酒总糖和还原糖的质量浓度最高,分别为46.92和22.35g/L;非糖固形物的含量随着窖藏时间的增加先升高后降低,窖藏8年的红曲酒非糖固形物的质量浓度最高,为33.95g/L;2）总多酚及总黄酮含量随着窖藏时间的增加先小幅升高后降低,窖藏5年的红曲酒总多酚及总黄酮质量浓度最高,分别为6.49和4.23mg/mL;3）各窖藏时间红曲酒均具有较强的抗氧化能力,其中窖藏3年的红曲酒对DPPH自由基的清除能力最强,8年红曲酒具有最高的ORAC值;4）各窖藏时间红曲酒中洛伐他汀含量较为稳定...     

嗜水气单胞菌疫苗的检验及免疫效力试验

选用嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ,Ａｈ）疫苗生产用菌Ｊ－１株,以气升式发酵罐２８℃通气培养２８ｈ,制备嗜水气单胞菌疫苗用菌液。半成品检验表明,该疫苗用菌液内无杂菌生长,细菌数量达２．７×１０１０ｃｆｕ／ｍｌ。以０．４％福尔马林溶液３７℃灭活２４ｈ,制成灭活疫苗。经成品检验,该疫苗为棕黄色液体,涂布平板无活菌生长,以１×１０７ｃｆｕ攻击６尾健康鲫鱼,１周内鲫鱼无异常反应。取该疫苗分别以腹腔注射和浸泡两种方式各免疫１２尾鲫鱼,１月后以同源强毒菌株攻击,疫苗的相对存活率分别为８３．３％和５８．３％。     

河南省樱桃谷鸭乙型肝炎病毒全基因组克隆与序列分析

对河南省樱桃谷鸭主产区信阳、新郑、焦作三地628份樱桃谷鸭血清样本应用PCR技术进行鸭乙型肝炎病毒（DHBV）检测,并将三地DHBV阳性样本各挑选1份进行DHBV全基因的扩增、克隆、测序及序列分析。结果显示,信阳、新郑、焦作三地樱桃谷鸭DHBV自然携带率分别为10.5%、8.9%、17.6%;3株DHBV基因组全长分别为3 021、3 027、3 024bp,均含有编码P、S和C蛋白的3个开放阅读框,各开放阅读框氨基酸同源性比较显示差异显著的区域位于P蛋白。序列分析显示,3株DHBV河南株核苷酸同源性为89.8%~93.9%,与参考株为89.4%~99.5%。遗传进化分析及P蛋白关键位点分析结果表明,信阳分离株为西方基因型,其余2株为中国基因型。本试验掌握了河南省樱桃谷鸭主产区DHBV自然感染情况,并成功克隆了3株樱桃谷鸭DHBV全基因序列,为该病毒的进一步研究提供了有益信息。     

我国部分地区牛支原体肺炎和关节炎的病原体诊断

重庆等4省市从外省引进的肉牛群发生以严重肺炎和关节炎为主要表现的疾病。该病的病变主要集中于肺脏,其组织学变化主要是间质增生,纤维素渗出,干酪样坏死,淋巴细胞、嗜中性粒细胞和单核细胞浸润。PCR检测病牛肺脏显示牛支原体阳性,而丝状支原体丝状亚种、牛分支杆菌和多杀性巴氏杆菌为阴性。从肺等组织中分离到牛支原体以及大肠杆菌、沙门氏菌、链球菌、葡萄球菌和烟曲霉,没有分离到巴氏杆菌。结果显示本病是以牛支原体感染为主引起的牛支原体肺炎和关节炎,长途运输等应激因素是该病突发的重要诱因,其他细菌和/或真菌继发感染加重了病情。     

鹅细小病毒VP3蛋白B细胞线性表位的精确定位

本试验旨在利用获得的4株抗鹅细小病毒(GPV)VP3的单克隆抗体,进一步对GPV VP3 B细胞线性抗原表位精确定位。根据笔者实验室已鉴定的线性抗原表位区结果,筛选出单抗所针对的优势抗原表位区。设计并合成互相重叠5 aa的10 aa短肽寡聚核酸片段,退火后,连入pET-32a载体,经转化鉴定,诱导表达后,获得相应的小片段融合蛋白,并利用单抗通过Western blot进行抗原性鉴定。同样方法进行短肽片段两端氨基酸的逐个缺失设计,进一步精确定位,结果鉴定出2个抗原表位,分别为430-435 aa和643-647 aa。     

监测口蹄疫抗体的液相阻断ELISA法的改进和体会

液相阻断ELISA（LBE）法由于具有高度的敏感性、特异性和重复性,目前被广泛应用于动物免疫抗体效果监测实践工作中,特别是为防控牛、羊亚洲I型口蹄疫（FMD）做出了积极的贡献。但该方法操作繁琐,稍有不慎就会导致实验结果发生偏差或试验失败,笔者就该方法应用于亚I型口蹄疫抗体检测中的改进和体会作一总结。     

禽I型副粘病毒广西分离株F基因序列及毒力的研究

对源于鸡、鹅、鸽的 9株APMV_1广西分离株及我国常用的中发型疫苗毒株I系 (Mukteswar株 )的F基因N_端前段进行了RT_PCR扩增 ,产物进行核苷酸序列测定 ,用基因分析软件DNAStar进行分析并与已发表的其它参考毒株进行比较。结果发现 ,广西分离株在裂解位点的氨基酸组成和排列均符合强毒株的特征 ;根据F基因绘制的系谱树来看 ,广西鸡和鹅分离株都归属于基因型VII,证实近年来广西流行的基因型与国内其他地区的相同 ;并发现中发型疫苗毒株I系 (Mukteswar株 )也属于基因型VII。研究还对分离株进行了常规的毒力和致病性测定试验 ,并与根据F基因序列特征判定的结果相比较 ,结果发现其中一株鸽源和两株鹅源分离株根据常规方法判定的结果与毒株在临床上的致病性不相符 ,而根据F基因序列特征判定的结果与毒株在临床上的致病性相一致     

海兰褐蛋鸡早期生长模型的拟合与分析简

为了掌握海兰褐蛋鸡早期的生长发育规律,运用Gompertz、vonBertalanffy和Richards三种非线性模型对0～10周龄的海兰褐蛋鸡体重数据进行了拟合与分析。结果表明：三种模型均能很好地模拟海兰褐蛋鸡早期的生长过程,拟合度均在0．99以上,但vonBertalanffij模型拟合效果更好,此模型拟合的生长曲线拐点周龄为19．98周,拐点体重为2358．44g,最大周增重为159．94g／周。yonBertalanffy模型在模拟海兰褐蛋鸡早期生长状况方面为理想的数学模型,此研究结果可作为科学饲养该鸡种的重要参考。     

血清2型猪链球菌河南分离株毒力基因的鉴定及其cps2j全基因序列分析

为了解血清2型猪链球菌(S.suis2)河南分离株的毒力基因型及cps2j全基因突变情况,本研究扩增S.suis2毒力基因gdh、cps2j、mrp、ef 、sly、orf2和fbps,并对s.suis2的cps2j进行全基因序列测定和同源性分析.结果表明,gdh、cps2j、mrp、ef、sly、orf2和fbps基因在8个S.suis2分离株中的检出率分别为100％(8/8)、100％(8/8)、62.5％(5/8)、75％(6/8)、87.5％(7/8)、100％(8/8)和100％(8/8);其中cps2j全基因核苷酸及推导的氨基酸序列与来源不同的S.suis2分离株同源性分别达98％和97％以上,以该基因构建的系统发育树表明8株S.suis2河南分离株与国内外不同参考株同源性高,亲缘关系密切.     

猪瘟退出强制免疫后的若干问题

猪瘟在我国被列为一类动物传染病,是危害养猪业生产的主要传染病之一。自2007年起,我国制定了以强制免疫为主的猪瘟综合防控策略,在实施了近10年的强制免疫后,我国的猪瘟群体免疫抗体合格率持续维持在较高水平,病原检出率逐年下降,猪瘟临床表现趋于和缓,流行情况趋于稳定。虽然现阶段仍存在原种场、种猪场和商品场的免疫水平参差不齐,不同省份间免疫状况差异较大,诊断、鉴别技术发展相对缓慢等情况,但强制免疫政策的实施有效控制了猪瘟的发生与流行。2017年猪瘟退出了国家强制免疫计划,改为对符合条件的养殖场实行"先打后补"的财政补助政策,这表明我国猪瘟防控取得阶段性成果,猪瘟防控进入了新的历史阶段。但防控也面临着若干新问题:一是养殖者主体责任意识不强;二是病原阳性率与临床发病率匹配度较低;三是疫情监测网络监测效率低;四是如何做好高密度免疫;五是财政支持政策需进行科学调整;六是需研究猪瘟净化方案。解决好这些问题是我国下一阶段猪瘟防控工作的关键:一要明确养殖者的防疫主体责任;二要厘清猪瘟监测阳性率与实际发病率之间关系;三要强化猪瘟监测网络建设;四要建立系统的疫苗效果评价机制;五要优化财政支持政策,充分发挥政府和市场两种资源;六要尽快研究制定符合我国国情的猪瘟净化技术方案。