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通过重叠PCR扩增得到烟草丛顶病毒(Tobacco bushy top virus,TBTV)中国分离物RdRp的编码序列,构建以pMALC2X为基础载体的原核表达载体pMAL-TB-RdRp。0.5 mM IPTG诱导可特异性表达分子量约为120 kDa的MBP-RdRp融合蛋白。温度梯度实验显示,18℃下诱导表达的MBP-RdRp融合蛋白的可溶性比例较高,约17%;经亲和层析纯化的MBPRdRp可特异性识别TBTV正链和负链的3'末端序列,催化体外复制;对正负链的3'末端的体外复制效率存在差别,识别负链3'末端的体外复制效率明显高于正链3'末端。本研究创建的TBTV RdRp介导的体外复制体系为进一步研究TBTV基因组复制调控奠定了基础。 相似文献
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以阿月浑子与黄连木的杂种果实和杂种幼胚为试材,对果实生长发育规律及幼胚培养进行了研究,探讨了胚龄、培养基类型和6-BA浓度等对杂种胚培苗再生的影响。结果表明:(1)杂种果实的纵、横径生长呈“S”型曲线变化,果实鲜质量生长呈双“S”型曲线变化。(2)杂种胚的发育始于授粉后80 d,80 ~ 100 d是杂种胚败育的关键时期。(3)授粉后80 d的杂种幼胚难以成苗,授粉后100和120 d的杂种幼胚成苗率分别为37.04%和83.33%。(4)适宜杂种胚培苗增殖的培养基为:DKW + 2.0 mg · L-1 6-BA + 0.05 g · L-1 IBA + 0.3 g · L-1 LH + 1.5 g · L-1 PVP,增殖系数为3.47,苗高为3.32 cm。(5)适宜杂种胚培苗生根的培养基为:1/2WPM + 2.0 mg · L-1 IBA + 0.05 mg · L-1 NAA,生根率为80%。 相似文献
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以菜薹[Brassica rapa L. ssp. chinensis(L.)Mokino var. utilis Tsen et Lee]为材料,克隆得到1个WRKY转录因子,命名为BrWRKY75。氨基酸序列比对及进化树分析发现BrWRKY75与拟南芥的WRKY75同源性较高,且同属于第Ⅱ类c亚族。实时荧光定量PCR表明BrWRKY75在菜薹叶片衰老过程中表达明显增强。亚细胞定位和转录活性分析显示BrWRKY75定位于细胞核,是一种核蛋白,并且具有转录抑制活性。体外凝胶阻滞试验(EMSA)证实BrWRKY75能与W-box(TTGAC)元件特异结合。上述结果为进一步研究菜薹叶片衰老的转录调控机制奠定了基础。 相似文献
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NaCl胁迫对番茄叶片光合特性及蔗糖代谢的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
为了从碳水化合物生产及代谢的角度分析盐胁迫影响番茄产量和果实品质的原因,以番茄品种‘辽园多丽’为试材,研究不同浓度的NaCl胁迫处理对番茄光合特性及叶片中糖代谢的影响。结果表明:盐胁迫导致番茄叶片的净光合速率下降,NaCl浓度越大降低得越多;盐胁迫降低了番茄叶片的气孔导度、胞间CO2浓度和蒸腾速率,降低了番茄叶片的叶绿素a、b和总叶绿素含量,这种降低与NaCl浓度正相关。NaCl胁迫导致番茄叶片中果糖和葡萄糖大量积累,NaCl浓度越高积累得越多;NaCl胁迫降低了番茄叶片中的蔗糖和淀粉含量;NaCl胁迫后,番茄叶片中的转化酶活性以及蔗糖合成酶活性均有所提高,而且随着盐浓度增加而增大。说明NaCl胁迫破坏了番茄叶片的光合机能,降低了光合作用效率,而且盐浓度越大降低得越多;NaCl改变了番茄叶片中的糖代谢方向,显著增加了淀粉和蔗糖的分解,提高了叶片中的果糖和葡萄糖含量,而且这种影响随着盐浓度增加而增大。 相似文献
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YANG Sheng-xi ZHANG Xiao-yan LUTong-de HA Xiao-qin WANG Hai-yan GENG Pai-li 《园艺学报》2008,24(5):1002-1006
AIM: To investigate the expression of natural killer cell stimulation receptor D(NKG2D) in peripheral blood and the expression of major histocompatibility complex class I chain-related protein A(MICA) on the gastric carcinoma tissue and the neighboring non-cancerous tissue in Tibetan patients with gastric cancer at Qinghai plateau. METHODS: Samples of 33 patients and 20 healthy persons were collected to detect NKG2D in peripheral blood by Flow cytometry analysis. The expressions of MICA in part of the correspondent tissues were examined by RT-PCR and immunohistochemistry.RESULTS: The expression of NKG2D in the plateau of Tibetan patients with gastric cancer group (13.47 ±5.26)% was significantly lower than that in healthy groups (32.62±10.08)%. The mRNA level of MICA in gastric cancer was significantly higher than that in neighboring non-cancerous tissue (P<0.05). The expressions of MICA proteins showed a significant difference between the neighboring non-cancerous tissue (21.21%, 7/33) and the gastric carcinoma tissue (78.79%, 26/33), between the high differentiation (60.00%, 3/5) and the moderate (72.73%, 8/11), low differentiation (88.24%, 15/17). The expressions of MICA were not correlated with tumor size, sex, age, lymph node metastasis of the patients (P>0.05). Spearman rank correlation displayed that the expressions of MICA mRNA were positively correlated with the MICA protein level (r=0.903, P<0.01).CONCLUSION: The immune escape in Tibetan patients with gastric cancer at Qinghai plateau probably relates to the down-regulation of NKG2D and the up-regulation of its ligand MICA. The activity of NK cells and the anti-cancer cellular immunity level are descending in the plateau of Tibetan patients with gastric cancer. The decrease in the receptor NKG2D is a reason for the activity of NK cell descending. 相似文献
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通过对临沂市常见的水生植物的名称,科属、观赏特征、生长区域、生态习性等方面进行详细地介绍,分析水生植物在临沂市应用存在的问题,根据水生植物的特点提出它在园林应用中的常见形式。 相似文献
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免耕播种机是保护性耕作的关键机具之一,其播种质量的好坏在很大程度上影响着保护性耕作的效果。为了优化免耕播种机的关键部件破茬刀,研制了一种圆盘破茬刀切割玉米根茬运动特性测绘装置,该装置能够实现实时地测绘出圆盘破茬刀待测点的运动轨迹。通过对三种圆盘破茬刀的运动轨迹的测绘与试验,得出光面圆盘破茬刀上待测点的运动轨迹为光滑的摆线,半圆型缺口盘和阿基米德螺线盘上待测点的运动轨迹为由不同长度的圆弧组成的云曲线。在此基础上对三种圆盘破茬刀冲击情况、入土滑切角和滑切速度变化进行了分析比较,建立了阿基米德螺线型圆盘破茬刀切割根茬运动的运动学模型。描绘出阿基米德螺线型圆盘破茬刀刃口上点的运动轨迹是由不同长度的圆弧组成的云曲线,建立了阿基米德螺线型圆盘破茬刀刃口上点的运动方程。发现阿基米德螺线型圆盘破茬刀刃口上点的轨迹具备了光面圆盘破茬刀的摆线规律,也具备了半圆型缺口圆盘破茬刀的冲击性,并且滑切角较大,滑切性能更好。通过圆盘破茬刀切割玉米根茬运动特性测绘装置的两因素三水平正交试验分析,得出阿基米德螺线型圆盘破茬刀、机具配重为100 kg时破茬效果达90%以上,破茬率较高。 相似文献