A型流感病毒分型基因芯片在流感病毒各亚型监测中的应用

为验证自行研制的A型流感病毒分型基因芯片方法在实际中的应用效果,了解A型流感病毒各亚型在我国不同地区和不同宿主中的分布情况,对我国20个地区、不同宿主源(鸡、鸭、鹌鹑、鸽子、猪、人等)拭子和组织样品共16 852份进行了检测。利用自行研制的A型流感病毒分型基因芯片方法,对样品进行RNA提取、多重不对称RT-PCR扩增、芯片杂交、洗涤和扫描分析;同时将基因芯片检测阳性的样品,用普通RT-PCR扩增后进行序列测定。结果显示:利用该方法检出阳性样品2 582份,总检出率为15.32%(2 582/16 852),共检测到H1N1、H2N9、H3N2、H4N6、H5N1、H7N1、H7N9、H9N2、H10N5、H16N3等10个亚型,且均与阳性样品测序结果一致。结果表明,该方法可准确检测不同地区、不同宿主中的A型流感病毒不同亚型。同时,该方法能在同一张芯片上准确鉴定A型流感病毒的多种亚型,解决了其他常规方法无法检测已发现和可能发生变异的所有亚型的棘手问题,从而为A型流感诊断和分子流行病学监测提供了一种新技术。     

Periplaneta americana peptide decreases apoptosis of pig-ovary granulosa cells induced by H2O2 through FoxO1

Oxidative stress can induce apoptosis of granulosa cells and lead to follicular atresia, thereby reducing the number of pigs giving birth. The aim of this study was to investigate the protective effect of Periplaneta americana peptide (PAP) on the apoptosis of the granulosa cells of pig ovaries (PGCs) induced by hydrogen peroxide (H₂O₂) via FoxO1. PGCs were treated with H₂O₂ to establish a cell apoptosis model. Cell viability was measured using the cell counting kit-8 (CCK-8) assay, and cell apoptosis was detected using flow cytometry. The malondialdehyde (MDA) level and nitric oxide (NO) content were detected to reflect the oxidative stress. Western blotting, qRT-PCR and overexpression were undertaken to determine the expression of FoxO1 and caspase-3, and immunofluorescence was used to detect FoxO1 in the nucleus and cytoplasm. PGCs were treated with 100 μM H₂O₂ for 6 hr, which resulted in oxidative damage and apoptosis and an apoptosis rate for PGCs of 32.95%. Next, PGCs were treated with 400 μg/ml PAP for 24 hr to repair the apoptosis induced by H₂O₂. PAP improved cell viability in H₂O₂-stimulated PGCs, the increased MDA level and NO content caused by H₂O₂ stimulation were reversed and the apoptotic rate of PGCs was reduced. The qRT-PCR and Western blotting results indicated that PAP decreased the H₂O₂-induced apoptosis and the expression of FoxO1 and caspase-3 in PGCs. The effect of PAP was the same following FoxO1 overexpression. FoxO1 was expressed in the nucleus when stimulated by H₂O₂ or overexpression; however, it migrated to the cytoplasm following PAP treatment. PAP decreased the apoptosis of PGCs induced by H₂O₂ by regulating FoxO1 expression and nuclear translocation.     

甘蓝型油菜耐低温生长生理生化响应机制

为提高甘蓝型油菜耐寒育种过程中的筛选效率，研究甘蓝型油菜耐低温机理，以8个不同抗寒性的甘蓝型油菜为材料，对低温条件下各材料的生物量、叶绿素、脯氨酸和相对电导率进行测定，发现在室外平均气温2.75℃时，抗性材料的生物量、叶绿素和脯氨酸的累积量都显著高于敏感材料，相对电导率没有显著差异；当平均气温7.52℃回升至12.39℃，抗性材料和敏感材料生物量的累积量无显著差异；在恒定低温10℃/4℃处理下抗性材料和敏感材料在处理前3周生物量均持续累积，但从第4周开始敏感材料新叶出现白斑，生物量减少，抗性材料老叶出现白斑，生物量维持不变。结果表明，耐低温材料在低温条件下叶绿素含量受到的影响较小，脯氨酸的积累量持续上升，具有较强的快速适应能力，在低温下具有显著的持续生长优势。     

‘品丽珠’葡萄不同营养系酚类物质差异分析

筛选山东蓬莱产区酿酒葡萄‘品丽珠’黄烷醇、花色素苷含量较高的优良营养系，以期为发挥其酿酒性能提供理论依据。以蓬莱产区品丽珠母本及3个芽变营养系（214、327、623）为试材，采用分光光度计法分析葡萄果皮和种子中总酚、总单宁、总花色素含量，利用高效液相色谱法分析酚酸类、黄酮醇类、黄烷醇类、花色苷单体及白藜芦醇含量。研究结果表明，黄烷醇是种子和果皮中主要的单体酚，其中儿茶素含量最高；二甲花翠素葡萄糖苷是果皮中主要的花色苷。在相同的栽培管理条件和自然条件下，品丽珠不同营养系间的酚类物质差异较明显，相同营养系不同年份间也有显著差异。其中营养系623果皮和种子的总酚、种子的单宁和黄烷醇以及果皮和种子中的酚酸类、单体花色苷含量显著高于其他营养系和母本。     

基于CDIO的应用型本科实践教学模式改革与应用——以家畜环境卫生学课程为例

针对应用型本科实践教学中存在的教学内容与人才培养目标匹配度不高、专业特点反映不足、教学手段单一、考核方式重结果轻过程等问题,以家畜环境卫生学为例,引进CDIO教育理念,面向现代畜牧业生产实际,满足应用型本科动物科学专业要求,充实和改革课程实践教学内容,构建学生全程参与实验教学模式,完善基于实验构思、设计、运作及目标实现的全方位、全过程评价体系与考核方法,为培养畜牧生产类应用型人才打好基础,同时也为其他课程建设及同类高校课程实践教学模式改革建设提供借鉴。     

不同来源吸附载体大豆糖蜜对奶牛瘤胃内环境的影响

为考察不同来源吸附载体大豆糖蜜对奶牛瘤胃内环境的影响,采用3×3拉丁方试验设计,选用3头年龄相同(3胎次)、体重相近[(500±50)kg]且安装永久性瘤胃瘘管的中国荷斯坦奶牛为试验动物,分别饲喂基础日粮、豆皮糖蜜和麸皮糖蜜日粮。结果表明,豆皮糖蜜组和麸皮糖蜜组瘤胃pH均极显著高于对照组(P0.01),而豆皮糖蜜组和麸皮糖蜜组之间瘤胃pH没有显著差异(P0.05);麸皮糖蜜组瘤胃NH_3-N浓度显著低于对照组(P0.05),但与豆皮糖蜜组没有显著差异(P0.05);各处理间奶牛瘤胃各单个挥发性脂肪酸(volatile fatty acid,VFA,包括乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸和戊酸)浓度、总VFA浓度和乙丙比均没有显著差异(P0.05);但与对照组相比,豆皮糖蜜组瘤胃总VFA浓度有降低趋势;而麸皮糖蜜组瘤胃总VFA浓度有提高趋势。结果显示,在奶牛饲料中可用豆皮糖蜜替代15%玉米以及用麸皮糖蜜替代6%玉米和10%麸皮,均具有调控瘤胃稳衡的作用,且麸皮糖蜜替代效果优于豆皮糖蜜。