Development of an ELISA to detect antibodies to a protective lipopolysaccharide fraction of Leptospira borgpetersenii serovar hardjo in cattle.

Monoclonal antibodies (Mabs) were produced against Leptospira borgpetersenii serovar hardjo-type Bovis antigens. A panel of 28 Mabs were characterised. Only the nine Mabs toward a lipopolysaccharide (LPS) fraction of 18, 24 kDa bands and a 26-28 kDa smear showed agglutinating, leptospiricidal and growth-inhibition activities, and passively protected hamsters against renal infection with hardjo. They also reacted strongly in the CH-ELISA, captured killed whole hardjo leptospires, gave good fluorescence in indirect FAT against smears of hardjo culture and exhibited no cross reactivity with strains in heterologous serogroups. On the basis of optimal activity in a range of tests, one IgG class Mab (designated 25) was selected for use in an antibody-capture ELISA system for the detection of bovine anti-hardjo antibodies. The system gave a wide separation of absorbance values between positive and negative sera at a 1:10 dilution. The antibodies detected by this assay are believed to be protective anti-LPS IgG.     

布鲁氏菌LPS对小鼠巨噬细胞中NLRP3炎症小体转录水平的影响

为研究布鲁氏菌LPS对巨噬细胞中NLRP3炎症小体的影响,本试验提取布鲁氏菌2308、RB51和△WbkA的LPS,以不同浓度与小鼠巨噬细胞相互作用,荧光定量PCR检测其对NLRP3、ASC、Caspase1、IL1-β、IL18转录水平的影响。结果显示RB51LPS和△WbkA LPS上调NLRP3炎症小体相关基因的转录水平,且呈浓度依赖性,而浓度对2308LPS调节NLRP3炎症小体相关基因转录的作用不大;且同一浓度下,RB51LPS和2308LPS比△WbkA LPS更好的调节Caspase1、IL1-β、IL18的转录水平。     

榆林市某县奶牛结核病和布鲁菌病检测与分析

为了解榆林市某县2010年-2014年期间奶牛结核病和布鲁菌病的发生情况,应用结核病国家检测标准(GB/T18645-2002)-结核菌素皮内变态反应检测奶牛结核病,应用虎红平板凝集试验和试管凝集试验检测奶牛布鲁菌病。结果表明,奶牛结核病平均阳性率为0.72%;奶牛布鲁菌病平均阳性率为1.19%,虎红平板凝集试验和试管凝集试验2种检测方法的符合率一致。     

水牛卵母细胞去核方法的比较

水牛卵母细胞体外成熟22h后，分别用盲吸法、点击法和纺锤体成像系统（Spindle—View System）去核。结果，三者的去核率分别为65．1％、81．8％和95．0％，差异极显著（P〈0．01）。以水牛胎儿成纤维细胞为供体，通过核移植构建的重构胚的融合率、分裂率和囊胚发育率，在上述3种方法之间均没有显著差异（P〉0．05）。认为点击法是一种较为简单、实用和有效的去核方法。     

旱作条件下刈割次数对三得利苜蓿主要经济性状的影响

为获得甘肃中部地区旱作种植条件下合理的苜蓿收割制度参数,在陇西县文峰镇典型黄土高原丘陵山地,以秋眠级5级的三得利苜蓿为例,研究不同刈割次数与苜蓿产草量、鲜干比、茎叶比、越冬性能以及营养物质含量等几个主要经济性状的关系.结果表明:在保证苜蓿正常越冬的条件下,每年刈割4次和3次处理组比每年刈割2次的处理组产草量提高7.13...     

网络化信息服务体系的构建与实施

文章从三个方面分析了网络化信息服务的必要性，具体列举了网络化信息服务的内容，提出了农业图书馆网络化信息服务体系的构建与实施措施。     

氟吡菌胺及其代谢物在黄瓜中的残留

为评价氟吡菌胺及其代谢物在黄瓜上的安全性,建立了同时检测氟吡菌胺及其代谢物2,6-二氯苯甲酰胺的高效液相色谱-串联质谱法。前处理采用以乙腈提取,无水硫酸镁、石墨化碳（GCB）和乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）为分散净化剂的QuEChERS方法,应用高效液相色谱-串联质谱仪在多反应监测（MRM）模式下进行检测。结果表明,在0.05~5 mg·kg^-1的加标范围内,氟吡菌胺和2,6-二氯苯甲酰胺的平均回收率分别为82%~98%和90%~100%,相对标准偏差（RSD,n=5）分别为1.6%~7.9%和3.2%~9.4%,定量检出限（LOQ）为0.05 mg·kg^-1。最终残留试验表明：在氟吡菌胺推荐剂量（735 g·hm^-2）下,施药3次,距最后一次施药间隔1、3 d和5 d时采收,氟吡菌胺及2,6-二氯苯甲酰胺在黄瓜上的最高残留量均小于0.05 mg·kg^-1,低于我国规定的氟吡菌胺在黄瓜中的最大残留限量0.5 mg·kg^-1。该方法前处理过程简单、方便、快速,灵敏度、准确度和精密度均满足残留分析的要求,可用于氟吡菌胺及代谢物2,6-二氯苯甲酰胺在黄瓜中的残留检测。     

鸡Prnp基因原核表达载体的构建及其在大肠埃希菌中的表达

试验旨在构建鸡Prnp基因原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达,为制备鸡朊蛋白单克隆抗体提供材料。根据GenBank已报道的鸡Prnp基因组序列和pET-28a质粒多克隆位点设计引物,以健康的鸡全血基因组DNA为材料,采用PCR的方法扩增鸡的Prnp基因,将目的基因片段与pET-28a载体连接,构建重组原核表达载体。重组菌转化到E. coli BL21(DE3)感受态细胞中,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定表达的重组蛋白。结果表明,重组蛋白在诱导剂的终浓度为0.08 mmol·L^-1,16 ℃,220 r·min^-1诱导7 h,蛋白表达量最高。综上所述,本研究成功构建了pET-28a-ChPrnp重组表达菌株,为Prnp朊蛋白的结构、生理功能和致病机制研究提供方法。     

小麦TaeEF1β基因的克隆、同源性及表达分析

真核翻译延伸因子(eukaryotic translation elongation factor,eEFs)是一种重要的多功能调控蛋白,eEF1β是eEF1的组成部分,在蛋白质生物合成过程中发挥着重要的作用。本文通过RT-PCR扩增克隆小麦(Triticum aestivum L.)的eEF1β基因,并命名为TaeEF1β。氨基酸同源性分析发现,TaeEF1β具有高度保守性,且其保守结构域位于137~226 aa处。qRT-PCR结果表明,中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)侵染小麦植株后,可以诱导TaeEF1β基因转录水平的上调表达。另外,本文也进一步分析了TaeEF1β基因在小麦根、茎、叶的表达水平和CWMV侵染不同时间点的表达情况。     

适于开口加工澳洲坚果HAES695最佳采收期的确定

为探明广西壮族自治区区内主栽澳洲坚果品种之一HAES695(简称695)的不同采收期内果实品质和开口效果变化规律,选择最适于开口带壳果加工用695采收期,以695果实为原料,研究2017、2019年2年Ⅰ(8月20日)、Ⅱ(8月30日)、Ⅲ(9月9日)、Ⅳ(9月19日)4个采收期(正负误差1 d)对澳洲坚果果实品质和开...