仔猪组织基因表达中实时定量PCR内参基因的选择

实时定量PCR研究中需要选择表达稳定性高的内参基因才能准确地校正目标基因的表达量。以仔猪不同组织为研究对象,应用实时荧光定量PCR技术,检测了beta-肌动蛋白（ACTB）、beta-2-微球蛋白（B2M）、3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）、羟甲基胆素合成酶（HMBS）、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶1（HPRT1）、核糖体蛋白L4（RPL4）、琥珀酸脱氢酶（亚基A）（SDHA）、TATA盒结合蛋白1（TBP1）和酪氨酸3-单氧化酶/色氨酸5-单氧化酶激活蛋白zeta多肽（YWHAZ）共9个看家基因mRNA水平的表达情况。经geNorm程序统计学分析处理,结果表明,9个看家基因的表达稳定性为HMBS和HPRT1〉RPL4〉TBP1〉B2M〉YWHAZ〉SDHA〉GAPDH〉ACTB,确定了HMBS基因在仔猪不同组织中用于校正目标基因的表达量为最佳选择,而RPL4基因则可以作为高转录本的内参基因。     

不同粒径牛乳脂肪球中磷脂酰胆碱含量的质谱分析

为了探究不同粒径乳脂肪球层与磷脂酰胆碱(PC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)含量的关系,试验采用重力分层法对中国荷斯坦奶牛乳样进行分层,用激光粒度仪测量不同层乳样的粒径参数｛表面积相关等效直径(D_[3,2])、体积相关的等效直径(D_[4,3])、10%粒子的体积径[Dv(10)]、50%粒子的体积径[Dv(50)]、90%粒子的体积径[Dv(90)]、比表面积(SSA)｝,用液相色谱串联质谱分析乳脂肪球粒径最大层和最小层乳样中PC和LPC含量。结果表明：乳样在重力因素下从下到上共分为1～7层(F1～F7);粒径参数D_[3,2]、D_[4,3]、Dv(10)、Dv(50)、Dv(90)均呈现从F1到F7逐渐增大的趋势,而SSA呈现逐渐下降的趋势;F1的D_[3,2]和D_[4,3]最小,分别为2.11μm和2.37μm,显著小于其他层(P<0.05);F7 D_[3,2]和D_[4,3]最大,分别为3.37μm和4.16μ...     

N-甲基-D,L-天冬氨酸对肉鸡生长性能的影响

研究了不同添加量的N-甲基-D,L-天冬氨酸(NMA)日粮对AA肉鸡早期生长性能的影响,结果表明,补充适宜的NMA有利于提高肉仔鸡日采食量和日增重,同时降低料重比。     

酸奶中保加利亚乳杆菌原生质体制备的初步研究

【研究目的】研究保加利亚乳杆菌原生质体制备的适宜条件;【研究方法】从酸奶中分离培养了保加利亚乳杆菌,观察生长动力学特性,在培养基中添加甘氨酸、变溶菌素进行了原生质体的制备;【结果】分离的保加利亚乳杆菌为革兰氏阳性杆菌,生长对数期为2-16h;在培养基中添加甘氨酸（1mg/ml）能够显著提高原生质体的形成率;原生质体的形成率随着酶浓度的增大而增大,随着酶解时间的延长而提高;【结论】原生质体制备的最适酶浓度为4ug/ml,作用时间为45min。     

DHA在牛乳中添加工艺的研究

DHA,全名是二十二碳六烯酸(Docosahexaenic Acid),是一种多元不饱和脂肪酸,在其化学结构中有22个碳原子及6个双键,因为第1个双键是位于自尾端算起第3个碳的位置,所以是属于Omega-3(ω-3或称n-3)系列的脂肪酸.DHA对增强记忆与思维,提高智力等作用显著.     

日粮中添加谷氨酰胺（Gln）对断奶仔猪生产性能的影响

随着养猪生产集约化程度的不断提高,仔猪早期断奶变得越来越重要。然而早期断奶会造成仔猪生理、环境及营养应激,常常表现出如消化机能紊乱、饲料利用率降低、抗病力下降等所谓的“仔猪早期断奶综合征”,从而严重影响了养猪业的经济效益。最近几年,谷氨酰胺（glutamine,Gin）在动物营养中的作用越来越受到人们的关注,谷氨酰胺是条件性必需氨基酸,对胃肠结构功能、免疫机能的维持,抗疲劳应激,创伤后的恢复等方面都有广泛的作用。     

肌肽——一种有待开发的天然抗氧化剂

肌肽 (β 丙氨酰 L 组氨酰 ) ,是一种发现于动物骨骼肌和大脑的二肽。作为一种天然的抗氧化剂 ,肌肽能够有效地清除活性氧和自由基 ,并且能够抑制脂质氧化。肌肽也可以从动物的肌肉中进行提取 ,提取液经试验研究具有明显的抗氧化性。肌肽在抵抗衰老 ,激发免疫活性以及信息传导方面也具有一定的生物学功效     

动物乳汁中瘦素的研究进展

为了更好的理解乳汁中瘦素的来源和功能，作者综述了在人等哺乳类动物的妊娠、泌乳阶段乳腺中leptin及其受体的基因表达，血液和乳中的瘦素含量。乳腺的多种组织能够表达leptin，其作为一种分泌因子,影响乳腺上皮细胞的生长分化；上皮细胞能够将leptin从血液中转运出来，这是leptin在乳中存在的主要原因。乳中的leptin蛋白可能对新生儿有生理作用。     

猪甲状腺激素应答spot14基因的克隆及组织表达研究

基于电子延伸序列,设计1对克隆引物,成功克隆了猪甲状腺激素应答spot14(thyroid hormone responsive spot14, THRSP)基因(GenBank登录号:JF_951726),并进行了序列分析,同时利用RT-PCR方法分析了THRSP基因的组织分布规律。结果发现,克隆的猪THRSP基因长为621 bp,包括一个完整的开放阅读框架453 bp,编码150个氨基酸。克隆的猪THRSP基因与人、牛、小鼠、褐鼠、欧洲兔、鸡的核苷酸序列同源性分别为83.8%、88.5%、80.9%、80.7%、85.1%、47.1%;推导的cDNA编码区(CDs)的氨基酸序列与人、牛、小鼠、褐鼠、欧洲兔、鸡的同源性分别为76.9%、80.8%、76.2%、76.2%、82.1%、32.0%,构建的系统发育树显示猪与牛的亲缘关系最近。组织表达分析结果表明,THRSP基因在肝脏和脂肪组织中高表达,在脑、脾脏、胃、皮肤、盲肠、直肠中表达量相对较低,在肺脏、十二指肠、空肠、回肠中微量表达,在肾脏、肌肉中无表达。THRSP基因在肝脏、脂肪等脂肪生成组织的高表达暗示了其可能作为调节脂肪合成代谢的调控因子参与脂肪合成,但其调控机理有待进一步研究。     

兔CCR10基因的克隆与序列分析

摘 要：【研究目的】克隆并分析兔CCR10基因;【方法】基于电子延伸序列,设计1对克隆引物,兔盲肠黏膜组织提取总RNA,进行RT-PCR,将PCR产物与pMD19-T载体连接后转化E.coli JM109感受态细胞、检测阳性克隆、测序并进行序列分析。【结果】克隆的兔CCR10 基因长为723bp,编码由241个氨基酸残基组成的CCR10前体蛋白,三级结构预测表明CCR10具有一个多克隆免疫球蛋白区（PIG-X）。克隆的兔CCR10基因与绵羊、人的同源性分别为89.6%、89.9%,推导的氨基酸序列与绵羊、人的同源性分别为94.2%、93.8%,结构特征与绵羊、人的相一致。【结论】克隆了兔CCR10基因并注册GenBank (Accession. EU348829)。