共轭亚油酸对奶牛乳脂肪球粒径及分布的影响

旨在探索共轭亚油酸(CLA)对奶牛乳脂肪球粒径(MFG)及分布的影响.本试验选取24头体况相近的泌乳中期荷斯坦奶牛(体重(583±34.6)kg,产奶量(27.2±2.4)kg·d-1),分为4组,每组6个重复,每个重复1头牛.对照组(C组)饲喂基础日粮,低剂量组(L组)饲喂基础日粮+150 g·d-1 C L A,中...     

复合酶制剂在饲料中的应用

由于酶制剂能破坏植物细胞壁,消除一些饲料中的抗营养因子,提高饲料消化率,改变肠道微生物体系,提高动物的生产性能,降低生产成本,所以酶制剂特别是复合酶制剂在饲料业中得到了越来越广泛的应用。     

微生态发酵饲料对奶牛生产性能的影响

选取20头荷斯坦奶牛,随机分为试验组和对照组,每组10头,试验期30 d。奶牛对照组日粮组成是基础日粮,试验组采用30%发酵饲料替代等量的精料补充料。结果表明,与对照组相比,试验组奶牛每头日均产奶量提高了0.64 kg,乳脂率和乳蛋白分别升高0.08 g/100 mL和0.02 g/100 mL;试验组畜舍有害气体H_2S、CO_2的浓度以及粪便中氮、磷的含量均显著降低,NH_3含量也低于对照组。结论:微生态发酵饲料品质优良,饲喂效果良好,提高了奶牛的生产性能。     

奶牛乳腺上皮细胞中SCAP和SREBP1蛋白调控SCD基因表达的作用研究

旨在研究奶牛乳腺上皮细胞中固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)对固醇调节元件结合蛋白(SREBP1)调控的硬脂酰辅酶A去饱和酶基因(SCD)表达的影响。培养奶牛乳腺上皮细胞,在细胞中转染奶牛SCD基因启动子载体,同时转染SREBP1和SCAP真核表达载体作为处理,采用双荧光素酶报告基因系统检测转染SREBP1和SCAP对SCD基因启动子活性的影响;采用免疫荧光技术观察SREBP1在细胞核的表达,采用荧光定量PCR检测SCD基因mRNA的表达。结果表明,与转染pcDNA3.1载体的对照组相比,转染SCAP对SCD启动子活性无显著影响;转染SREBP1和共转染SCAP/SREBP1极显著增加SCD基因启动子活性值(P0.01),并且SCAP的转染剂量与SCD的启动子活性值之间具有极显著的量效关系(P0.01);在乳腺上皮细胞中转染SCAP后,能够增强SREBP1在细胞核的表达;细胞转染SREBP1和共转染SCAP/SREBP1后,SCD基因mRNA的表达分别显著上调1.23倍和1.54倍(P0.05)。本研究表明,奶牛SCAP可以增加SREBP1蛋白在细胞核中的表达,促进对SCD基因的转录激活作用。     

仔猪组织基因表达中实时定量PCR内参基因的选择

实时定量PCR研究中需要选择表达稳定性高的内参基因才能准确地校正目标基因的表达量。以仔猪不同组织为研究对象,应用实时荧光定量PCR技术,检测了beta-肌动蛋白（ACTB）、beta-2-微球蛋白（B2M）、3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）、羟甲基胆素合成酶（HMBS）、次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶1（HPRT1）、核糖体蛋白L4（RPL4）、琥珀酸脱氢酶（亚基A）（SDHA）、TATA盒结合蛋白1（TBP1）和酪氨酸3-单氧化酶/色氨酸5-单氧化酶激活蛋白zeta多肽（YWHAZ）共9个看家基因mRNA水平的表达情况。经geNorm程序统计学分析处理,结果表明,9个看家基因的表达稳定性为HMBS和HPRT1〉RPL4〉TBP1〉B2M〉YWHAZ〉SDHA〉GAPDH〉ACTB,确定了HMBS基因在仔猪不同组织中用于校正目标基因的表达量为最佳选择,而RPL4基因则可以作为高转录本的内参基因。     

应用地高辛标记探针原位杂交方法检测仔猪小肠FcRn的表达

摘 要：【研究目的】旨在建立检测仔猪小肠FcRn表达的地高辛标记探针原位杂交的方法,研究FcRn在仔猪小肠各段的表达分布。【方法】根据GenBank公布的猪FcRn 重链（α链）mRNA基因保守序列设计并合成带地高辛标记的原位杂交试验用cDNA探针。经仔猪小肠冰冻组织切片最佳厚度选择,以及H2O2溶液祛除小肠组织中内源性辣根过氧化物酶作用对杂交结果的影响,选择合适的固定剂、细胞膜蛋白消化剂、杂交液和确定杂交反应的温度、时间以及杂交后处理等一系列试验条件优化,建立了检测仔猪小肠FcRn mRNA的原位杂交方法。【结果】①仔猪小肠冰冻组织切片最佳厚度为14 μm;②仔猪小肠内存在内源性辣根过氧化物酶,3％的H2O2溶液祛除该酶的效果良好,但在本研究中内源性辣根过氧化物酶的存在试验结果并无明显影响,无需祛除;③在仔猪十二指肠、空肠和回肠组织的小肠腺和粘膜下层等部位存在棕黄色阳性颗粒,均检测到清晰的杂交信号。【结论】应用地高辛标记探针进行仔猪小肠FcRn mRNA的原位杂交方法检测效果良好;FcRn mRNA在仔猪十二指肠、空肠和回肠组织等营养物质吸收部位均有表达,提示FcRn在这些部位的存在与肠道IgG转运的相关性。     

不同粒径牛乳脂肪球中磷脂酰胆碱含量的质谱分析

为了探究不同粒径乳脂肪球层与磷脂酰胆碱(PC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)含量的关系,试验采用重力分层法对中国荷斯坦奶牛乳样进行分层,用激光粒度仪测量不同层乳样的粒径参数｛表面积相关等效直径(D_[3,2])、体积相关的等效直径(D_[4,3])、10%粒子的体积径[Dv(10)]、50%粒子的体积径[Dv(50)]、90%粒子的体积径[Dv(90)]、比表面积(SSA)｝,用液相色谱串联质谱分析乳脂肪球粒径最大层和最小层乳样中PC和LPC含量。结果表明：乳样在重力因素下从下到上共分为1～7层(F1～F7);粒径参数D_[3,2]、D_[4,3]、Dv(10)、Dv(50)、Dv(90)均呈现从F1到F7逐渐增大的趋势,而SSA呈现逐渐下降的趋势;F1的D_[3,2]和D_[4,3]最小,分别为2.11μm和2.37μm,显著小于其他层(P<0.05);F7 D_[3,2]和D_[4,3]最大,分别为3.37μm和4.16μ...     

N-甲基-D,L-天冬氨酸对肉鸡生长性能的影响

研究了不同添加量的N-甲基-D,L-天冬氨酸(NMA)日粮对AA肉鸡早期生长性能的影响,结果表明,补充适宜的NMA有利于提高肉仔鸡日采食量和日增重,同时降低料重比。     

重叠延伸拼接法从基因组DNA中获得Ers-MIH1基因的编码区

蜕皮抑制激素(molt-inhibiting hormone,MIH)产生于端髓X-器官(MTXO),储存在甲壳动物眼柄的窦腺中,抑制Y-器官蜕皮素的分泌,参与调控甲壳动物的生长和发育等重要的生理活动。提取中华绒螯蟹肌肉组织中的基因组DNA,以此为模板,采用重叠延伸拼接法(gene splicing by overlap extension,SOE)将中华绒螯蟹蜕皮抑制激素1Eriocheir sinensismolt-inhibiting hormone-1(Ers-MIH1)成熟肽基因的编码区连接起来,克隆到pMD18-T载体中,随机挑取3个阳性克隆测序,测序结果与已知的Ers-MIH1基因编码区的序列相一致。从基因组DNA中克隆该基因的方法有效地解决了取材不便给研究中华绒螯蟹蜕皮抑制激素基因所带来的限制等问题。     

气相色谱法检测牛乳中共轭亚油酸的研究

共轭亚油酸（CLA）主要存在于反刍动物乳制品中,本试验建立了气相色谱法检测CLA的方法,采集牛乳提取脂肪检测脂肪酸中CLA的含量,发现在试验条件下c9,t11-CLA占到总脂肪酸含量的1．25‰是CLA异构体的主要形式。