β 淀粉酶的分离纯化及酶学性质研究

以"渝薯17"为实验材料,从淀粉生产废水中分离纯化β-淀粉酶.去皮、1∶10(m/V)匀浆抽提,经过乙醇分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析和Superdex-200凝胶过滤层析获得电泳纯β-淀粉酶并对其酶学性质进行了研究.结果表明:该酶的比活力高达333.15U/mg,显著高于市售枯草杆菌来源酶活(50U/mg);纯化倍数9.93倍,回收率66.60%;亚基分子量约为55.12kD,全酶分子量约为223.54kD;最适温度50℃,最适pH值6.2;50℃以下,pH值6~8具较好的稳定性.在最适条件下以可溶性淀粉为底物,测得Km为0.001 36g/mL,V_(max)为0.112mg/mL·min;Mn~(2+),Pb~(2+),Li~+,Zn~(2+),K~+,Cu~(2+),草酸,SDS对该酶有不同程度的抑制作用,Co~(2+)有激活作用,有机物作用不明显.     

人工湿地高效好氧反硝化菌的分离鉴定及反硝化特性研究

从增氧型复合垂直流人工湿地中采集样品,利用间歇曝气法富集好氧反硝化菌,并进行分离纯化,共得到10株好氧反硝化菌.其中编号为B13的菌株在初始硝态氮含量为277.23 mg·L-1、碳氮比为5的条件下,24 h的硝态氮去除率达92.80%,亚硝态氮积累只有12.57 mg·L-1,脱氮速率达到20.58 mg·L-1·h-1.16S rDNA序列分析表明,该菌与Pseudomonas stutzeri同源性达100%.选用四因素三水平L9(34)正交试验表设计实验,通过测定对硝态氮去除能力和亚硝态氮的积累量,研究碳源、碳氮比(C/N)、pH以及溶解氧含量(DO)4种不同因素对B13号菌株好氧反硝化性能的影响.结果表明,该菌株对硝态氮的去除率最大可达99.88%,几乎没有亚硝态氮积累.对硝态氮去除率影响最大的因素为碳氮比,其次为pH,溶解氧含量和碳源.对应的最优条件是碳源为葡萄糖,碳氮比为10,pH为9,溶解氧含量为1.84～3.57 nag·L-1.     

电感耦合等离子体原子发射光谱法测定山药中人体必需元素含量

采用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)同时测定山药中的钾、镁、钙、钠、铜、锰、锌和铁等金属元素的含量。以硝酸-高氯酸为溶样试剂,采用传统湿法消解方法。结果表明:山药中金属元素含量丰富,金属元素在中药中可能起到一定的药理作用,用ICP-AES测定山药中微量元素以评价其药用价值具有重要的意义。     

不同倍性鱼的gnih和gnihr3差异表达分析

为研究促性腺激素抑制激素(gonadotropin inhibitory hormone, GnIH)及其受体GnIHR在不同倍性鲫鲤生殖发育过程中的作用,实验通过PCR和RACE技术获得了二倍体红鲫和异源三倍体鲫的gnih、gnihr3基因c DNA全长。结果显示,2种鱼gnih基因编码的蛋白序列均含有GnIH肽典型的LPXRF标志,gnihr3基因编码的蛋白为含有7个跨膜区的G蛋白偶联受体。采用实时荧光定量PCR分析了2种鱼的gnih、gnihr3基因mRNA在不同组织中的表达情况,结果显示gnih基因主要在下丘脑中高表达;gnihr3基因在下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴中都有不同程度的表达;此外,无论是非繁殖期或繁殖期,gnih基因在红鲫下丘脑中的表达量均高于异源三倍体鲫;同时,gnihr3基因在红鲫下丘脑和垂体中的表达量均高于异源三倍体鲫,但在卵巢中的表达则后者较高。利用组织原位杂交分析了gnih和gnihr3基因在2种鱼下丘脑和垂体的组织定位情况,结果发现,gnih基因在2种鱼脑中Npp、Npo、NLT区均有明显杂交信号;gnihr3基因主要定位在这2种鱼垂体的PPD、RPD...     

不同倍性鲫鲤性腺型芳香化酶cyp19a1a基因cDNA的克隆及表达

为研究性腺型芳香化酶P450aromA(cyp19a1a基因编码)在不同倍性鲫鲤卵巢发育过程中的作用,实验采用同源克隆和cDNA末端快速扩增技术(RACE),获得了二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤的cyp19a1a基因cDNA全长。结果显示,3种鱼cyp19a1a基因均编码517个氨基酸残基,而且编码的蛋白都包含P450aromA特有的跨膜螺旋区、I-螺旋区、Ozol’s肽区、芳香化酶特异保守区以及血红素结合区。采用RT-PCR分析cyp19a1a基因mRNA在3种不同倍性鱼类组织中的表达情况,结果显示,cyp19a1a基因主要在实验鱼的卵巢中表达,其次在精巢、脑、脾脏有少量表达。采用实时荧光定量PCR对cyp19a1a基因mRNA在不同倍性鱼卵巢中的表达进行分析,结果发现,cyp19a1a基因在不同倍性鱼的非繁殖期卵巢的表达都高于繁殖期卵巢,并且在繁殖期和非繁殖期,cyp19a1a基因在三倍体湘云鲫的表达量高于二倍体红鲫和四倍体鲫鲤。采用免疫组织化学方法对CYP19A蛋白在不同倍性鲫鲤卵巢中的定位进行分析,结果发现,CYP19A蛋白主要定位在滤泡细胞、Ⅳ时相卵母细胞的放射膜上以及Ⅱ时相卵母细胞的卵浆中。研究表明,性腺型芳香化酶在不同倍性鲫鲤卵巢发育过程中的表达存在一定的差异性,三倍体鱼cyp19a1a基因mRNA水平表达异常,推测与其不育有关联性。     

雌核发育二倍体鲫鲤及其他倍性鱼cdc2基因cDNA全序列克隆及表达分析

为研究雌核发育二倍体鲫鲤产生二倍体卵子的分子机制,实验采用PCR和cDNA末端快速分离法,克隆获得了雌核发育二倍体鲫鲤第三代(G3)、二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤的细胞周期相关基因——cdc2基因cDNA全序列.结果显示,4种不同倍性鱼cdc2基因均编码含有302个氨基酸蛋白,而且编码的蛋白都含有与其他CDK激酶相当保守的序列PSTAVRE;同源性分析发现,4种鱼cdc2基因编码的氨基酸序列之间的相似度大于97.6％,说明Cdc2蛋白在这4种不同倍性鱼中具有高度保守性.采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)对cdc2基因在G3、二倍体红鲫、三倍体湘云鲫及四倍体鲫鲤早期卵巢中的表达进行分析,结果发现,G3cdc2基因比普通二倍体红鲫和三倍体湘云鲫表达要高,比四倍体鲫鲤的表达水平低.该研究从分子水平证明了G3早期性腺中存在着大量的多倍体卵原细胞.同时,研究表明,cdc2基因在雌核发育二倍体鲫鲤早期卵巢的高表达暗示着G3多次进入S期却不经历M期导致二倍体配子的产生.     

白雪平胶囊治疗原发性肝癌30例临床观察

原发性肝癌是常见的恶性肿瘤之一 ,预后极差 ,不能行根治性手术者若得不到有效的治疗 ,平均生存期约为 2个月。由于多药耐药基因的原因 ,化疗进展不大。为此 ,笔者对不能行手术治疗的原发性肝癌 30例采用白雪平胶囊治疗 ,取得了较满意的效果 ,现报道如下 :1　资料与方法1.1　病例本组病例均为经临床或病理确诊为原发性肝癌的住院患者 ,其中病理确诊为肝细胞肝癌 18例 ,其余均为临床诊断 (按照《中国常见恶性肿瘤诊治规范 ,原发性肝癌》所制定的标准 )。30例中男 18例 ,女 12例 ;年龄 2 8～ 6 5岁 ,平均 48.3岁。曾接受过化疗者 8例 ,放疗加…     

酵母培养物的应用进展

酵母培养物（YC）主要由酵母内容物、酵母细胞壁、酵母细胞外代谢产物、变异培养基和少量无活性酵母细胞所构成,富含蛋白质、肽类、有机酸、寡糖和多种因子,具有提高动物生长性能、增强免疫能力和促进肠道发育等作用。作为饲料添加剂在反刍动物、水产养殖、家禽、生猪等养殖行业得到广泛应用。本文主要综述了酵母培养物的有效成分、作用机理及其在动物养殖中的应用。     

莲藕腐败病的发生与综合防治技术

莲藕自古以来就备受赞誉,"出污泥而不染"更是成为人们生活的信条。同时莲藕浑身都是宝,不仅是人们日常餐桌上的美味佳肴,而且其观赏价值越来越受到人们的重视。由于鱼台县濒临微山湖,莲藕的种植历史非常悠久,除了常规的坑藕、湖藕等深水藕外,近年浅水藕面积大幅度增加,并在此基础上许多莲藕合作社、基地应运而生,逐渐形成了种植、加工、出口、旅游观光等一体的产业链。子     

乡村振兴战略下成都市乡村民宿发展可行性调查分析

本文利用抽样调查的方法,采取网络问卷调查和实地调查相结合的方式,对四川省成都市乡村民宿发展状况进行调查分析。根据问卷调查结果进行数据分析,得出性别对人们进行民宿选择的影响不大、选择民宿的游客年龄较为集中、游客对民宿了解度不高、收入影响游客选择、酒店等对游客吸引力更大等结论。同时,本文对如何发展成都市乡村民宿业提出几点建议。