猪蛔虫GST蛋白编码基因克隆及序列分析

为预测并分析猪蛔虫(Ascaris suum)谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)蛋白编码基因的结构特征及其B细胞抗原表位,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增猪蛔虫GST蛋白编码序列(coding sequence,CDS),将纯化的DNA与pMD19-T载体连接并转化入JM109感受态细胞,并将阳性菌液测序后进行序列分析、结构预测和抗原表位预测。结果表明,获得的猪蛔虫GST蛋白CDS序列与参考基因(Y10613.1)相比,在第243和248位核苷酸处发生变异,并导致第83位氨基酸由甲硫氨酸(Met)变异为苏氨酸(Thr);其优势B细胞抗原表位可能位于肽段29-38、43-47、80-87、114-120、129-131、143-145、190-194、201-204区域内或附近,其中最可能位于肽段43-46和201-204区域内或附近。研究结果为猪蛔虫基因工程疫苗的研发奠定了理论基础,同时为后续猪蛔虫GST基因功能和耐药相关性研究提供了基础资料。     

饲料企业销售六忌

搞好销售工作，首先要搞好销售管理工作。许多饲料企业销售业绩不佳，如产品销售不畅、应收帐款一大堆、销售人员没有积极性、销售费用居高不下等问题，并非由于销售策略不正确、销售人员不愿努力，而是由于销售管理工作不到位造成的。 　　销售大忌之一：销售无计划 　　销售工作的基本法则是，制定销售计划和按计划销售。销售计划管理既包括如何制定一个切实可行的销售目标，也包括实施这一目标的方法。具体内容有：在分析当前市场形势和饲料企业现状的基础上，制定明确的销售目标、回款目标、和其他定性、定量目标；根据目标编制预算和预…     

新一代绿色高效杀菌消毒剂--高铁酸钾

高铁酸钾是二十世纪70年代以来开发的一种继漂白粉、二氯异氰尿酸、三氯异氯尿钠、溴氯海因、二溴海因、碘溴海因、臭氧、过氧化氢、二氧化氯之后的新型高效非氯消毒剂和水处理剂，是一种比高锰酸钾、氯气、过氧化氢、臭氧的氧化能力强得多的强氧化剂。高铁酸钾能快速杀死水体中的细菌和病毒，分解有机污     

蛋鸡舍通风、喷雾降温研究

蛋鸡舍安装新研制的风机和喷头进行纵向通风和喷雾试验，在夏季高温季节可以把鸡舍内温度降低3～5℃，有良好的社会经济效益     

影响家禽氨基酸需要量的因素

自 1 98 0年以来 ,已有许多从科学和经济方面研究家禽氨基酸需要量的报道。由于氨基酸需要量受许多因素的影响 ,故这些报道的结果存在着许多差异。Ｉｓｈｉｂａｓｈｉ(1 990 )将这些因素归为四类 :环境因素、遗传背景、动物健康状况和日粮因素。环境温度可直接影响到动物的采食量 ,即使环境条件相同 ,氨基酸的需要量也依不同品系而不同 ,而且受疾病、应激、肠道微生物区系、激素、换羽及年龄的影响。日粮中也包含多种影响氨基酸需要量的因素 ,如日粮代谢能 ,可利用氨基酸 ,氨基酸之间的拮抗和不平衡 ,氨基酸的不足和过剩 ,饲料的适口性以及…     

棉花杂种二代组合测定优势分析

杂种二代组合测定不仅可以大大提高杂交育种的效率，而且有利于杂优利用工作，值得大力推广。     

我国南方地区蛋鸡场环境控制研究

主要通过对蛋鸡舍改造和鸡粪污水无害化处理控制鸡场环境。蛋鸡舍安装自行研制的风机和喷头进行纵向通风和喷雾，在夏季高温季节可使蛋鸡舍内温度下降3～5℃；鸡粪通过发酵烘干成为商品肥料，污水通过处理达标排放，有良好的社会和经济效益。     

家蚕幼虫期和蛹期马氏管差异蛋白质组学分析

【目的】深入了解家蚕幼虫期与蛹期马氏管蛋白质组的变化,为马氏管在不同发育时期的功能研究提供蛋白质水平上的依据。【方法】利用蛋白质双向电泳技术对家蚕5龄第5天及化蛹第1天的马氏管组织进行比较,并采用基质辅助激光解析飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）对表达量差异较大的蛋白点进行肽指纹图谱鉴定,应用GPMAW 8.00软件对NCBI蛋白质数据库中所有来自于P50/Dazao的蛋白质与家蚕9倍基因组预测蛋白质库共同构建本地数据库,对试验采集到的肽指纹图谱进行分析。【结果】共检测到360-430个蛋白点,主要分布在分子质量15-80 kD、等电点4.0-9.5。2个时期共成功鉴定17个表达量有显著差异的蛋白质,其中包括与能量代谢相关蛋白质、热激蛋白、V型H+ ATP合酶、30K蛋白以及与肾脏功能密切相关的丙氨酸-乙醛酸氨基转移酶 2,3-羟基异丁酸脱氢酶等。【结论】本研究中差异蛋白质的发现和鉴定为完全变态昆虫幼虫期与蛹期马氏管的功能差异提供了蛋白质水平上的理论依据。     

草鱼呼肠孤病毒VP7基因核酸疫苗的构建及免疫效果

将草鱼呼肠孤病毒( GCRV)外衣壳蛋白VP7双基因(约0.9 kb)及团头鲂的β-肌动蛋白启动子(约0.56 kp)经扩增并鉴定正确后,克隆至基因转移载体pFastBacTM Dual中,获得重组质粒pFastBac-β-VP71 -VP72,以此研究草鱼免疫实验及免疫效果.重组质粒按10、30、60μg分为3组,同时设30 μg空载体组及对照组.于免疫后第14、21、28、49天通过RT-PCR检测VP7的转录水平、间接凝集反应测定抗体水平及攻毒试验检测免疫保护效果.结果显示,pFastBac-β-VP71 -VP72导入鱼体后,VP7基因在β-肌动蛋白启动子的驱动下持续表达,至第49天仍能检测到目的基因的转录;各免疫组均有抗体产生,抗体效价在免疫后第21天达到最高,攻毒后10、30、60 μg核酸疫苗免疫组死亡率分别为0％、0％、5％,而空载体组和对照组分别为30％和100％,表明pFastBac-β-VP71-VP72作为核酸疫苗对草鱼病毒性出血病有较好的免疫保护效果.研究结果为草鱼呼肠孤病毒核酸疫苗的研发与生产应用奠定了基础.     

猪细小病毒NS1基因低温诱导表达及间接ELISA方法的建立

利用PCR技术从猪细小病毒的DNA模板中扩增了NS1的基因片段,将PCR产物克隆至pET32c载体,将构建好的重组质粒pET32c-NS1,转入表达宿主茵BL21中,利用低温诱导表达的方法,避免了包涵体的形成.West-ern-blot结果显示,表达产物有良好的生物活性.纯化后的重组蛋白作为抗原,包被酶标板,建立了检测猪细小病毒特异性抗体的间接ELISA方法.抗原最佳包被质量浓度为2.5 mg/L、血清最佳稀释度为1∶200.表达的NS1蛋白可作为免疫诊断试剂用于检测PPV,且能很好的区别灭活疫苗免疫猪和自然感染猪.