番木瓜WRKY转录因子家族基因鉴定及其响应短孢炭疽菌侵染的表达分析

【目的】在全基因组水平鉴定番木瓜(Carica papaya L.) WRKY（CpWRKY）转录因子家族基因,并对其在短孢炭疽菌侵染下的表达量进行分析,为CpWRKYs 家族的功能研究和利用奠定基础。【方法】采用生物信息学方法,鉴定和筛选CpWRKYs转录因子家族基因成员,并对其进行系统进化分析、基因结构分析、蛋白保守基序预测和启动子顺式作用元件分析;同时以番木瓜炭疽病耐性品种和敏感性品种为材料,利用短孢炭疽菌侵染采后果实,于0,24,48 h 取样,对其转录组学数据进行分析,筛选2个品种中差异表达的CpWRKY基因,并利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)试验对筛选结果进行验证。【结果】经系统分析从番木瓜中共鉴定出48个CpWRKYs成员,分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ 3类;其中第Ⅱ类成员最多,可分为Ⅱa、Ⅱb、Ⅱc、Ⅱd和Ⅱe 5个亚类。CpWRKYs家族成员的氨基酸残基数目为97~747 个,等电点为4.83~9.71,为亲水性蛋白,大部分CpWRKYs的结构域高度保守,但有个别蛋白保守域缺失。在 CpWRKYs家族中共预测到10个保守基序,其中包括含有WRKY七肽结构域的基序1、含锌指结构的基序2和同时含有七肽序列和锌指结构的基序3,其中基序3为大多数I类CpWRKY转录因子N端WRKY结构域所特有。CpWRKYs含有1~6个外显子,同一家族或亚家族成员在基因结构上表现出一定的相似性,同时在CpWRKYs启动子中检测到大量与生物胁迫和非生物胁迫相关的元件。对短孢炭疽菌侵染番木瓜的转录组数据进行分析,在番木瓜耐性品种中筛选出了特异表达的CpWRKY22、CpWRKY11、CpWRKY2、CpWRKY33和CpWRKY25,RT-qPCR检测结果显示,这些基因在耐性品种中特异上调表达,在敏感性品种中的表达量无明显变化。【结论】番木瓜WRKY家族共包括48个成员,该家族基因结构和蛋白基序具有组间差异性和组内保守性。CpWRKYs家族成员强烈响应炭疽菌侵染,其中CpWRKY22、CpWRKY11、CpWRKY2、CpWRKY33和CpWRKY25是有潜力的抗炭疽病候选基因。     

山东东南沿海海洋渔业的调查与思考

位于山东东南沿海的威海、烟台、青岛、日照4市,海洋渔业生产具有得天独厚的优越条件。其海洋渔业的发展直接主导着全省渔业的走势和发展方向,乃至对全国渔业产生一定影响。进入新的世纪,上述4市海洋渔业发展现状和发展方向是怎样的?对此,我们做了专门调查。1 基本情况 4市审时度势,因地制宜调整思路,明确重点,发挥优势。以结构调整为主线,高新技术为动力,“增效增收”为目的,突出抓好渔业外经外贸、高新技术和民营经济“三大亮点”,不断推进海洋与渔业经济的新发展。1.1 外经外贸强势增长,渔业经济国际化战略快速推进     

褶牡蛎升温育苗及单体蛎苗生产技术研究

采用亲贝升温促熟，筛选眼点幼虫附着，使用塑料板、颗粒附苗，EPI、NE培育单体牡蛎，室内培育幼虫、土池附着等技术培育牡蛎幼虫、生产单体牡蛎苗种。在600m^3水体中育出1.38亿粒稚贝，平均23万粒/m^3，2.5cm以上幼虫1611.3万个，1991年1月专家鉴定认为，本研究达到国内先进水平。     

九华山生态园区工程建设刍议

通过对九华山生态园区建设的规划与实践,强调主体工程建设五园一体的相融性,配套工程建设的协调性,园区规范管理的重要性;对于国家生态示范区或国家风景名胜区生态茶园建设提出转变发展方式的思考。     

猪坏死杆菌病防治

20 0 1年 3月份 ,西昌市小庙乡某个体户的 2头断奶仔猪因骟割时未消毒而出现发烧 ,不食。 2头断奶仔猪体重约 1 0ｋｇ,白毛 ,叫声无力 ,精神萎顿 ,体躯及四肢皮肤渗出浆液 ,皮肤环死 ,皮下组织出现环死性脓肿 ,用手抹 ,皮肤表层有象搓面条状物粘附于手上。根据临床症状初步诊断为环死杆菌病 ,从病健组织交界处采取材料涂片 ,美蓝染色 ,镜检 ,发现有不均匀细长丝状环死杆菌 ,确诊为环死杆菌病。治疗 :就诊当日每头猪用硫酸卡那霉素 1 0ｍｌ、ＶＣ5ｍｌ、ＶＢ1 2ｍｌ肌肉注射。次日每头每次用青霉素 80万Ｕ、链霉素 5 0万Ｕ、肾上腺色素腙 2ｍ…     

软腐欧氏杆菌在离体条件下产生胞外酶的比较研究

 3种软腐细菌在21,26和31℃下及6种培养液中的生长量和产生胞外酶的能力各不相同。Ecc在26℃生长最好,Eca为21℃,Ech在三种温度下的生长量差别不大。与其它2种细菌比较,Ech的生长及产生果胶裂解酶(PL)的能力总是最强的。随着温度的升高,各种细菌的PL活性都下降。果胶水解酶(PG)变化不大,但Ech在高温下产PG有减少趋势,且总没有另二种细菌的活性强。Eca以26℃时产PG最适宜。Ech在较高温度下蛋白酶活性大大下降,而Ecc,变化不大,Eca的蛋白酶活性则随温度升高而加强。培养液的无细胞滤液对马铃薯块茎组织的浸离力与其中PL的活性有密切关系,但没有或只有很低果胶酶活性,而蛋白酶活性正常的这种滤液也能使小薯碟浸离。Eca在31℃培养后果胶酶活性很低,蛋白酶活性很高,其无细胞滤液对马铃薯组织也表现较强浸离力。     

萝卜与苤蓝属间杂种胚离体培养…

以萝卜雄性不育系DH303A为母本,以苤蓝为父本进行属间远缘杂交,萝卜与苤蓝杂交的不亲和性发生在胚珠发育过程中,杂交荚荚长快速生长期在授粉后的第2~5天,而横径快速生长期在授粉后第2~4天。在杂种胚发育后第6天和第7天进行胚抢救,用诱导培养基:MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%;继代培养基:MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%;分化培养基:MS+IAA 0.5 mg/L+KT 1.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%;生根培养基:MS+NAA 0.2 mg/L+IAA 0.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%,能成功获得幼苗。     

富硒水稻栽培技术研究

采用两因素随机区组设计，对水稻施用富硒康进行了研究。结果表明：在水稻抽穗期施富硒康495ml/hm^2,不仅可以有效增加水稻籽实含硒量，达到富硒标准，而且还可显著提高水稻产量。大面积实验结果，水稻籽实平均含硒量达到40．3μg/kg,平均增产8．2％。     

五常市稻米产业发展优势分析

分析了五常市优质稻米形成和稻米产业发展的优势在于优质品种、气候条件得天独厚、水资源丰富、土壤有机质含量高、栽培历史悠久、科研推广实力雄厚和政府支持等。