沼肥对无公害蔬菜营养品质与产量影响的探讨

通过探讨沼肥对无公害蔬菜营养品质和产量的影响,说明施用沼肥有利于无公害蔬菜生产.     

猪A组轮状病毒HN2019-01株的分离鉴定及VP6基因序列分析

为了解猪轮状病毒(RV)在河南省的流行情况及其分子遗传特征,利用反转录PCR方法,从河南某猪场腹泻样品中扩增得到RV特异性核酸片段,并将腹泻样品利用MA-104细胞进行RV的分离和传代,将分离得到的RV命名为RVA/Pig-wt/HN2019-01.对分离毒株VP6基因片段的序列测定及生物信息学分析结果表明,分离毒株V...     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白B表位诱导中和抗体能力的研究

为证实GP5蛋白B表位是否具有诱导抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体的能力,本实验合成了PRRSV CH-la株和高致病性PRRSV(HP-PRRSV)HuN4株B表位的短肽,分别免疫家兔制备两份特异性多肽抗血清.此外,将12头PRRSV及其抗体均为阴性的健康仔猪以HP-PRRSV HuN4疫苗毒株(HuN4-F112)进行基础免疫,然后用强毒株(HuN4-F5)进行多次接种,制备猪高免血清.间接免疫荧光检测(IFA)结果显示,两份多肽抗血清均能与PRRSV经典株和变异株发生特异性反应,IFA抗体效价无差异,表明两份血清没有显著差异.病毒中和试验结果表明,两份多肽抗血清均不具有中和PRRSV活性.间接ELISA和病毒中和试验结果表明,猪高免血清中针对B表位肽的ELISA抗体水平与血清抗PRRSV中和抗体之间没有正相关关系,而且B表位肽不能抑制中和抗体.以上结果表明HP-PRRSV B表位不能诱导产生中和抗体.     

猪流行性腹泻病毒纤突蛋白S1抗原表位的串联表达及免疫原性分析

为了获得猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)纤突蛋白S1抗原表位的串联重组蛋白并评价其免疫原性，试验将S1蛋白的抗原表位COE和S1D连接起来组成串联表位S1CD,合成相应的基因片段后克隆至转移载体pFastBac1上，然后转化到大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中，通过蓝白斑和PCR扩增筛选重组杆状病毒穿梭质粒Bacmid-S1CD,再转染Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒，采用间接免疫荧光试验和Western-blot检测方法鉴定重组蛋白S1CD的表达情况。将小鼠随机均分为S1CD蛋白组、PEDV灭活疫苗组和PBS组，分别经背部皮下多点注射重组蛋白S1CD、PEDV HeN170821灭活病毒和PBS与弗氏佐剂等体积混合制成的抗原，检测特异性IgG抗体水平及白细胞介素-4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)含量以评价重组蛋白S1CD的免疫原性。结果表明：重组蛋白S1CD成功在Sf9昆虫细胞中表达，并能与鼠抗His单克隆抗体和PEDV阳性血清发生特异性反应；首次免疫后第28天，S1CD蛋白组的特异性IgG抗体水平极显著高于PBS组(...     

不同粗饲料日粮对西门塔尔繁殖母牛瘤胃发酵和血液指标的影响

[目的] 分析不同粗饲料日粮对西门塔尔繁殖母牛瘤胃液pH值、瘤胃挥发性脂肪酸含量及血液指标的影响。[方法] 选择体重相近的西门塔尔繁殖母牛18头,按同质原则分为3组,每组6头。日粮1组粗饲料为干玉米秸秆,日粮2组粗饲料为全株玉米青贮,日粮3组粗饲料为全株玉米青贮+干玉米秸秆。预试期14 d,正试期42 d。采集试验牛的瘤胃液和血液样本,进行瘤胃液pH值、挥发性脂肪酸（volatile fatty acid,VFA）含量及血液指标测定。[结果] 3组繁殖母牛的瘤胃液pH值差异不显著（P> 0.05）。全株玉米青贮组的瘤胃内乙酸含量显著（P<0.05）高于干玉米秸秆组,全株玉米青贮组和全株玉米青贮+干玉米秸秆组的瘤胃内丙酸含量显著（P<0.05）高于干玉米秸秆组,全株玉米青贮组的瘤胃内正丁酸和异丁酸含量显著（P<0.05）高于其他组。干玉米秸秆组的血清SOD活力和T-AOC活力显著（P<0.05）低于其他组,GSH-Px活力显著（P<0.05）低于全株玉米青贮+干玉米秸秆组。干玉米秸秆组血清中的铁（Fe）和锌（Zn）含量显著（P<0.05）低于全株玉米青贮组,干玉米秸秆组和全株玉米青贮组血清中的硒（Se）含量显著（P<0.05）高于全株玉米青贮+干玉米秸秆组。干玉米秸秆组血清中VD和VE含量显著（P<0.05）低于其他组。[结论] 饲喂以全株玉米青贮或者全株玉米青贮+干玉米秸秆为粗饲料的日粮,西门塔尔繁殖母牛的瘤胃发酵和血液生化指标优于饲喂以干玉米秸秆为主要粗饲料的日粮。结合饲养成本和农区粗饲料供给情况,生产中推荐全株玉米青贮+干玉米秸秆的粗饲料饲喂模式。     

中国新发L1A PRRSV变异株的出现与流行状况分析

2017年我国首次发现类NADC34 PRRSV，该类病毒属于L1A (Sublineage1.5)亚型。近年来，新发类NADC34 PRRSV在我国不断变异，已经成为危害我国养猪业重要的PRRSV亚型。为了确定新发类NADC34 PRRSV的流行特征，本研究从2021年～2023年37份新发类NADC34 PRRSV阳性病料样品中选择4份样品经PCR分段扩增PRRSV全基因组序列并测序，利用Seq Man软件拼接，获得了4株完整的PRRSV全基因组序列，相应的病毒分别命名为TZJ2165、TZJ2451、TZJ2756、WK621株。下载GenBank中所有中国类NADC34 PRRSV和美国L1C变异株的ORF5基因及NSP2基因序列，利用MEGA7.0构建上述PRRSV ORF5基因序列的遗传进化树，分析其遗传变异情况。利用Megalign软件分析各分支内ORF5基因序列的相似性，以及新发类NADC34 PRRSV NSP2氨基酸序列，分析其是否存在一致的氨基酸缺失特征。根据PRRSV ORF5基因的限制性片段多态性(RFLP)分类方法，对新发类NADC34 PRRSV的ORF5...