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拟建立施马伦贝格病毒(SBV)S基因焦磷酸测序检测方法,用于施马伦贝格病毒病的快速检测和确诊。通过对公开发表的SBVS基因序列与布尼病毒科其他11种病毒S基因进行比对,找出不同病毒变异区域集中且变异区域两侧保守的序列片段,基因合成,体外转录,作为基因扩增模板。在特异性变异序列两端的保守区域设计扩增引物,进行RT-PCR扩增。在保守区域设计双向测序引物,对RT-PCR产物进行双向焦磷酸测序。通过比对测序结果,确定是否为SBV核酸序列;优化条件,确定检测方法的敏感性、特异性和重复性,建立SBVS基因焦磷酸测序检测方法。结果:建立的施马伦贝格病毒病焦磷酸测序检测方法扩增基因片段长度为166bp;敏感性为可检测到104个拷贝;每一条测序引物可准确测出50bp左右核酸序列,双向测序可准确测出100bp左右核酸序列,具有较好特异性,完全满足施马伦贝格病毒病确诊要求;重复测序3次,均能准确测出100bp左右核酸序列。本研究建立的施马伦贝格病毒病焦磷酸测序检测方法,可用于施马伦贝格病毒病的检测和确诊,整个检测过程可在1d内完成,大大缩短了确诊时间。 相似文献
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绵羊QTL定位的研究进展 总被引:12,自引:0,他引:12
本文综述了绵羊的重要经济性状QTL定位的方法和进展,并提出存在问题和展望。 相似文献
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随着饲料原料价格的不断攀升,小麦在价格优于玉米的情况下被饲料企业大量采购。在每年的6月份左右,新小麦收获期间,有很多不法商家将新小麦混到陈小麦中,从中赚取利益。陈小麦由于经过后熟期,其品质与价格较新小麦好,因此,有必要对新陈小麦进行辨别。现有的粮食新陈鉴别方法都是基于小麦在储藏过程中酶活性的变化及化学成分的变化机理而建立的,由于小麦陈化过程较其他粮种要缓慢得多,因此,小麦新陈鉴别一直是公认的技术难题。在实际工作中发现,单纯依靠感官或经验来判断粮食新陈度的方法不甚科学,通过查阅大量资料与实践经验, 相似文献
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柞蚕稚蚕室内(蚕床)育是指把1~2龄稚蚕放到室内蚕床中,进行室内塑料膜覆盖饲养的稚蚕保护育技术。稚蚕室内育可以使小蚕在能够控制温度、湿度、光线的室内环境进行放养,能有效的减免过低温、大风天、鸟虫害等自然灾害对稚蚕的伤害,同时把小蚕投放到经彻底消毒的环境中放养,可以有效的杜绝小蚕期感染传染性病害,因此,稚蚕室内育是集防病.保苗为一体的促进柞蚕高产高效的积极措施。从2002年开始,我局按照科技型、高效型蚕业的发展思路,从推广稚蚕保护育新技术入手,积极探索高效蚕业发展路子,在局属熊背柞蚕原种场进行稚蚕室内(蚕床)育试验与探索,基本掌握了该项技术的要点,取得了比对照区保苗率提高60%,单产提高20%~30%的增产效果,其技术操作要点如下。 相似文献
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本刊讯(特约通讯员谢合平)10月中旬早熟柑桔上市以来,湖北省宜昌市夷陵区龙泉镇白庙村标准桔园柑桔的收购价2元/kg,最高达到了3元/kg。据了解,近年来,夷陵区围绕打造全国知名“桔都”,以小(小溪塔)鸦(鸦鹊岭)路沿线小溪塔街道、龙泉镇、鸦鹊岭镇为建设重点,大力实施了标准果园创建,突出改路、改水、改密、改肥,实施公路硬化到园、水电供应到园、沟渠贯通到园、机械普及到园和综合防治到园等“五到园”工程,辐射带动全区建设标准果园6666.67hm^2。 相似文献
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羊源致病性柠檬酸杆菌4种佐剂灭活疫苗的免疫效果比较 总被引:1,自引:0,他引:1
为筛选羊源弗氏柠檬酸杆菌灭活菌体疫苗的合适佐剂,本研究以灭活羊源弗氏柠檬酸杆菌LK-1株为抗原分别制备其矿物油疫苗、铝胶疫苗、GEL疫苗和ISA201疫苗。将4种不同佐剂疫苗分别背部皮下免疫小鼠(0.2 mL/只)和颈部肌肉免疫羊(2 mL/只)进行疫苗安全性试验。用4种不同佐剂疫苗分别背部皮下免疫小鼠(0.2 mL/只)两次后使用3 LD50的LK-1株进行腹腔攻击;颈部肌肉免疫羊(2 mL/只)两次后使用2个致死剂量的LK-1株进行耳静脉攻击,比较4种不同佐剂疫苗对小鼠和羊的保护率并对小鼠和羊免疫血清进行微量凝集抗体检测。疫苗安全性试验结果显示,矿物油疫苗导致接种动物出现严重的精神沉郁、食欲减退、以及接种部位发生肿胀坏死和疫苗残留等不良反应;其它3种佐剂疫苗不良反应较轻微。动物免疫试验结果显示,4种佐剂疫苗对小鼠的攻毒保护率分别为85%、50%、80%、100%,对羊的保护率分别为100%、75%、0、100%。4种佐剂疫苗综合比较,ISA201疫苗使接种动物产生最轻微的副反应,而且能产生较高的抗体水平和最强的保护力。本研究为进一步开发羊柠檬酸杆菌病的灭活疫苗奠定基础。 相似文献