贵州天然豆科牧草——窄叶野豌豆的引种与驯化

对采自贵州省册亨县、三都县的窄叶野豌豆野生种进行了引种驯化。结果表明：其产草量中等，鲜草３７．５～４５ｔ／ｈｍ２，草质优良；生育期短，早熟；种子产量高，收纯净种子５００～６００ｋｇ／ｈｍ２。适合在我国南方中亚热带地区同水稻、玉米轮作，也可作为农田填闲作物栽培     

全基因组关联分析在猪育种中的研究进展

全基因组关联分析(genome-wide association studies, GWAS)是一种利用大规模群体的DNA样本进行全基因组高密度基因型分型,探究与目标性状相关联的遗传变异的研究方法。GWAS在揭示猪重要经济性状的变异规律和推动基因组选择在猪育种中的实际应用等方面有着重要作用。本综述主要围绕GWAS的基本原理、GWAS的分析方法、GWAS在猪育种方面取得研究进展和其未来展望进行综述,以期为利用GWAS进行猪重要经济性状遗传基础的研究提供参考。     

鸭腺病毒3型Fiber-2蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

为进一步研究鸭腺病毒3型（DAdV-3）Fiber-2蛋白,研究通过PCR扩增fiber-2基因,构建p ET32a-DAdV3-fiber2原核质粒,表达并纯化蛋白,以纯化的蛋白为免疫原,免疫6周龄雌性BALB/c小鼠制备抗Fiber-2单克隆抗体杂交瘤细胞,采用间接免疫荧光试验和免疫印迹试验进行鉴定,并用于DAdV-3 Fiber-2杆状病毒表达产物的鉴定。结果显示：原核表达获得1.77 mg/mL Fiber-2蛋白,筛选获得2株阳性单克隆细胞株2E10E4和4F7F10,两株单克隆抗体均为IgG 1型,轻链类型为κ;DAdV-3感染的LMH细胞中存在特异性荧光,免疫印迹试验确认在约59 ku处出现特异性条带;采用制备的单克隆抗体确认了表达Fiber-2蛋白的重组杆状病毒。研究获得了针对DAdV-3 Fiber-2蛋白的单克隆抗体,为深入探究Fiber-2在DAdV-3感染机制中的作用以及为建立DAdV-3抗原免疫测定技术奠定了基础。     

动物血液资源的开发利用研究进展

对动物血液资源的理化和营养特性进行了阐述,重点介绍了近年来动物血液产品在饲料、食品和医药工业领域的开发利用现状与应用研究进展,特别是介绍了青海牦牛和藏羊特色功能性食品的研发成果,并对动物血液资源开发利用的不足以及今后的开发利用前景进行了综述。     

二代靶向测序在CRISPR/Cas9靶区筛选中的应用性研究

旨在利用二代靶向测序技术比较不同靶区对CRISPR/Cas9基因编辑结局的影响,为该技术应用过程中的靶区筛选提供技术参考。本研究进行如下试验:1)以小鼠Pyk2基因为研究对象,针对其第一外显子区设计3个靶区,通过打靶质粒构建、细胞转染及转染细胞DNA二代靶向测序等手段发现,不同靶区总体的基因编辑(Indels)效率相差较大(site1:32.0%;site2:7.9%;site3:69.5%),编辑修复的偏好性也存在较大区别;而对于同一靶区,总编辑效率在2组试验重复中较为稳定(site1:31.8%vs 32.3%;site2:7.4%vs 8.4%;site3:71.3%vs 67.8%),编辑的偏好性也相对一致;2)针对上述筛出的最佳靶区site1,通过sgRNA与Cas9体外转录、小鼠胚胎显微注射和移植及子代的基因型鉴定等手段,结果发现,上述靶区的基因编辑偏好性在基因编辑动物生产中也得到证实;3)利用上述得到的site1靶区插入一个碱基的突变小鼠,在原靶区位置设计与site1仅相差一个碱基的sgRNA。通过突变小鼠基因组PCR和Cas9酶体外切割试验发现,靶区切割位点单碱基的插入就对该靶区编辑的效率产生显著影响(49.2%vs 0%)。综上所述,靶区选择对CRISPR/Cas9基因编辑的结局影响显著,通过二代靶向测序可以有效筛选CRISPR-Cas9基因编辑靶区,并在模式动物生产过程中也获得较好的结果。此外,针对靶区切割位点的单个碱基插入对基因编辑效率影响显著。     

我国奶业产业链问题研究

奶业是联动种植业、养殖业、加工业、服务业的完整产业链,奶业振兴可以促进第一、二、三产业的共同发展。奶业又是节粮、经济、高效的产业,奶业振兴有利于农业产业结构调整和畜牧业内部结构调整,可以有效促进农村经济发展,增加农民收入。奶业振兴还关系着提高全民健康水平和增强民族体质的大事。因此发展奶业成为国家的重大战略选择。近年来,奶业一直是国民经济中最蓬勃发展的行业之一。中国加入世界贸易组织也为奶业的发展注入了新的动力。本文阐述了我国奶业产业链的发展现状,总结了奶业产业链成熟的三种模式,并提出完善奶业产业链的建议,力求较完整地从产业链方面探讨当今中国奶业发展的最新格局以及对解决“三农”问题的贡献。