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为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,24 h后用鸡IFN-α/β处理细胞,结果荧光素酶基因在Mx启动子的作用下获得转录表达;荧光素酶的表达量与干扰素的抗病毒活性有着良好的线性相关性,并在干扰素处理细胞6 h后就可以检测;对鸡IFN-α和IFN-β检测的敏感性分别约为抗病毒活性定量检测方法的10和100倍。该检测系统与传统抗病毒定量检测方法相比,具有快速简便、准确敏感、便于高通量检测等优势,在禽类乃至哺乳动物干扰素生物学基础和应用研究及产业化过程中具有重要应用价值。 相似文献
54.
猪传染性胃肠炎分子生物学诊断研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
对国内现代分子生物学理论及TGEV的核酸性质建立的核酸探针、PCR、限制性酶切片段长度多态性(RFLP)分析等检测TGEV的研究进展进行了综述。 相似文献
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借助大型埋地工业试验环道,模拟生产管道的投产预热和停输再启动过程,开展埋地热油管道传热规律的试验研究,从蓄热量、等温线等角度对土壤温度场的建立以及停输再启动后土壤温度场的恢复时间等问题进行了关联分析。研究表明:埋地管道的预热过程,投油7 d后,管外土壤等温线形态固定,但温度值随着时间的延长逐渐上移增大;投油10 d后,等温线呈椭圆形分布于管道周围,水平方向半径为1.2 m,垂直方向半径为0.9 m;在距离管壁1.4~2.0 m的范围内,土壤温度浮动较小。对于计划停输,再启动后的前3 h,土壤蓄热量的增长速率最大,需要保持原油温度的稳定,在再启动后的前10 h内,尽量减少工况变动,以利于土壤温度场的恢复。 相似文献
58.
陕西关中东部棉花抗旱品种农艺节水综合技术研究 总被引:1,自引:0,他引:1
按照生态农业理论和抗旱节水技术要求,对棉花抗旱品种、不同密度、不同基肥N、P的施用量进行田间综合试验,采用正交设计法。3年试验研究结果表明:密度以每公顷种植7.5万株比4.5万株、6万株平均增产671.85kg、483.30kg,增产57.49%和41.36%。品种陕402(早熟)、陕576(中早熟)分别比中棉所19(中熟)增产16.62%和16.17%,具有较强抗旱性。磷酸二铵比尿素增产作用明显,每公顷施150、225kg分别增产11.35%和10.53%。 相似文献
59.
通过负链RNA病毒反向遗传操作技术,成功救获了表达增强绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的重组印地安纳株水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus Indiana serotype)、救获的重组病毒保持了野生型VSV高滴度生长特性,细胞连续传代10次仍保持GFP的稳定表达及生物学特性不变。本研究为VSV作为新型重组活病毒载体疫苗和肿瘤治疗载体研制及基础病毒学相关研究提供了理想的技术平台。 相似文献
60.
重组杆状病毒表达裂谷热囊膜蛋白的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
裂谷热(Rift valley fever,RVF)是由裂谷热病毒(RVFV)引起的烈性人兽共患传染病。囊膜糖蛋白G是病毒的主要结构蛋白,由基因组M节段编码,翻译后裂解为GN和GC,其中GN为诱导中和抗体的主要免疫原。本研究构建了分别表达RVFV囊膜蛋白G(N+C)、GN及GC的重组杆状病毒rBac—GCN+C、rBac-GN及rBac-GC。SDS-PAGE、Western-Blot表明分子量分别为56Ku、58Ku左右的重组GN和GC在rBac—GCN+C、rBac-GN及rBac-GC感染sf9昆虫细胞中获得表达,并具有特异免疫反应原性。以rBac—GN、rBac—GC和rBac—G(N+C)感染的昆虫细胞裂解物稀释后直接包被ELISA板,检测灭活RVFV免疫小鼠血清特异囊膜蛋白GN、GC特异抗体,显示出高度敏感性和特异性。结果表明,杆状病毒表达rGN、rGC和rG(N+c)具有替代RVFV全病毒(尤其是rGN),作为非疫区安全、敏感和特异的诊断抗原的潜力,并为RvF重组亚单位疫苗的探索研究奠定了基础。 相似文献