生猪标准化示范场技术集成与推广应用

广西富来康大荣牧业有限公司创建于2009年春,经过两年的努力,生猪标准化示范场通过验收,并获得2010年国家农业部第一批生猪标准化示范场称号。今年又参加全国100家典型示范场验收,标准化生产取得显著成效。在2011年广西畜禽养殖标准化示范创建现场培训会上,作为全区现场培训示范点,培训会代表200多人到现场参观,并在培训会上作了典型经验介绍。本公司生猪标准化示范场技术集成与推广应用情况如下：     

尼帕病毒G和F蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

为制备抗尼帕病毒(NiV)G和F蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究以表达NiV G和F蛋白的真核重组表达质粒pCAGG-NiVG和pCAGG-NiVF分别免疫BALB/c小鼠,采用常规技术制备杂交瘤细胞;以表达G和F蛋白的重组牛痘病毒(rWR-NiVG、rWR-NiVF)分别感染BHK细胞,通过间接免疫荧光(IFA)筛...     

基于Mx启动子和荧光素酶报告基因定量检测鸡Ⅰ型干扰素生物学活性的研究

为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子（Mxp）,并在其下游连接荧光素酶（Luciferase,luc）报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,24 h后用鸡IFN-α/β处理细胞,结果荧光素酶基因在Mx启动子的作用下获得转录表达;荧光素酶的表达量与干扰素的抗病毒活性有着良好的线性相关性,并在干扰素处理细胞6 h后就可以检测;对鸡IFN-α和IFN-β检测的敏感性分别约为抗病毒活性定量检测方法的10和100倍。该检测系统与传统抗病毒定量检测方法相比,具有快速简便、准确敏感、便于高通量检测等优势,在禽类乃至哺乳动物干扰素生物学基础和应用研究及产业化过程中具有重要应用价值。     

猪传染性胃肠炎分子生物学诊断研究进展

对国内现代分子生物学理论及TGEV的核酸性质建立的核酸探针、PCR、限制性酶切片段长度多态性（RFLP）分析等检测TGEV的研究进展进行了综述。     

东部原油管网能耗问题分析

针对目前东部原油管网存在的加热炉效率偏低、泵节流过大、能耗数据上传受限、动火和内检测作业频繁等问题,分析了东部原油管网的主要能耗设备和能耗数据。根据分析结果,制定了安装变频调速电机,对设备实行单台计量,规范计量校验制度和年检制度,统筹安排内检测、动火、清管作业,降低中朝输油管道加热油消耗等整改措施。     

采用保护测试仪的无源电流保护试验方法

无源电流保护整组试验目前普遍采用大电流发生器,通过在电流互感器一次侧增大电流方式来完成.在电流保护动作值较大时,大电流发生器输出电流幅度通常达不到要求,以致整组试验无法完成.提出将保护测试仪2个电流源设定到串联输出方式,使最大输出容量剧增,进而完成无源电流保护整组试验.     

埋地热油管道非稳态传热的环道试验

借助大型埋地工业试验环道,模拟生产管道的投产预热和停输再启动过程,开展埋地热油管道传热规律的试验研究,从蓄热量、等温线等角度对土壤温度场的建立以及停输再启动后土壤温度场的恢复时间等问题进行了关联分析。研究表明:埋地管道的预热过程,投油7 d后,管外土壤等温线形态固定,但温度值随着时间的延长逐渐上移增大;投油10 d后,等温线呈椭圆形分布于管道周围,水平方向半径为1.2 m,垂直方向半径为0.9 m;在距离管壁1.4～2.0 m的范围内,土壤温度浮动较小。对于计划停输,再启动后的前3 h,土壤蓄热量的增长速率最大,需要保持原油温度的稳定,在再启动后的前10 h内,尽量减少工况变动,以利于土壤温度场的恢复。     

陕西关中东部棉花抗旱品种农艺节水综合技术研究

按照生态农业理论和抗旱节水技术要求,对棉花抗旱品种、不同密度、不同基肥N、P的施用量进行田间综合试验,采用正交设计法。3年试验研究结果表明：密度以每公顷种植7.5万株比4.5万株、6万株平均增产671.85kg、483.30kg,增产57.49%和41.36%。品种陕402（早熟）、陕576（中早熟）分别比中棉所19（中熟）增产16.62%和16.17%,具有较强抗旱性。磷酸二铵比尿素增产作用明显,每公顷施150、225kg分别增产11.35%和10.53%。     

表达增强绿色荧光蛋白重组水疱性口炎病毒印第安纳株的构建

通过负链RNA病毒反向遗传操作技术,成功救获了表达增强绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的重组印地安纳株水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus Indiana serotype)、救获的重组病毒保持了野生型VSV高滴度生长特性,细胞连续传代10次仍保持GFP的稳定表达及生物学特性不变。本研究为VSV作为新型重组活病毒载体疫苗和肿瘤治疗载体研制及基础病毒学相关研究提供了理想的技术平台。     

重组杆状病毒表达裂谷热囊膜蛋白的研究

裂谷热（Rift valley fever，RVF）是由裂谷热病毒（RVFV）引起的烈性人兽共患传染病。囊膜糖蛋白G是病毒的主要结构蛋白，由基因组M节段编码，翻译后裂解为GN和GC，其中GN为诱导中和抗体的主要免疫原。本研究构建了分别表达RVFV囊膜蛋白G（N＋C）、GN及GC的重组杆状病毒rBac—GCN＋C、rBac-GN及rBac-GC。SDS-PAGE、Western-Blot表明分子量分别为56Ku、58Ku左右的重组GN和GC在rBac—GCN＋C、rBac-GN及rBac-GC感染sf9昆虫细胞中获得表达，并具有特异免疫反应原性。以rBac—GN、rBac—GC和rBac—G（N＋C）感染的昆虫细胞裂解物稀释后直接包被ELISA板，检测灭活RVFV免疫小鼠血清特异囊膜蛋白GN、GC特异抗体，显示出高度敏感性和特异性。结果表明，杆状病毒表达rGN、rGC和rG（N＋c）具有替代RVFV全病毒（尤其是rGN），作为非疫区安全、敏感和特异的诊断抗原的潜力，并为RvF重组亚单位疫苗的探索研究奠定了基础。