猪冠状病毒通用荧光定量PCR检测方法的建立

已知感染猪群的冠状病毒有猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)、猪血凝性脑脊髓炎病毒(PHEV);本研究拟建立针对这6种病毒的通用荧光定量PCR检测方法。依据NCBI公布的这6种猪冠状病毒序列,利用MEGA软件进行全基因序列比对,通过分析在ORF1b中找到1段长为196 bp的保守序列,设计兼并引物,建立了用于检测猪冠状病毒的通用荧光定量PCR检测方法;结果显示,该检测方法能扩增出6种猪冠状病毒,对PDCoV、PRCV、PHEV、SADS-CoV、TGEV的灵敏性均可达到10¹拷贝/μL,对PEDV的灵敏性可达到10⁰拷贝/μL;与CSFV、PRRSV、PPV、PCV、PRV无交叉反应,特异性良好;组内和组间变异系数均小于2.2%,重复性良好。利用建立的检测方法对62份病料进行检测,检测出27份样品呈现猪冠状病毒阳性,而利用普通RT-PCR方法共检测出24份阳性样品。选择2份猪冠状病毒阳性样品进行克隆测序,在NCB...     

中国茶思维对英语教学的影响

本文首先对中国茶思维的几个具体观点进行说明,接着对当前国内英语教学存在的问题加以阐述,然后在此基础上就中国茶思维对英语教学的影响进行具体说明,希望能够对国内英语教学的创新和改革有所帮助。     

猪传染性胃肠炎病毒S基因的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测

为建立猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank收录的TGEV-Miller毒株的S基因序列,设计合成1对特异性引物,用RT-PCR方法从疫苗株中扩增TGEV S基因的部分保守片段,并克隆到pGEM-T Easy载体上,得到重组质粒作为荧光定量RT-PCR检测...     

中草药制剂对新美系原种猪的生长性能和体液免疫影响研究

试验选择日龄基本相近、体重为(64±1)kg的健康新关系原种猪72头,随机分为4组,即3个试验组和1个对照组,每个处理设3个重复,每个重复6头,其中3个品种(杜洛克、大约克和长白)各2头.对照组猪饲喂基础日粮,3个试验组猪分别饲喂基础日粮+0.01%丹参片、基础日粮+0.03%金黄素和基础日粮+0.06%祛湿茶,试验期30d.试验结果表明,3个试验组分别比对照组的日增重提高5.76%(P<0.05)、9.52%和48.84%,在料重比方面分别提高0.37%、3.73%和9.33%,并能提高肥育猪血清IgG、IgA、IgM的水平,从而增强了新美系原种猪的自身免疫力.     

生物表面活性素体外抗猪细小病毒活性研究

研究了生物表面活性素(surfactin)体外抗猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)效果.观察生物表面活性素的细胞毒性,对PPV直接灭活作用,抗PPV吸附作用及对PPV生物合成抑制作用.结果表明,生物表面活性素对猪肾(porcine kidney,PK-15)细胞的TD50和TD0分别为31.25,4.03 μg/mL;具有直接灭活PPV效果,不具有抗PPV吸附作用,对PPV生物合成无显著影响.     

“青树管理法”

<正>黄山供电公司青树管理法是电力人履行四个服务、推进两个转变实践过程的系统再现,是深入开展党的群众路线教育实践活动的具体表现,也为黄山公司不断深化内部管理、切实提升运营水平积累了宝贵经验。     

哈尔滨五常市石刀山风景区野浴场规划设计

根据石刀山风景区风景名胜资源的类型及空间分布特点，围绕“滨河”．“生态”．“风情”、“趣味”．“科普”．“休闲”和“度假”等核心环节，运用整体规划和景观设计手法，充分彰显“进程式功能安排．生态型环境氛围，艺术化自然整合．诗意化景观建构”的构思和规划理念，营造具有生态景观特色和大地景观特色，山水交融，功能复合，富有个性的生态型湿地公园。     

不同肠球菌基因组DNA提取方法对PCR鉴定的影响

为研究肠球菌基因组DNA的不同提取方法对16SrRNA基因序列PCR、种属多重PCR、RAPDPCR等肠球菌鉴定结果的影响,分别采用6种基因组DNA提取方法(水煮法1、水煮法2、常规酚/氯仿抽提法、chelex-100法1、chelex-100法2和试剂盒法),对1株肠球菌标准菌株ATCC29212基因组DNA进行提取,以这些分别提取的DNA为模板在相同的扩增条件下进行PCR检测.结果表明,在16SrRNA基因序列PCR和种属多重PCR检测中以水煮法1进行肠球菌DNA的提取最适宜,而试剂盒法在RAPDPCR检测中效果最佳.     

6种落叶花灌木及其在廊道绿化中的养护管理

近年来,沈丘县廊道绿化工作取得了显著成绩,境内的高速公路、省道、河道、县乡道实现了绿化全覆盖。从实际出发,以宁洛高速和G220、S207、S217等廊道绿化为例,结合绿化植物选择配置,介绍了蜡梅、红瑞木、迎春花、月季、火炬树和黄栌6种植物在廊道绿化中的养护管理,以供廊道绿化参考。     

五种杀虫剂防治棉叶螨比较试验

为了筛选出适应我区生态环境的、既有效又经济的杀螨剂,2006年石河子市科技局在133团种子站进行了五种棉花杀螨剂的比较试验.