马铃薯低温响应的ScmiR390-5p及其靶基因表达与结构分析

【目的】研究马铃薯富含亮氨酸重复序列(leucine-rich repeat receptor-like protein kinase LRR-RLK)类受体蛋白激酶基因SCLRRK1受miR390（ScmiR390-5p）调控响应非生物胁迫的机理。【方法】通过低温响应马铃薯miRNA测序分析与靶基因预测,发现ScmiR390-5p通过调控1个可能的LRR类受体蛋白激酶基因对低温做出响应;利用实时荧光定量PCR技术（Quantitative Real-time PCR,RT-qPCR）验证ScmiR390-5p和SCLRRK1响应低温胁迫的表达情况;利用RLM-5′RACE确定ScmiR390-5p作用于SCLRRK1的切割位点;利用PCR技术克隆得到SCLRRK1的DNA序列和CDS序列,生物信息学分析SCLRRK1的结构和功能;利用RT-qPCR分析ScmiR390-5p/SCLRRK1在马铃薯各组织中的表达情况及其响应各种非生物胁迫的表达情况。【结果】RT-qPCR结果表明,低温诱导ScmiR390-5p表达,SCLRRK1的表达则受到低温的抑制,ScmiR390-5p和SCLRRK1的表达在低温胁迫下呈负相关性;RLM-5′RACE分析表明,ScmiR390-5p作用于SCLRRK1的切割位点是ATTCCT//CCTGAGTT,马铃薯ScmiR390-5p/SCLRRK1调控模块在低温响应中起作用。克隆结果表明SCLRRK1的CDS序列长度为2 685 bp,编码894个氨基酸,DNA序列长度为3 549 bp,含有1个内含子、2个外显子、3′非编码区和5′非编码区,ScmiR390-5p的靶位点位于SCLRRK1 CDS序列内部（960—981 bp,GGAACTATTCCTCCTGAGTTT）。生物信息学显示SCLRRK1是1个富含亮氨酸重复序列(leucine-richrepeat,LRR)的类受体蛋白激酶基因,编码的蛋白属于跨膜分泌蛋白。马铃薯组织表达RT-qPCR分析显示,ScmiR390-5p在叶中的表达量最高,根次之,茎中（地上茎、块茎和匍匐茎）表达量较低;而SCLRRK1的表达情况与ScmiR390-5p相反,其在叶中的表达最低,在茎中表达最高（匍匐茎>块茎>地上茎）。多种非生物胁迫结果显示,ScmiR390-5p和SCLRRK1表达在NaCl胁迫下呈负相关,ScmiR390-5p受到NaCl胁迫诱导表达。与对照相比,ABA和6-BA处理下ScmiR390-5p表达先下降之后呈波浪小幅回调;6-BA处理下SCLRRK1表达持续升高,ABA处理下SCLRRK1表达先上升后下降。GA₃、PEG和IAA处理8 h时,ScmiR390-5p的表达达到峰值,GA₃、PEG和IAA处理都能诱导SCLRRK1表达,但其变化趋势与ScmiR390-5p相关性不强。【结论】SCLRRK1具备编码LRR类受体蛋白激酶的核酸、氨基酸序列和结构基础,是ScmiR390-5p的靶基因;ScmiR390-5p/SCLRRK1调控模块在马铃薯组织器官中具备明显作用;ScmiR390-5p在转录后水平通过抑制马铃薯SCLRRK1的表达对低温胁迫做出响应,同时,马铃薯ScmiR390-5p/SCLRRK1调控模块在NaCl和6-BA胁迫响应中起作用,但不对ABA、GA₃、IAA和PEG胁迫做出响应,ScmiR390-5p和SCLRRK1分别在转录水平受到ABA、GA₃、IAA和PEG胁迫信号调控。     

墨西哥菊叶薯蓣茎段再生繁殖技术

【目的】建立高效稳定的菊叶薯蓣组织培养快繁体系,以保持品种的遗传稳定性。【方法】分别以室内和田间培育的墨西哥菊叶薯蓣藤茎茎段为外植体起始材料,比较依次用0.55%次氯酸钠、体积分数70%酒精和1.0g/L HgCl2消毒不同时间对外植体的消毒效果,并通过不同植物生长调节剂及其浓度组合筛选适合菊叶薯蓣组培快繁的茎段不顶芽诱导培养基、继代培养基和生根培养基。【结果】以室内培养的墨西哥菊叶薯蓣藤茎为起始材料,依次用0.55%次氯酸钠消毒5 min,体积分数70%酒精消毒1 min,1.0 g/L HgCl2消毒8 min,最后用无菌水清洗3次,获得材料的污染率可控制在5%;筛选出茎段不定芽诱导培养基为MS+3.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA,不定芽诱导数可达4.3个,诱导率达95%,且不定芽质量较好;将分化的不定芽转至MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L IBA继代培养基,单茎芽增殖率可达到3.5;茎芽在1/2 MS+1.0 mg/L IBA生根培养基上可以诱导出良好的根系。【结论】按上述方法培育的菊叶薯蓣生根试管苗炼苗后,移栽至珍珠岩+粗沙+田园土按体积比2∶1∶1配置的介质中,移栽成活率可以达到85%以上,表明所建立的墨西哥菊叶薯蓣组培快繁体系是可行的。     

养殖场预防性驱虫要点

1 寄生虫的危害 寄生虫的危害主要表现在以下五个方面：一是夺取动物营养,造成动物贫血、瘦弱、发育停滞;二是机械作用造成占位压迫、管道阻塞;三是损伤器官引发炎症;四是带入病原微生物引起继发感染;五是降低动物机体免疫能力。因此,各养殖场应根据本场实际情况制定科学合理的驱虫程序,定期进行驱虫。据报道,发达国家的养殖场每年用于驱虫的费用约占防治支出费用的30％左右,     

魔芋甘露聚糖热风干燥工艺研究

利用热风干燥装置,在风温50～80℃,风速0.5m/s,厚5～12.5mm,面积78.5cm2的条件下,研究了风温、厚度对魔芋甘露聚糖干燥特性和效率的影响,提出了魔芋甘露聚糖热风干燥工艺。     

太白山人杨文洲

他走了,匆匆忙忙,去为森林资源保护呐喊。 他回来了,一头扎进了大山深处。 他就是太白山人杨文洲。     

冬季日光温室一种两收高效栽培技术

北京市大兴区北臧村镇六合庄村,于1995年创造出冬季日光温室"一种两收"栽培技术,十多年来一直采用该种植模式,平均每年每667 m2效益在20 000元左右,菜农杨殿富2008年最高收入逾23 000元,春节前樱桃萝卜收获上市,每667 m2产量2 000 kg,收入逾10 000元,翌年3月中旬收获白萝卜,正值淡季上市,每667 m2产量7 000 kg,收入13 000元.     

温度对“杰兔”兔眼蓝莓花粉活力及柱头可授性的影响

以5年生兔眼蓝莓品种"杰兔"为试材,研究了温度对花粉活力和柱头可授性的影响,在此基础上开展了花粉活力和柱头可授性与温度的回归分析,以期阐明温度对蓝莓授粉的影响,明确蓝莓花粉活力和柱头可授性的最适温度,为蓝莓生产栽培花期管理,人工辅助授粉天气选择及温度抗性育种积累科学依据。结果表明:温度对"杰兔"的花粉活力和柱头可授性有显著影响,当温度显著降低或升高时花粉活力和柱头可授性均显著下降,当日均温为2.4℃时花粉活力仅为14.0%,同时柱头不具可授性,当最高温为32.3℃时花粉活力亦仅为41.0%,同时仅30.0%的柱头具强可授性。回归分析结果表明,"杰兔"花粉活力最高的适宜温度为21.5℃,柱头可授性最强的适宜温度为18.2℃。     

秋甘蓝直播栽培技术

北京市大兴区人民政府蔬菜办公室自2005年开始推广秋甘蓝直播栽培技术,2007年全区秋甘蓝直播栽培种植面积30多hm2,每667 m2产3 500kg以上,平均每667 m<'2>收入3 200元.     

松辽黑猪RBP4基因多态性及其与繁殖性状的关联分析

为探究松辽黑猪视黄醇结合蛋白4（RBP4）基因多态性及其与繁殖性状的关联性,试验选取132头松辽黑猪作为研究对象,以与猪繁殖性状相关的RBP4基因为候选基因,采用PCR-HRM分析与PCR产物直接测序相结合的方法检测松辽黑猪RBP4基因部分外显子的单核苷酸多态性（SNP）,分析RBP4基因SNP与母猪总产仔数、产活仔数、乳头数及仔猪初生重、3周龄重、断奶重的关联性。结果显示,松辽黑猪RBP4基因第3、5外显子上各存在1个SNP位点,分别命名为为G45A和C170T,其中在G45A位点检测到GG、GA和AA 3种基因型,在C170T位点检测到CC和CT 2种基因型。群体遗传参数分析及卡方适合性检验结果显示,RBP4基因G45A位点在松辽黑猪群体中分布较为均匀,遗传变异程度处于中等水平,偏离Hardy-Weinberg平衡（P<0.01）;C170T位点在松辽黑猪群体中分布不均匀,遗传变异程度较低,未偏离Hardy-Weinberg平衡（P>0.05）。关联分析结果表明,在RBP4基因G45A位点上,3种基因型的总产仔数及产活仔数均表现为：GG > GA > AA,其中GG基因型的总产仔数、产活仔数显著高于AA基因型（P<0.05）;GG基因型仔猪3周龄重显著低于GA基因型（P<0.05）;GG基因型仔猪断奶重显著低于GA及AA基因型（P<0.05）;各基因型在仔猪初生重及母猪乳头数上未表现出显著差异（P>0.05）。在C170T位点上,不同基因型松辽黑猪的总产仔数、产活仔数、乳头数及仔猪初生重、3周龄重、断奶重均无显著差异（P>0.05）。综上,RBP4基因G45A位点对松辽黑猪产仔数具有显著影响,但该位点是否可作为松辽黑猪产仔数相关的遗传标记,有待进一步研究;RBP4基因C170T位点可能不是松辽黑猪繁殖性状相关的突变位点,在后期工作中需扩大群体做进一步验证。     

雏鸡硫胺素缺乏症

<正> 1985年7月13日,紫云县品种改良站一批为贵农黄肉蛋兼用鸡种,出壳共713只,9日龄,发生死亡140余只,死亡率为19.64%。病史为刚开食时就赔有链霉素500万单位加普通水25000毫升,以后又喂氯霉素和卡那霉素等饮水。只喂混合饲料(比例为玉米50%、黄豆