利用iTRAQ蛋白质组技术筛选与鸡喙畸形相关的候选蛋白

【目的】中国地方鸡种如北京油鸡、清远麻鸡存在喙畸形现象,表现为上下喙咬合不全,呈交叉状。严重影响鸡饮水和采食,从而影响个体发育和生产性能的发挥,造成一定经济损失。笔者根据喙畸形个体的系谱记录,发现喙畸形的形成受到遗传因素的影响,但具体机制尚不明确。蛋白是行使各种生物学功能的最终形式之一,喙畸形个体的发生可能是由于核心蛋白或者相关调控蛋白代谢异常造成的。利用同位素标记相对和绝对定量（isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ）技术以及生物信息学分析方法,筛选鸡畸形喙与正常喙中差异表达的蛋白,作为喙畸形相关的重要候选蛋白,为进一步研究北京油鸡喙畸形的遗传机制奠定基础。【方法】挑选3只120日龄喙畸形的公鸡作为试验组,编号为W1、W2、W3,同时,挑选与试验组个体为同胞关系（全同胞或半同胞）的喙正常公鸡作为对照组,编号为Z1、Z2、Z3。将喙畸形与其同胞正常个体作为一个比对组,iTRAQ试验具体包含3个比对组,即W1 vs Z1,W2 vs Z2,W3 vs Z3。屠宰个体后,剔除喙组织周围肌肉和筋膜,分离得到喙上颌骨和下颌骨,提取总蛋白样品,应用6个 iTRAQ标签标记各蛋白样品,经过色谱层析预分离,联合液相串联质谱分析,采用Mascot 2.3.02软件对蛋白进行鉴定和定量分析。试验组（W）与其同胞对照组(Z)样本比较（W1 vs Z1,W2 vs Z2,W3 vs Z3）,选择肽段数≥2,表达差异值＞1.2（上调）或＜0.83（下调）,且P＜0.05的蛋白作为差异表达蛋白。【结果】利用iTRAQ技术一共在喙组织中鉴定到3 372个蛋白,鉴定到的特异性肽段有12 769个。其中原鸡蛋白1 869个,分子质量主要分布在10-100 kD之间。3个比对组共鉴定出159个表达量有显著差异的蛋白质,其中包含70个表达上调的蛋白,89个表达下调的蛋白。统计各比对组蛋白表达差异值发现,表达量差异较大的上调蛋白质有LPL、MLC-2、CO9A1、MATN3、HSP90B1等,表达量差异较大的下调蛋白质有MBP、RLA1、PRVM、HAPLN1等。结合已经报道的这些蛋白的生物学功能,其中CO9A1、MATN3、HAPLN1与软骨合成和软骨骨化相关,CO9A1是带状软骨纤维的组成物质,MATN家族是非胶原性细胞外基质蛋白家族,HAPLN1是软骨细胞外基质的重要组成成分;PRVM是细胞内钙离子结合蛋白,参与调控Ca2+离子信号通路;LPL是多功能酶,主要在脂质代谢和转运过程中起作用,参与调控PPAR信号通路。初步筛选出CO9A1、MATN3、HAPLN1、PRVM、LPL作为与鸡喙畸形相关的候选蛋白。【结论】差异表达蛋白的发现为鸡喙畸形形态的发生提供蛋白质水平上的理论依据。     

特色小体型优质肉鸭屠宰性能和肉品质性状及其相关性分析

为了探讨乌嘴白羽小体型优质肉鸭屠宰性能、肉品质与营养成分及其相关性,本实验随机挑选63日龄的小体型优质肉鸭(公母各15只)进行屠宰性能、肉品质和营养成分测定。结果表明：63日龄公鸭宰前活重、屠体重和头重极显著高于母鸭,半净膛重、全净膛重、脚重显著高于母鸭,而腹脂率显著低于母鸭。公母鸭胸腿肌肉色、pH、剪切力、失水率等常规肉品质无显著差异。肌肉营养成分结果显示,公鸭胸肌蛋白质和脂肪含量极显著高于母鸭,而水分含量极显著低于母鸭;母鸭腿肌蛋白质含量、胶原含量极显著高于公鸭,而水分含量极显著低于公鸭。相关性分析结果显示,小体型优质肉鸭胸肌pH₁值和pH₂₄值极显著正相关,水分含量与头重显著正相关;肉色L值(亮度值)和头重,蛋白含量与脚重,脂肪含量与头重均呈极显著负相关,肉色b值(黄度值)和剪切力,蛋白含量与头重,脂肪含量与活重均呈显著负相关;腿肌蛋白含量和头重极显著正相关,pH₁值和pH₂₄值,pH₂₄值和剪切力显著正相关;pH₁值和腿肌重呈极显著负相关,头重和L...     

光照强度对北京油鸡生长激素和褪黑激素含量的影响

研究光照强度对北京油鸡各阶段生长激素和褪黑激素含量的影响.选用1日龄北京油鸡1 200只作为研究对象,平均分到四个组中,每个组6个重复,每个重复50只鸡.第1周光照强度为20 lx,第2～13周分别进行1、5、10和50 lx 4种光照强度处理.分别在第4、8和12周时,每个重复中随机选择2只鸡,采集血样,测定血清中生长激素和褪黑激素的含量.结果显示,第4和8周时,5和10lx组生长激素水平极显著高于1和50 lx组(P＜0.01);第12周各组的含量没有显著差异.1 lx下褪黑激素含量最高,且8周时极显著高于其他三组(P＜0.01).因此在5～10 lx光照强度下北京油鸡血清中生长激素和褪黑激素的含量最高,可以维持正常的生长发育.     

鸡喙组织主要化学成分分析

地方鸡生产中,存在不同程度的鸡喙畸形现象,其中有些品种(或品系)发生率可达3％.喙畸形发生后,将不同程度影响鸡的采食,导致生长缓慢,产蛋减少甚至绝产,严重者死亡.鸡喙为采食器官,由上下颌构成其骨质部分,表面被覆角质层[1].胚胎时期鼻骨以前的骨骼分为三部分,依次为前颌骨、前鼻骨软骨、鼻甲骨[2],出壳后上颌骨愈合为一体[3-5],鸡喙顶壁为硬腭,顶壁中部有一裂隙,为鼻后孔,许多唾液腺开口于顶壁和底壁的黏膜上,上颚有大量感应磁场的乳头状突起[6,7].     

苏氨酸对北京鸭1 ~ 14日龄生长性能和血浆生化指标的影响

为研究饲粮苏氨酸缺乏和过量对北京鸭生长性能和血浆生化指标的影响,采用单因子安排的完全随机试验设计,设置3个苏氨酸水平（苏氨酸缺乏、适宜和过量）,共3个处理,每个处理10个重复。300只1日龄雄性健康北京鸭随机分配到30个重复笼中,分别饲喂苏氨酸缺乏、适宜和过量的饲粮。鸭舍保持24 h光照,试验期为14 d（1 ~ 14日龄）。结果表明：饲粮中缺乏苏氨酸会降低北京鸭体重、平均日增重和平均日采食量（P < 0.0001）,增加耗料增重比（P =0.0002）,而饲粮苏氨酸过量对1 ~ 14日龄北京鸭生长性能无显著影响（P ＞ 0.05）。与适宜组相比,苏氨酸缺乏组体重和日增重分别降低48.40%和53.38%,耗料增重比增加了16.13%。饲粮缺乏苏氨酸会降低血浆中ALT和ALP活性、UA含量,增加血浆中DBIL含量（P < 0.05）,而对血浆中AST、CK、α-HBDH和CHE活性,以及TP、ALB、GLB、A/G、TBIL、IBIL、GLU、LDH、CHOL、TG、HDL-C和LDL-C的含量无显著影响（P ＞ 0.05）|饲粮苏氨酸过量对血浆生化指标均无显著影响（P ＞ 0.05）。饲粮苏氨酸缺乏会降低1 ~ 14日龄北京鸭生长性能,影响血浆生化指标|饲粮苏氨酸过量对1 ~ 14日龄北京鸭生长性能和血浆生化指标无显著影响。[关键词] 北京鸭|苏氨酸|生长性能|血浆生化指标     

赏《枯木逢春》

“忌平淡,求奇险”是一切艺术所共循的特征之一。在造型结构、树石枝干等分布的艺术处理上,不仅要做到“平正中求险绝”,还要做到“险绝中寓平正”,给人一种既出人意外,又引人入胜,且合情合理的感觉。日本盆栽《枯木逢春》(《中国花卉盆     

大体型凤头鸭屠宰性能及肉品质研究

鸭肉以其独特的风味和丰富的营养价值深受消费者喜爱。为了探究如何在满足消费需求的同时保留当地品种的遗传多样性,本实验将润州凤头白鸭为母本、樱桃谷鸭为父本进行杂交,后代称为大体型凤头鸭（暂定名）。为了探讨大体型凤头鸭屠宰性能、肉品质及营养成分,本实验随机选取49日龄的大体型凤头鸭80只（公母各40只）进行屠宰性能、肉品质及营养成分的测定。结果表明：公鸭的体斜长、半潜水长、胫长显著高于母鸭;公鸭屠前活重、胴体重、全净膛重、全净膛率、屠宰率都显著高于母鸭;公鸭胸肌的脂肪含量显著低于母鸭,公鸭腿肌的蛋白含量显著高于母鸭;公鸭胸肌中的必需氨基酸、鲜味氨基酸、总氨基酸含量均显著低于母鸭,而腿肌中三者含量均显著高于母鸭;公鸭胸肌不饱和脂肪酸含量、必需氨基酸含量显著高于母鸭,腿肌中不饱和脂肪酸含量、必需氨基酸含量显著低于母鸭;公鸭胸肌、腿肌中的铁含量显著高于母鸭。本研究结果表明,大体型凤头鸭体型介于润州凤头白鸭和樱桃谷鸭之间,公母间存在明显差异,这些结果为大体型凤头鸭的选育和种质资源开发利用提供了理论参考。     

尼罗罗非鱼鼠李糖凝集素 (RBL-1)在非特异性细胞防御病原菌感染中的功能

为了探究鼠李糖凝集素（Rhamnose-binding lectin, RBL）在硬骨鱼非特异性细胞防御病原菌感染中的作用,本研究以尼罗罗非鱼为研究模型,首先通过分离头肾单核/巨噬细胞进行体外菌应激实验,发现在罗非鱼两种重要的致病菌-无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）和嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）应激后,尼罗罗非鱼L-鼠李糖凝集素1（OnRBL-1）的表达量显著上调。然后,通过荧光定量PCR（qRT-PCR）检测发现OnRBL-1重组蛋白能够调节病原菌诱导细胞炎症因子的表达,包括显著抑制菌诱导的IL-6、IL-8和TNF-α的表达,和促进IL-10和TGF-β的表达。此外,通过流式细胞术检测证实OnRBL-1具有促进单核/巨噬细胞的吞噬作用,同时增强呼吸爆发水平和上调活性氧的释放。以上研究结果表明,OnRBL-1在罗非鱼单核/巨噬细胞非特异性细胞防御中发挥重要的调节作用。本研究为探讨RBL-1在硬骨鱼宿主防御病原菌感染中的功能提供了参考,并有助于完善和丰富硬骨鱼类RBL的功能和在抗菌免疫应答中的基础理论体系,具有重要的科学意义。     

黄土堆积体植物篱减沙效益与泥沙颗粒分形特征研究

为探究植物篱措施对工程堆积体边坡的减流减沙效益及其对侵蚀泥沙颗粒分形维数的影响,以堆积体未防护边坡为对照,以不同放水流量对不同坡度堆积体植物篱防护边坡进行了放水冲刷试验。结果表明:与对照相比,植物篱边坡初始产流时间滞后100~500 s,其产流率、产沙率整体均较小,产流率在时间尺度上表现为间歇性波动上升;植物篱减流效率在4%~60%之间,减沙效率范围在15%~50%之间,减流减沙效率均随坡度和放水流量的增加呈幂函数形式减小;各处理侵蚀泥沙颗粒中粉粒均占主导地位,黏粒次之,砂粒含量最少。与对照小区相比,植物篱防护边坡侵蚀泥沙砂粒体积分数降低,黏粒和粉粒体积分数升高;黏粒富集率增加,砂粒富集率减小,泥沙颗粒分形维数增大。分形维数与黏粒和砂粒体积分数之间均呈极显著线性相关,侵蚀泥沙颗粒分形维数主要由黏粒体积分数决定。