猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗和变异株灭活疫苗的免疫效果评价

分别采用猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1R致弱毒疫苗株和变异毒株灭活疫苗免疫接种40日龄～45日龄仔猪,免疫接种后4周,用高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)HuN-4变异株强毒攻毒,攻毒后21 d剖检,取主要器官作病理组织学观察和病毒抗原定位.结果显示变异毒株灭活疫苗免疫攻毒后导致的病理变化和病毒抗原分布程度均明显高于CH-1R弱毒疫苗免疫组.免疫病理学研究结果表明CH-1R 弱毒疫苗对HU-4株强毒免疫保护效果好于变异毒株灭活疫苗.     

PRRSVGP5蛋白原核表达载体的构建与鉴定

通过RT-PCR获得猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）CH-1a株GP5蛋白基因,克隆至pMDl8一T载体。经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚克隆至原核表达质粒pGEX-6p—1,构建原核重组质粒（pGEx—GPS）,转化至E．coli B1221感受态细胞,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳显示重组蛋白以包涵体形式得到了表达,Westernblot与间接ELISA试验分析表明,该蛋白与PRRSV阳性血清具有良好的免疫反应性。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白Nsp4的表达及其抗血清的制备

根据GenBank中已发表的高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV）HuN4株全基因组序列,设计合成一对引物,对PRRSV HuN4株非结构蛋白Nsp4（Nonstructural protein 4基因进行RT-PCR扩增,克隆到原核表达载体pET30a（＋）中,构建重组表达载体pET30a-Nsp4,经酶切测序鉴定。将pET30a-Nsp4转化表达菌株BL21（DE3）,诱导可表达分子量约为27kDa重组蛋白。Westernblot显示其具有较好的反应原性,经镍离子亲和层析（Ni-NTA）纯化获得了高纯度的可溶性重组蛋白。将纯化的Nsp4蛋白免疫BALB／c小鼠,抗血清ELISA效价达1：16000,Western blot和IFA表明,所制备的抗血清能够特异性识别PRRSV自身表达的Nsp4蛋白。本研究获得了可溶性的PRRSV Nsp4蛋白,制备了Nsp4特异性多抗血清,为进一步研究Nsp4蛋白的亚细胞定位及功能奠定了基础。     

猪传染性胸膜肺炎的诊治

猪传染性胸膜肺炎(APP),亦称猪嗜血杆菌胸膜肺炎,是由胸膜肺炎放线杆菌(HP)引起的一种呼吸道传染病,以发生胸膜肺炎为主要特征,各年龄猪均易感,该病广泛流行,对养猪业危害严重。2006年1月份,我市某猪场发生了一起以纤维素性胸膜肺炎为主要特征的传染病,经发病情况及临床症状、剖检变化、实验室检查,初步确诊为猪接触传染性胸膜肺炎。现报告如下:1发病情况及临床症状2006年1月10日,该养猪场从外地买回30头大白猪。1月17日下午发现有个别猪精神沉郁,进食减少,饮水量增加,呼吸困难,咳嗽,体温40℃,至18日,共有8头猪发病,发病猪75日龄左右,主要…     

猪高热病的病因分析及防控措施

自2006年以来,全国散发或区域性暴发流行猪高热病,给养猪行业造成了沉重的打击.导致猪高热病的原因是高致病性蓝耳病病毒变异毒株继发病毒性疾病:猪瘟、圆环病毒病-Ⅱ型、细小病毒病等:继发细菌性疾病:支原体肺炎、猪副嗜血杆菌病、传染性胸腹肺炎、巴氏杆菌病、链球菌病等多病原体混合感染引起哺乳仔猪、断奶仔猪、育肥猪、母猪发病率高、死亡率高,给我国养猪业造成严重的经济损失.     

乙型脑炎病毒E蛋白Ⅰ、Ⅱ结构域抗原表位鉴定

为鉴定乙型脑炎病毒(JEV)E蛋白I,II结构域抗原表位,本研究设计了一系列针对E蛋白的I、II结构域(1aa～296aa)部分重叠短肽,分别进行GST融合表达,用JEV阳性血清进行western blot和ELISA反应性筛选,获得了5个线性抗原表位分别为:E1(1FNCLGMGNRDFIEGAS16)、E10-4(77TGEAHNEK84)、E11-2(83EKRADSS YVCKQ94)、E19(145GTTTSENHGNYSAQVG160)和E33(257SQEGGLHHALAGAIVV272)。除E10和E19外,其它表位均为第一次通过实验方法确定的。将这5个融合蛋白对小鼠进行免疫,获得了高滴度的针对5个融合短肽的抗血清,研究证明了这些表位具有良好的免疫原性。本研究为乙型脑炎特异性诊断试剂及表位疫苗的开发奠定了基础。     

不同林龄杉木人工林冠幅与生长因子的关系

[目的]研究杉木人工林不同生长期冠幅因子及林分生长因子对其影响程度,为建立更好的冠幅预测模型及目标树经营提供理论依据,达到优化森林经营管理措施的目的?[方法]以广西贝江河林场3个不同林龄的杉木纯林为研究对象,布设9个20 m×20 m标准样地并展开全面调查,利用相关分析法及通径分析法探讨林分生长因子(胸径、树高)对冠幅...     

多杀菌素微乳注射剂在新西兰兔体内的药代动力学研究

为了解自制1%多杀菌素微乳注射剂在新西兰兔体内的药代动力学规律,采用ELISA和HPLC两种不同检测方法,分别分析血清和血浆中的药物浓度,PKsolver软件非房室模型计算药代动力学参数。结果:高效液相色谱法和酶联免疫吸附测定法检测药物代谢动力学主要参数分别为:达峰时间Tmax为(4.00±0.00),(2.67±0.67)h,峰浓度Cmax为(363.25±13.39)ng/mL,(282.19±24.59)ng/mL;半衰期t1/2为(81.24±10.80)h,(70.61±15.38)h;药时曲线下面积AUC为(17.52±1.24)μg·h/mL,(17.39±2.38)μg·h/mL。相同注射方式,相同剂量的两种检测方法之间比较,血药浓度变化趋势基本一致,但实测数据峰浓度Cmax差异显著(P0.05),其余参数差异不显著(P0.05)。结论:新西兰兔皮下注射多杀菌素吸收快速,消除缓慢,药物作用半衰期长,可在体内持续发挥药效。     

中华蜜蜂越冬阶段维生素和氨基酸的营养需要量

本试验旨在研究中华蜜蜂越冬阶段对维生素和氨基酸的需要量.根据中华蜜蜂天然饲料——蜂蜜中的维生素和氨基酸含量设计试验饲料[中剂量(67.28 mg/kg)维生素+中剂量( 127.85 mg/kg)氨基酸组、中剂量维生素+高剂量(256.70 mg/kg)氨基酸组、高剂量(134.56 mg/kg)维生素+中剂量氨基酸组...     

氮、磷、钾肥对紫花苜蓿种子产量及产量构成因素的影响

研究了N、P、K肥对甘农3号紫花苜蓿种子产量及产量构成因素的影响,结果表明:N、P、K肥施用量不同,对紫花苜蓿种子产量及其构成因素的影响不同.施肥量为47 kg N/hm2、120 kg P2O5/hm2、30 kg K2O/hm2时,实际种子产量最高,达1256.42 kg/hm2.N、P、K肥主要通过提高籽粒数/豆荚(x4)、豆荚数/花序(x3)和花序数/枝条(x2)来提高种子产量,表现种子产量的多元回归方程为y=-68.194 14.213X3 27.024X4.